免疫组化应用课件

免疫组化应用免疫组化应用免疫组化应用免疫组化的原理根据抗原和抗体特异性反应的免疫学原理，应用标记抗体检测组织中未知抗原的方法。抗原+抗体（标记）→抗原抗体复合物通过抗原和抗体的特异性结合检测组织中的化学成分（蛋白—抗原）显示系统：抗原抗体复合物+检测系统将二抗和酶通过一个多聚葡聚糖骨架联接成一个多聚体（即）免疫组化应用免疫组化应用免疫组化应用免疫组化的原理根据抗原和1免疫组化的原理根据抗原和抗体特异性反应的免疫学原理，应用标记抗体检测组织中未知抗原的方法。抗原+抗体（标记）→抗原抗体复合物通过抗原和抗体的特异性结合检测组织中的化学成分（蛋白—抗原）显示系统：抗原抗体复合物+检测系统将二抗和酶通过一个多聚葡聚糖骨架联接成一个多聚体（即）免疫组化的原理根据抗原和抗体特异性反应的免疫学原理，应用标记2PrimaryAntibodyPolymercomplexSubstrate-chromogensolutionPrimaryAntibodyPolymercomple3染色方法(1)、将切片捞至胶片上，放入60℃温箱中烘烤1小时。(2)、经二甲苯脱蜡，梯度酒精脱水后流水冲洗。(3)、过3％H2O2中20后流水冲洗。(4)、修复高火3后，低火15后，自然冷却至室温。(5)、取出玻片放至湿盒，冲洗，33。擦干玻片，每张玻片加1滴或50μl的第一抗体40。(6)、冲洗，33。擦干玻片，每张玻片加1滴或50μl的聚合物增强剂(试剂A），室温孵育20。(7)、冲洗，33。擦干玻片，每张玻片加1滴或50μl的酶标鼠/兔聚合物(试剂B），室温下孵育30。(8)、冲洗，33。擦干玻片，每张玻片加2滴或100μl的液，显微镜下观察，10显色。(9)、流水冲洗，苏木素复染1-2，0.1％盐酸分化，自来水冲洗后返蓝。(10)、梯度酒精脱水干燥，二甲苯透明，中性树胶封片。染色方法(1)、将切片捞至胶片上，放入60℃温箱中烘烤1小时4免疫组化的使用范围组织学标本中的应用细胞块中的应用免疫组化的使用范围组织学标本中的应用5各系统肿瘤的抗体表达对肿瘤进行来源分类上皮性肿瘤的标记物间叶肿瘤的标记物淋巴造血系统肿瘤的标记物神经内分泌肿瘤的标记物、、56各系统肿瘤的抗体表达各系统肿瘤的抗体表达对肿瘤进行来源分类6上皮性肿瘤中的腺癌上皮性肿瘤中的腺癌7CK7+CK20-Villin+Villin-可见于：胃腺癌(41.67%)、乳头状肾细胞癌(17.39%)、乳腺浸润性导管癌(5.36%)、卵巢浆液性腺癌(3.7%)少见于：肺鳞癌、肺腺癌、肺小细胞癌、肾透明细胞癌、嫌色细胞癌、前列腺癌、直肠腺癌、乳腺浸润性小叶癌、卵巢粘液性癌。可见于：乳腺浸润型小叶癌(100%）、肺腺癌(95.83%）、乳腺浸润型导管癌(78.57%)、卵巢浆液性腺癌(70.37%）、嫌色细胞癌(66.67%）、卵巢粘液性腺癌(37.5%）、肺鳞癌(11.43%）、前列腺癌(9.09%）、直肠腺癌(2.78%）、胃腺癌(2.78%）、肾透明细胞癌(2.33%）。少见于：肺小细胞癌、乳头状肾细胞癌。CK7+CK20-Villin+Villin-可见于：胃腺癌8CK7+CK20+Villin+Villin-可见于：胃腺癌(13.89%）、卵巢粘液性腺癌(12.5%）、直肠腺癌(5.56%），乳头状肾细胞癌(4.35%）少见于：肺鳞癌、肺腺癌、肺小细胞癌、肾透明细胞癌、肾嫌色细胞癌、乳腺癌、卵巢浆液性癌。可见于：卵巢粘液性腺癌(12.5%）乳腺浸润性导管癌(3.57%）、胃腺癌(2.78%）、直肠腺癌(2.78%）。少见于：肺鳞癌、肺腺癌、肺小细胞癌、肾透明细胞癌、乳头状肾细胞癌、嫌色细胞癌、前列腺癌、乳腺浸润性小叶癌、卵巢浆液性癌。CK7+CK20+Villin+Villin-可见于：胃腺癌9CK7-CK20-Villin+Villin-可见于：乳头状肾细胞癌(43.47%）、胃腺癌(18.06%）、直肠腺癌(16.67%）、卵巢粘液腺癌(12.5%）、嫌色细胞癌(11.11%）、前列腺癌(4.54%）。少见于：肺鳞癌、肺腺癌、肺小细胞癌、肾透明细胞癌、乳腺浸润型导管癌、乳腺浸润性小叶癌、卵巢浆液性癌。可见于：肺小细胞癌(100%）、肾透明细胞癌(42/43，97.67%）肺鳞癌(88.57%）、前列腺癌(86.36%）、乳头状肾细胞癌(34.78%）、嫌色细胞癌(22.22%）、卵巢浆液腺癌(18.52%）、乳腺浸润型导管癌(16.07%）、胃腺癌(13.89%）、直肠腺癌(5.56%）、肺腺癌(4.17%）。少见于：乳腺浸润性小叶腺癌、卵巢粘液腺癌。CK7-CK20-Villin+Villin-可见于：乳头状10CK7-CK20+Villin+Villin-可见于：直肠腺癌(52.78%)、卵巢粘液性腺癌(25%)、胃腺癌(6.94%)、卵巢浆液性癌(3.7%）。少见于：肺鳞癌、肺腺癌、肺小细胞癌、肾透明细胞癌、乳头状肾细胞癌、嫌色细胞癌、前列腺癌、乳腺浸润性导管癌、乳腺浸润性小叶癌。可见于：直肠腺癌(13.89%）、卵巢浆液性腺癌(3.7%）。少见于：肺鳞癌、肺腺癌、肺小细胞癌、肾透明细胞癌、乳头状肾细胞癌、嫌色细胞癌、前列腺癌、乳腺浸润性导管癌、乳腺浸润性小叶癌、卵巢粘液性癌、胃腺癌CK7-CK20+Villin+Villin-可见于：直肠腺111、软组织1、软组织12小圆细胞肿瘤

100小细胞未分化癌+-+-----神经内分泌癌+-+-++--神经母细胞瘤-+--++-尤文肉瘤-+--++-胚胎性横纹肌肉瘤-+----+-恶性淋巴瘤---+----恶性黑色素瘤-+----+(45+)、、、、、45胞浆胞膜/胞浆胞膜100胞核/浆小圆细胞肿瘤13间皮：、阳性横纹肌：(+)、1（弱+）血管：31、34阳性颗粒细胞瘤：100、间皮：、阳性14342100神经纤维瘤+++孤立性纤维性肿瘤++-滑膜肉瘤-+-孤立性纤维性肿瘤99+滑膜肉瘤、双阳免疫组化应用课件152、乳腺P635/634βE12导管原位癌+-+-浸润性导管癌--+-浸润性小叶癌---+P63胞核5/6胞浆胞浆、胞膜34βE12胞浆

2、乳腺P16乳腺病理、显示肿瘤的内分泌表达，与肿瘤的内分泌治疗反应率相关2肿瘤相关因子，靶向治疗67显示细胞增殖指数、胞核2胞膜67胞核乳腺病理、显示肿瘤的内分泌表达，与肿瘤的内分泌治疗反应率相关17中间型上皮成熟型5/68/18+5/68/18+干细胞5/68/18-63-中间型肌上皮成熟型5/663+5/663+5/6,8/18，胞浆P63胞核中间型上皮182的染色意义阳性强度的判断：强的着色是指4x或10x物镜下易于观察到，弱的强的着色是指需要用40x物镜观察。2的染色意义阳性强度的判断：192与治疗及预后的关系不仅与浸润型乳腺癌的不良预后有关，并能预测多种化疗药机内分泌治疗的敏感性。靶向药物赫赛汀2与治疗及预后的关系不仅与浸润型乳腺癌的不良预后有关，并能预202的染色意义0+浸润性肿瘤细胞无着色1+任何比例的浸润性肿瘤细胞呈弱而不完整的包膜着色或＜10%的肿瘤细胞呈弱且完整着色2+≥10%的肿瘤细胞呈现弱或不一致的、完整的包膜着色；或≤30%的肿瘤细胞呈现强且完整的包膜着色3+＞30%的浸润性肿瘤细胞呈强且完整包膜着色2的染色意义0+浸润性肿瘤细胞无着色21指导治疗267:60-70%的内分泌治疗反应率:10%的内分泌治疗反应率:40%的内分泌治疗反应率:46%的内分泌治疗反应率阳性分级（或阳性细胞数比例）与治疗反应的相关性尚缺乏统一认识指导治疗267223、消化720+胃肠间质瘤117，34肝1浆阳、、2主要表达于结肠，胃癌和卵巢粘液性腺癌也有表达117胞膜/胞浆，34胞膜2胞核7，20，，胞浆3、消化720+234、泌尿4、泌尿24肾10117透明细胞-++-+(膜)+-（乳头状癌）嫌色细胞癌++-+（浆）铁++（嗜酸细胞腺瘤）集合管癌+++-±、–L、胞浆10胞膜、117、胞膜/胞浆

肾25移行上皮：正常7阳性，20阳性提示肿瘤移行上皮：正常7阳性，20阳性提示肿瘤265、生殖5、生殖27卵巢上皮性肿瘤720-，125卵巢上皮（+）无性细胞瘤（女性）=精原细胞瘤（男性），，117胚胎性癌，30，卵巢上皮性肿瘤28子宫

合体滋养叶弱+细胞滋养叶--中间滋养叶弱+，胞浆子宫29

子宫内膜样癌++-宫颈癌--+胞浆胞核胞膜/胞浆

30前列腺基底细胞阳性标记：高分子量（34βE125/6）P504s肿瘤性腺泡（+），良性腺泡（-）前列腺上皮（+）34βE12，5/6，，P504s胞浆前列腺基底细胞阳性标记：高分子量（34βE125/6）316、神经内分泌6、神经内分泌32甲状腺156乳头状癌++--滤泡癌++-+髓样癌-