基于PCR的染色体步查技术课件

基于PCR的染色体步查技术（精选）16、云无心以出岫，鸟倦飞而知还。17、童孺纵行歌，斑白欢游诣。18、福不虚至，祸不易来。19、久在樊笼里，复得返自然。20、羁鸟恋旧林，池鱼思故渊。基于PCR的染色体步查技术（精选）基于PCR的染色体步查技术（精选）16、云无心以出岫，鸟倦飞而知还。17、童孺纵行歌，斑白欢游诣。18、福不虚至，祸不易来。19、久在樊笼里，复得返自然。20、羁鸟恋旧林，池鱼思故渊。基于PCR的染色体步查技术染色体步查(Chromosomewalking)是指由生物基因组或基因组文库中的已知序列出发,逐步探知其旁邻的未知序列或与已知序列呈线性关系的目的序列的核苷酸组成的方法和过程。经典的染色体步査方法比较烦琐,适合于长距离步行,而基于PCR的染色体步行技术相对而言则比较简便,适合于短距离步行。由于学习能力、智力状况以及家庭因素的影响，学生个体存在较大差异，这就要求教师在教学时不能采取“一刀切”的笼统做法，而应根据不同的学生制定不同的培养方案。对小学语文教学学情进行分析和把握，根据学生学习情况的不同对学生进行因材施教是教师的工作重点。一、对小学语文教学学情分析的原因1.满足学生发展的需要学生是学习的主体，教师是学生学习的指导者。学生是祖国的花朵，教师是花园里的园丁，园丁的职责在于通过自己辛勤的劳动使花朵茁壮成长。在教学过程中，教师要切实掌握学情，清楚地知道学生的优势和不足，根据学生的学习状况因材施教，以学生为主体，一切教学活动只为满足学生的需要，旨在促进学生德、智、体、美、劳的全面发展。2.改进教师教学的需要教师的教是针对学生的学，如果脱离了学生这一主体，教师的教也就失去了意义。在对学生进行教学时，一定要清楚地掌握学生的学习情况，只有基于这一情况的教学才真正做到了因材施教。如果对学生的学习情况了解不透彻，那么一切的教学活动就犹如空中楼阁，完全没有任何意义。3.促进教育发展的需要教育是针对学生的教育，如果教育不能促进学生的全面发展，那么教育就是失败的。教育事业的发展需要以学生为蓝本，学生的学习质量是判定教师教学水平的标准，也是衡量一种教育模式的有效指标。如果不对学生进行学情分析，就不能找出学生在学习中的不足，不能找出对策帮助其解决问题，也就不能帮助学生进行学习水平和学习能力的提升，从宏观的角度看，也就阻碍了整个教育的发展。二、如何对小学语文教学学情进行分析1.对学生原有的知识和能力进行分析对小学生已掌握的知识和能力进行测评分析，了解学生的学习水平和学习状态，从而为其制定相应的培养方案。以苏教版小学三年级语文教学为例，教材中有一篇课文《日月潭的传说》，在对这篇文章进行教学时，首先，教师可以让学生认读课文中的生字，朗诵课文；其次，在进行课文内容教学时，让学生用自己的话讲述文章所描绘的内容；最后，教师要进行深层次的教学，让学生试着把握作者所表达的情感。在整个教学过程中，教师要了解和掌握学生的课堂表现情况，根据学生的课堂表现，看到学生的长处和不足，并为其制定具体的学习方案。2.对学生的学习方法进行分析学生在学习的过程中会形成一套自己的学习习惯和学习方法。以学习《日月潭的传说》为例，在学习这篇课文时，有的学生会进行课前预习，自主查阅课文中的生字，标注文章的段落，这些都是非常好的学习方法。在对这些学情进行了解和分析后，教师可以适当地提高教学要求、增加教学难度，在学生掌握基本课文知识后，培养小学生的思维能力，深入了解文章的中心思想。3.对教材内容和学生生活经验进行统一分析学生的生活经历不同，所了解、认知的事物也不一样。北方的孩子难以想象南方的江南水乡，南方的孩子也无法感受北方的冰天雪地。教师在进行学情分析时，要充分考虑这些因素对学生学习的影响，以便采取相应的措施来弥补学生生活经验不足对学习的限制。例如，在学习《雪儿》这篇课文时，教师可以利用多媒体课件，播放有关雪花的视频资料，让学生对雪儿有更进一步的认识和了解。4.对学生的学习兴趣进行分析“兴趣是最好的老师。”只有对语文学科感兴趣，学生才会积极主动地学习语文，才能学好语文课程。所以，教师在进行学情分析时，一定要对学生的学习兴趣进行分析。具体的方法如下：根据学生的课堂表现情况，了解学生的兴趣所在，在对学生的兴趣有了一定了解之后，改进教学方法。注重对学生感兴趣内容的课堂教学，活跃课堂气氛，激发学生的学习兴趣和热情。三、掌握学情对小学语文教学的重要意义1.有助于教师的因材施教在小学语文教学中对学生的学情进行分析是每个教师必须做到的，要对学生进行教导，就必须了解学生的实际情况，明白学生需要什么，这样教师才能对学生进行整体把握，根据学生的需要，不断改进自己的教学方法以适应学生的发展需要。2.有助于学生的全面发展教师对学生的学习情况进行全面的把握，根据学生学习的具体情况，为其制订切实可行的学习计划和学习目标，这样学生就有了努力的方向，也就能在教师的指引下沿着正确的道路前进，这样一来，学生要实现全面发展也就不再只是口号，而是一定会实现的伟大目标。搞好学情分析是教师了解学生学习情况、对学生进行因材施教的有效途径。在进行小学语文教学学情分析时，教师要做到“透过现象看本质”，发现学生的优点和不足，不断改进教学策略和方法，对学生进行有针对性的训练和培养，促进学生的全面提高，从而实现小学语文教学健康、稳定的发展。摘 要：课程教育改革的发展对小学数学教学提出了更高的要求，多媒体辅助教学模式成为目前小学教学领域的新宠。本文就多媒体辅助在具体教学过程中扮演的重要角色以及其独特的教学优势展开具体阐述，以期对小学数学教学的开展起到促进作用。多媒体辅助教学手段的应用，不仅极大地提高了小学数学的教学质量，同时还最大限度地激发了学生对数学课程的兴趣。那么，多媒体教学方式与传统的教学模式相比，究竟有哪些优势呢？1 化枯燥为生动，激发学生学习兴趣兴趣是学生学习的强大动力，推动着学生主动求知、积极探索。学生对数学学习是否感兴趣，直接关系到学生积极情感的调动，积极学习行为的产生，直接决定着教学的成败。而在以往的数学教学中教学手段单一、教学模式落后，以教师的讲述为主，以课堂为中心，以教材为中心，整个教学过程枯燥无味，无法激起小学生强烈的学习热情与浓厚的学习兴趣，这是传统教学的一大瓶颈。而采用多媒体辅助教学手段，将黑板变成多彩的屏幕，将粉笔变成鼠标，将文字教材变成图文声像的情境，使原本枯燥无味的教学富有生机与活力，动感十足，更加生动活泼。而这些绚丽的色彩、逼真的画面、直观的图片等正是小学生所喜闻乐见的，符合小学生的思维特点与认知规律，能够激起小学生内心强烈的学习动机与学习意识，使学生对面前所呈现的数学知识更为关注，从而使学生带着强烈的好奇心与求知欲主动而积极地投入到教学活动中来。在教学中教师要结合小学生的生理特点、心理特点，结合具体的教学内容科学地选择各种数学素材，制作出精美的多媒体课件，让原本抽象枯燥的数学教学更加富有生活气息，更加富有趣味性与艺术性，真正成为学生所喜爱的一门学科。2 化抽象为形象，帮助学生理解知识采用多媒体教学手段可以将抽象枯燥的数学知识寓于各种形象直观的感性事物中，符合小学生的认知规律与思维特点。学生可以从这些形象直观的事物中获取大量的感性材料，在自身主动思考与教师相机诱导下更能够从感性认识上升为理性认识，从而能够透过大量表象达到对事物的本质认识。这样由浅入深、由易到难，更利于学生从已知过渡到未知，可以让学生充分享受到学习与探究的乐趣。例如，在学习三角形的相关知识时，首先教师可以利用多媒体来向学生形象地展示现实生活中所存在的三角形的各种实物。通过形象直观的展示可以唤起学生对相关生活的回忆，可以让学生获取大量形象直观的认识，帮助学生建立三角形的初步认知。然后再利用多媒体强大的功能来向学生动态展现从三角形实物到三角形图形的过程。这一过程是此节内容的重点也是难点，学生只有深入理解，才能真正掌握三角形的本质属性，达到对概念的本质认识。而采用传统的教学手段，很难将这一抽象的过程形象而动态地展现出来，教师只能是将概念强行地灌输给学生，学生只是机械地记忆，并没有真正地理解。而运用多媒体就可以化抽象为形象，将语言难以描述的过程形象而动态地展现出来。这样就可以帮助学生在头脑中建立三角形的概念，从而收到了较好的教学效果。3 化静态为动态，培养学生思维能力培养学生的思维能力是各科教学的重要目标，数学素有思维的体操之美称，在培养学生思维能力方面更是具有得天独厚的优势。采用多媒体教学可以实现各种数学素材的优化与整合，化静态为动态，可以将这些抽象的概念、定理与形象直观的事物结合起来，丰富学生的表象积累，拓宽学生思维的广度与深度，这对于学生数学思维能力的培养大有裨益。例如，在教学长方形的概念时，教师可以依托多媒体强大的优势，向学生展现各种长方形的实物，让学生展开认真的观察与思考，让学生思考并总结长方形边与角的特点，并让学生亲自动手来剪切长方形。这样的设计融学生的动手与动脑于一体，通过学生的主动思考、动手、充分交流与激烈讨论总结出长方形的特征与概念。这样的学习过程是学生主动探究，积极思维的过程，学生经历了知识的形成过程。远比直接画出一个长方形，告诉学生这就是长方形，让学生死记硬背效果要好得多。这样的学习并不是只局限于学生对知识的掌握，更为重要的是让学生学会观察、学会思考，真正掌握学习数学的方法，提高学生的数学思维能力。总之，多媒体课程教学是课改推动的必然结果，是教育领域对教学现状进行有效改革的重要途径。在具体的小学数学课程的教学过程中，建议教师充分利用多媒体课件的辅助作用，为小学阶段数学教学质量的提高做出努力和贡献。基于PCR的染色体步查技术（精选）16、云无心以出岫，鸟倦飞1基于PCR的染色体步查技术基于PCR的染色体步查技术2染色体步查(Chromosomewalking)是指由生物基因组或基因组文库中的已知序列出发,逐步探知其旁邻的未知序列或与已知序列呈线性关系的目的序列的核苷酸组成的方法和过程。经典的染色体步査方法比较烦琐,适合于长距离步行,而基于PCR的染色体步行技术相对而言则比较简便,适合于短距离步行。染色体步查(Chromosomewalking)3基于PCR的染色体步查技术典型的PCR反应需要2个分别位于日的序列两端的引物,而在染色体步行时目的序列只有一端是口知放,因此利用PCR技术进行染色体步行的关键在于提供P需要的另一个引物口利用载体或接头的PCR技术口利用引物错配的染色体步查技术口和用随机引物的染色体步查技术(TAIL-PCR基于PCR的染色体步查技术4口利用载体或接头的PCR技术这类方法的第一步通常都是酶切基因组DNA,连接载体或接头,以提供PCR需要的另一端引物.利用载体的PCR利用接头的PCR◆寡聚盒介导的PCR令环状PCRI-PCR(InversePCr)P-PCR(PanhandlePCR)口利用载体或接头的PCR技术5今利用载体的PCR1989年,Shyamala等利用单特异引物PCR(singlespecificprimerPCr,SSP-PCR)以小鼠伤寒杆菌组氨酸转运操纵子为起点进行连续步查。用PstI+AraM酶切基因组DNA,PstI+Xma酶切载体DNA,然后连接基因组片段和载体片段,用根据基因组DNA序列设计的异引物和载体的通引物进行扩增由于非特异片段没有特异引物的结合位点,即使有载体连接到非特异片段,它也不能得到大量扩增,而使特异片段得到有效扩增在这种方法中,如果用合适的接头代替载体效果也会一样这种方法原理简单,实验设计简便,但操作较为繁琐,特异性较低,即使用嵌套引物扩增也往往会造成非特异性扩增,产物仍需杂交进一步确定。之后出现了一些方法利用不同的技术增强PCR的特异性。今利用载体的PCR6今利用接头的PCR1995年,Siebert结合VectorettePCR和SuppressionPCR设计改进了利用接头的PCR今利用接头的PCR7(1)选择合适的酶切位点酶切总基因组;(2)用连接反应将人工合成的接飞八八头连接在酶切片断两端;(3)S-PCR(suppressionPCR)八八所连接的双链接头是反向重复序列。A,如果PCR产物的两末端是双链接头序列由于反向未端重复序列的存在,每条D链的未端就要形成mae结构,故而阻止PCR的指数增加B,如果PR产物一端是特异引物序列,另端是接头序列时形成panhandle结构(1)选择合适的酶切位点酶切总8(4)vectoretteLNH2接头由一条长链和一条短链组成;短链3′端用NH2封闭,使接头中的短链不会在PCR开始时自身延长;在第一个延伸反应中接头引物无模板配对只有特异引物起作用延伸出一亲单链;在第二个延伸反应中接头引物才能以第应中延伸岀的单链为模板开始扩增(4)vectorette9bp123207015001200GelelectrophoresisanalysisoftherepresentativePCRproductsderivedfromL,borgpeterseniigenomicDNA.ThePCRwalkingtemplateswerepreparedfromEcoRV-digestedDNAorfromPvulldigestedLaneIDNAmarkerlane2,primaryPCRproductsfromprimersAPIandPIlane3,secondaryPCRproductsfromprimersAP2andP13ThearrowindicatesthePCRfragmentthatwasclonedforsequencing.bp12310DigestedchromosomalDNAcombinedwithdephosphorylatedoligo-cassettesMKP23MKP2J2000年,MogensKilstrup进步改进此方法MKP24要求接头的两亲寡核苷酸链1KP23esoespecincprimer含磷酽基在里变性反应时,和接头引对的接头寡核苷酸链会游离Meltin