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文档简介
第三章蛋白质的提取与分离中英联合实验室3.1蛋白质样品制备中英联合实验室样品制备的原则1尽可能采用简单方法,以避免蛋白丢失;2细胞和组织样品的制备应尽可能减少蛋白质的降解,低温和蛋白酶抑制剂可防止蛋白质的降解3样品裂解液应新鲜制备,并分装存于-80°C。勿反复冻融已制备好的样品;4通过超速离心清除所有的杂质5加入尿素之后加温不要超过37°C,防止氨甲酰化而修饰蛋白。中英联合实验室温和的裂解方法用于组成比较简单的样品,或分析某一特定的细胞器常用方法(1)渗透裂解:血细胞、组织培养细胞〔2)冻融裂解:细菌、组织培养细胞:液氫冻融3)去污剂裂解:用去污剂溶解细胞膜、裂解细胞,释放内容物;用于组织细胞(4)酶裂解细胞:植物、细菌和真菌等含有细胞壁的细胞中英联合实验室
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