胚胎移植对妊娠的影响

精品文档-下载后可编辑胚胎移植对妊娠的影响本文：朱虹孙莹璞金海霞宋文妍彭兆锋辛志敏单位：郑州大学第一附属医院生殖医学中心

1978年世界上首例试管婴儿诞生至今，临床促排卵方案和实验室技术已得到不断的发展和进步，目前世界范围内试管婴儿的成功率已达到40%～60%。但仍有近50%的不孕夫妇无法在首次IVF-ET周期中成功妊娠［1］。重复周期患者承受着极大的精神和经济压力，期待获得妊娠。目前，多数中心试图通过增加重复周期患者胚胎移植的数目来提高妊娠率，但同时多胎妊娠的风险也在上升［2］。因此，为了确保重复周期妊娠率并降低多胎妊娠，确定适合的移植胚胎数显得尤为重要。本研究回顾性分析了在郑州大学第一附属医院接受重复IVF/ICSI-ET治疗的不孕患者资料，探讨移植3枚优质胚胎和2枚优质胚胎对其娠结局的影响，从而为重复周期患者改善妊娠结局提供有效依据。

1资料与方法

1．1研究对象选择2022年1月至2022年12月在我院生殖医学中心接受IVF/ICSI-ET的不孕患者427周期。纳入标准:(1)既往IVF/ICSI-ET失败，重复接受IVF/ICSI-ET治疗≥2周期;(2)夫妇双方染色体检测均正常;(3)宫腔形态无异常(通过宫腔镜检查确定);(4)取卵日子宫内膜无不均质回声，内膜厚度≥9mm;(5)取卵后72h获得优质胚胎数量≥3枚。根据胚胎移植数量分为2枚组和3枚组，并按年龄分为＜35岁和≥35岁两个年龄层。

1．2方法

1．2．1控制性超排卵按我中心常规超排卵方案进行操作［3］，根据患者年龄、基础FSH水平、窦卵泡数和既往超排卵卵巢反应情况决定Gn启动剂量，启动后根据卵巢反应情况调整剂量。当有1个卵泡直径≥18mm或2个卵泡直径≥17mm注射HCG10000单位，注射HCG后34～36h阴道B超引导下穿刺取卵。

1．2．2胚胎培养与移植用G系列序列培养基(瑞士Vitrolife)培养卵子及胚胎，用密度梯度离心法处理。获得的卵冠丘复合物体外培养4～6h后行短时授精或ICSI。授精后16～20h观察原核情况，出现2原核(2PN)为正常受精。取卵后72h选择优质胚胎行胚胎移植。重复周期患者均行激光辅助孵出治疗。所有患者移植胚胎的数量均按照国家卫生部规定标准执行。

1．2．3胚胎质量评估根据卵裂球数目、形态和碎片情况评估胚胎质量。参照Peter评分系统标准［4］:将胚胎质量分为Ⅰ～Ⅵ级，Ⅰ级和Ⅱ级胚胎为优质胚胎。Ⅰ级:胚胎卵裂球均匀，规则，有中等折光性，透明带完整;Ⅱ级:卵裂球形态轻度不规则，不均匀，折光度有轻微变化，碎片少于10%或卵裂球分裂不一致，如3，5，6和7细胞胚胎;Ⅲ级:胚胎内碎片少于50%，碎片外卵裂球形态同Ⅱ级，具有一定折光性，透明带完整;Ⅳ级:胚胎内碎片大于50%，碎片外卵裂球具有生存活力;Ⅴ级:D2时为2PN，或是延迟受精，或是因D1补救受精;Ⅵ级:胚胎无活力，卵裂球溶解或致密变暗。

1．2．4临床妊娠判断标准胚胎移植术后14、18天查血β-HCG，确定生化妊娠。移植后35天B超检查见孕囊及胎心搏动确定为临床妊娠。

1．3统计学处理用SPSS17．0统计分析软件包处理数据，各组之间计量资料采用t检验，率的比较采用χ2检验。检验水准α=0．05，P＜0．05为差异有统计学意义。

2结果

2．1两组一般情况比较年龄＜35岁共298周期，其中2枚组94个周期，3枚组204个周期;年龄≥35岁共129周期，其中2枚组56周期，3枚组73周期。不同年龄段两组患者不孕年限、不孕因素、重复周期数、基础FSH、Gn天数和用量、HCG日雌二醇、HCG日内膜和获卵数差异均无统计学意义(P＞0．05)。见表1。

2．2两组患者体外受精情况比较年龄＜35岁的患者中，2枚组和3枚组优质胚胎率、可利用胚胎率、胚胎植入率、临床妊娠率、流产率和活产率均无统计学差异(P＞0．05);2枚组多胎妊娠率显著低于3枚组(P＜0．05)，新生儿体重则显著高于3枚组(P＜0．05)。见表2。年龄≥35岁的重复周期患者中，2枚移植组多胎妊娠率显著低于3枚组(P＜0．05)，但两组临床妊娠率、流产率、活产率以及新生儿体重的差异均无统计学意义(P＞0．05)。见表2。

3讨论

虽然随着辅助生殖技术的不断发展，试管婴儿的成功率日益升高，但仍有近一半的不孕症夫妇无法在首次IVF/ICSI-ET周期中成功妊娠，从而选择再次促排卵治疗。国内外文献均报道，重复周期妊娠率较首次周期降低［5，6］。如何提高重复周期成功率也成为临床所广泛关注的问题。以往研究显示，通过增加移植胚胎数量，可以提高妊娠率［2］。但亦有观点认为，患者年龄、子宫内膜容受性和胚胎质量是影响IVF成功率的主要因素，而并非移植胚胎的数量［7］。Silberstein等［6］研究证实，重复周期超过3周期后，虽然妊娠率较首次周期下降，但会维持在一个稳定的水平，并不会随着移植胚胎数量增加而提高。因此，本研究尝试探讨重复周期患者移植2枚或3枚优质胚胎对其IVF结局的影响。目前，我国人类辅助生殖技术规范允许重复IVF的患者移植3枚胚胎，而部分生殖中心及患者自身为提高成功率，往往也倾向于移植较多胚胎。但Sil-berstein等［6］多因素回归分析发现，只有年龄与重复周期的妊娠结局相关，而移植胚胎数与妊娠结局并无相关性。因此本研究以35岁作为分界点，分别对＜35岁年轻患者和≥35的高龄患者进行分析。研究结果显示，年轻患者重复周期获卵数、优质胚胎率与首次周期并无显著差异，且临床妊娠率与重复周期数无相关性［6，8］。同时，年龄＜35岁妇女获得优质胚胎和妊娠几率大，胚胎非整倍体发生率较小［9］。胚胎形态与着床关系密切，本研究中所移植的胚胎均为形态学上判断的优质胚胎，结果表明，＜35岁的重复周期患者，将移植的优质胚胎数从3枚减少到2枚，患者的胚胎植入率和临床妊娠率并无明显差异，这与朱依敏等［10］研究结果一致，其结果显示首次IVF周期减少年轻患者优质胚胎移植数后妊娠结果无差异。随着女性年龄的增加，生育能力开始下降，这一过程在35岁后开始加速，因此高龄并且存在IVF失败的患者成为我们临床工作中所要面临的难点。本研究发现，高龄重复周期患者移植2枚胚胎与3枚优质胚胎，胚胎的着床率和妊娠率并无明显差异，其均低于年轻患者。而Silberstein等［6］的研究发现，重复周期中即使增加高龄患者胚胎移植数量，其妊娠率仍低于年轻重复周期患者。提示影响高龄患者成功率的原因，并非胚胎移植的数量，而是患者自身原因，与高龄导致卵子及胚胎质量下降、子宫内膜容受性降低等有关［11］。有关报道认为，减少胚胎移植数量将降低临床妊娠率;亦有文献指出，选择优质胚胎移植，将移植胚胎数减少到2枚并不会影响妊娠率［12］。本研究结果与后者一致，认为导致不同结论的原因与未区分胚胎质量有关。优质胚胎的种植率高于非优质胚胎，但移植较多的优质胚胎保证妊娠率的同时也增加了多胎妊娠的风险。多胎妊娠是辅助生殖技术中常见的并发症，可对母婴双方造成不良影响［13］。年轻患者移植3枚优质胚胎，多胎率达到51．5%，减少到2枚后下降至23．5%;高龄人群减少优质胚胎移植后，多胎妊娠率也由47．4%下降至16．7%。因此，对于不同年龄阶段的重复周期患者，选择优质胚胎移植，可适当减少胚胎移植的数量，不影响妊娠率的同时可降低多胎妊娠的发生。进一步随访研究对象后发现，年龄＜35岁的患者，虽然2枚组和3枚组的活产率和流产率均无差异，但3枚组新生儿体重显著低于2枚组(P＜0．05)。本研究结果与Lawlor等［14］报道的结果一致，年轻患者移植2枚胚胎活产结局优于移植3枚胚胎，考虑与年轻患者胚胎种植潜能高，增加移植胚胎数量后多胎妊娠率增高，导致新生儿体重降低，增加了围生期婴儿死亡率和发病率。Lawlor等［14］研究发现，高龄患者移植2枚与3枚胚胎活产率并无显著差异，但移植3枚胚胎围产期母婴风险增加，移植2枚胚胎可获得最优的妊娠结局。本研究中，年龄≥35岁的患者，2枚