低密度脂蛋白胆固醇测定标准操作规程

低密度脂蛋白胆固醇测定标准操作规程1.检验原理：采用能特异性水解样品中高密度脂蛋白（HDL）、极低密度脂蛋白（VLDL）及乳糜微粒（CM）的表面活性剂，释放其胆固醇与酶试剂反应，产生的在无偶联剂时被消耗而不显色。当加入试剂R2时，低密度脂蛋白（LDL）被水解，与酶试剂反应而测定低密度脂蛋白胆固醇的含量。第一步：LDL-CLDL-C不溶性复合物胆固醇酯+游离胆固醇+脂肪酸HDL-C,VLDL-C,CM和游离胆固醇+胆甾-4-烯-3-酮++第二步LDL-C不溶性复合物LDL-C可溶性复合物LDL-C可溶性复合物+胆甾-4-烯-3-酮++4-氨基安替比林+TOOS红色醌+TOOS:N-乙基-间甲基苯胺-2-羟丙基磺酸钠2.试剂主要组成成分产品组成成分浓度R11，4-哌嗪二乙磺酸倍半钠（PIPES缓冲液）50mmol/L4-氨基安替比林（4-AA）5mmol/L胆固醇氧化酶800U/L胆固醇酯酶400U/L过氧化物酶3kU/LTritonX-405（表面活性剂）0.1%(V/V)R21，4-哌嗪二乙磺酸倍半钠（PIPES缓冲液）50mmol/LN-乙基-间甲基苯胺-2-羟丙基磺酸钠（TOOS）2mmol/L抗坏血酸氧化酶100U/LTritonX-1003%(V/V)CAL低密度脂蛋白胆固醇(2.0-4.0)mmol/L3.样本要求；静脉采血后立即分离。新鲜无溶血血清。在22～25℃可保存8小时，2～8℃保48小时，-20℃可保存7天。样本应避免反复冻融。4.检验方法；仪器法（详见DF-603/DI-600标准操作规程）5参考范围：样本参考范围mmol/L血清1.50-3.106.检验结果的解释：6.1样本含量超出线性范围时，建议用0.9%（W/V）的氯化钠溶液稀释样本。建议最大稀释倍数不超过10倍。6.2.单位换算：ukat/L=U/L×16.67×7.检验方法的局限性7.1结果的准确性依赖于仪器的校正和测定温度、时间的控制。7.2若试剂浑浊，或以水空白在600nm处吸光度大于0.05时不能使用。7.3检验结果仅供参考，不作为临床诊断唯一依据。8.产品性能指标8.1空白吸光度：在600nm波长，光径1cm时，空白吸光度A≤0.05。8.2分析灵敏度：在600nm处，光径1cm时，测定1mmol/L的样本，吸光度差值△A＞0.038.3线性区间：试剂的线性区间为[0.30-10]mmol/L,a）线性相关系数r应不小于0.995；b线性相对偏差不超过±10%。8.4精密度8.4.1重复性：重复测试（2.50±0.50）mmol/L和（5.00±1.00）mmol/L的样本，所得结果的变异系数（CV）应不大于3.0%8.4.2批间差：测试（2.50±0.50）mmol/L的样本，所得结果的批间相对极差（R）应不大于10%.8.5准确度：相对偏差应不大于±10%。8.6校准品8.6.1外观：冻干粉，复溶后为淡黄色液体。8.6.2准确度：校准生化分析仪和试剂后，测定校准品，相对偏差应不大于10%。8.6.3均一性：瓶间均一性：CV≤5%8.7干扰试验干扰物浓度（g/L）是否有干扰抗坏血酸0.3无明显干扰脂血3.0无明显干扰血红蛋白3.5无明显干扰无明显干扰：添加干扰物后