鱼类人工繁殖技术-受精卵孵化

项目六

鱼类人工繁殖技术任务六受精卵孵化方法任务六孵化孵化是指受精卵经胚胎发育到仔鱼出膜的全过程。一、受精卵的孵化卵子质量鉴定

特征好卵差卵形状质量好不成熟或过熟吸水情况吸水膨胀快吸水膨胀慢，胀不足弹性及大小卵球饱满，富有弹性，大小整齐卵球稍瘪皱，弹性差，胀不足颜色鲜明，轮廓清晰黯淡，轮廓模糊鱼卵在盘中静止时胚体位置胚体（动物极）侧卧胚体向上，植物极向下胚胎发育情况卵裂整齐，发育正常卵裂不规则，分裂球大小不整齐，发育不正常（一）漂流性卵的孵化（以四大家鱼为例）家鱼属敞水性产卵类型，其卵子的孵化需要充足的溶氧和一定的流水。漂浮性卵一般在孵化环道中流水孵化，孵化密度为100万粒卵/m3。受精卵刚放入时，水流不宜太大，一般水流速度为0.15～0.30m/s，以卵刚好呈漂浮状为宜。在胚胎发育过程中，可适当增大水流以保持氧气的足够供应。仔鱼破膜时，氧气消耗量大，且刚出膜的仔鱼，器官发育不全、鳔未形成，无胸鳍，不会游泳，非常娇嫩，易下沉窒息，此时应加大水流，使其能在水中漂游。当仔鱼能平游时，体内卵黄囊逐渐消失，并能顶流，此时宜适当减缓水流，以免消耗仔鱼体内营养。（二）粘性卵的孵化（以鲤为例）1、池塘孵化生产上多直接使用鱼苗培育池进行孵化，以减少鱼苗转塘的麻烦和损失。将粘有鱼卵的鱼巢放入池中水下10cm即可孵化，每666.7m2水面可放30～50万粒卵（以下塘鱼苗20万为准）。鱼苗刚孵出时，不可立即将鱼巢取出，此时鱼苗大部分时间附着在鱼巢上，靠卵黄囊提供营养，到鱼苗能主动游泳觅食时，才能捞出鱼巢。2、淋水孵化将粘附鱼卵的鱼巢悬吊在室内或平铺在架子上，用淋水的方法使鱼巢保持湿润。孵化期间，室温保持在20～25℃。此法能人为控制孵化时室内温度、湿度，观察胚胎发育情况，具有孵化速度一致，减少水霉病感染，孵化不受天气变化影响等优点。当胚胎发育到发眼期时应立即将鱼巢移到孵化池内孵化，注意室内与水池温度相差不超过5℃。3、脱粘流水孵化鲤的粘性卵在人工授精后2～3min，通过去粘性处理，便可用四大家鱼的孵化设备进行流水孵化。（1）泥浆脱粘法先用黄泥土与水混合成稀泥浆水，一般5kg水加0.5～1kg黄泥，经40目网布过滤。脱粘方法是先将泥浆水不停翻动，同时将受精卵缓慢倒入泥浆水中，待全部受精卵撒入泥浆水中后，继续翻动泥浆水2～3min。最后将脱粘受精卵移入网箱中洗去多余的泥浆，即可放入孵化器中流水孵化。（2）滑石粉脱粘法将100g滑石粉即硅酸镁加20～25g食盐溶于10L水中，搅拌成悬浊液，即可用来脱除有粘性的鲤鱼卵1～1.5kg。操作时一边向悬浊液中慢慢倒入鱼卵，一边用羽毛轻轻搅动，经30min后，受精卵呈分散颗粒状，达到脱粘效果。经漂洗后放入孵化器中进行流水孵化。

（3）尿素脱粘法受精后3～5min，将受精卵先加入1.5倍的1号脱粘液（3g/L的尿素和4g/L的氯化钠混合水溶液），用羽毛搅拌1.5～2h，倒去1号脱粘液再加入相当于受精卵10倍的2号脱粘液（8.5g/L的尿素水溶液），每隔15min搅拌一次，经2～3h即可用清水清洗鱼卵，便完全脱粘，然后放入孵化器中孵化。该法脱粘效果较好，卵膜透明，易观察胚胎发育情况，但脱粘时间过长，生产效率较低。（4）清水机械脱粘法将500g的受精卵放入100～150mL水中，用人工或机械方法带动羽毛，轻轻搅动1min，再加入0.5L水，并迅速搅拌2～3min，然后加入1.0～1.5L水，继续搅动25～30min，即可将粘性脱去。此法可以避免脱粘剂颗粒对卵膜的损伤，从而减少水霉病发生。（三）浮性卵的孵化（以石斑鱼为例）石斑鱼产浮性卵，可以在孵化环道、水泥池、土池中人工孵化，生产上大多采用孵化桶在室内孵化，孵化密度不宜超过80万粒/m3水体，在桶中央放置一气石，气流速度以能使鱼卵或仔鱼较均匀悬浮在水中为度。受精卵发育到原肠期后，发育正常的胚胎无色透明，死卵呈白色，有死卵时应停止充气10～15min，正常卵上浮，未受精的卵和发育不正常的死卵及少量杂物沉于孵化桶底部，开启孵化桶底部排水阀，缓慢排水，将死卵及杂物排除，之后立即恢复充气，并加水至正常水位。孵化用水必须清新，需经过砂滤，并用紫外光杀菌。孵化过程中的污物漂浮在水面上，可以用软吸管清除。海水鱼卵在孵化时需要注意调节盐度，在不同盐度条件下，卵的沉浮状态不同。如水温25～26℃条件下，盐度低于25.6时，鞍带石斑鱼的卵沉底；盐度高于27.1时，卵则上浮。（四）沉性卵的孵化（以虹鳟为例）虹鳟的受精卵吸水膨胀后，放入孵化器进行孵化。通常在孵化室内进行，避免阳光直射。目前广泛采用孵化桶或平列槽（一种用玻璃钢制成的仔鱼饲育槽，上口长3m，宽0.42m；底长2.98m，宽0.42m，后部有一直径为5cm可上下活动调节槽内水位的排水管，槽内套6个小槽，共可容纳仔鱼5～6万尾），根据孵化桶的大小，孵化密度介于2万粒到10万粒鱼卵之间。孵化用水自下部流经全部鱼卵后从上部溢出，每桶注水量4～7L/min。孵化过程中，当明显出现眼点时应转入平列槽，并人工拣除死卵。也可单独在孵化桶（图4-16）或平列槽（图4-17）中孵化。水温在8～10℃时，30～35d鱼苗孵出。整个孵化期间均使鱼卵处于安静状态，并严格避免光照。项目六

鱼类人工繁殖技术任务六受精卵孵化方法二、孵化管理措施(1)前期准备工作催产前必须对孵化设施进行一次彻底的检查、试用，若有不符合要求的就及时修复，特别是进出水系统，水流情况，进水水源情况，排水滤水窗纱有无损坏，进水过滤网布是否安好，所用工具是否备齐等。然后将有关工具及设施清洗干净或消毒后备用。(2)孵化容器的流速调节使流速大致控制在不使卵粒、仔鱼下沉堆集为度，鱼苗平游后应适量减低流速。(3)洗刷滤水纱窗随时清洗排出水过滤窗纱，以保证排水畅通。(4)注意防止早脱膜现象

早脱膜会导致胚胎大量死亡。导致早脱膜的原因常见有：①不同批产的鱼卵在同一环道内套孵，早批卵正常出膜时生成的孵化酶引起后一批鱼卵的溶膜；②循环使用孵化用水致使孵化酶在水体中浓度增大而导致早脱膜；③孵化水溶氧太低或pH较低(pH值低于6.5)从而使孵化酶活性提高产生早脱膜；④孵化密度太大，使孵化酶浓度提高引起早脱膜；⑤卵粒质量太差有时也会出现早脱膜。生产中应根据具体情况预防或解决。当出现少量脱膜现象时，可从孵化工具底部缓缓加入高锰酸钾溶液，使卵膜变为黄色可抑制早脱膜。(5)防除敌害若孵化水体中剑水蚤量较大时，可用0.1ppm的晶体敌百虫水溶液泼洒。或生物防除。(6)注意防止水霉病导致水霉病发生的原因一般有下面几种：①水温较低；②鱼卵、鱼苗质量较差，受精率较低，从而使水体中死卵、死苗较多，大量感染水霉；③水质较差。若孵化中出现水霉严重现象，可用孔雀石绿溶液泼洒，使水体呈深绿色，维持该浓度15分钟左右，连用两次。(7)预防气泡病气泡病是在鱼卵或仔鱼身上形成若干个气泡，使其漂浮于水面不能下沉。发病的主要原因是水中浮游植物较多，导致水中溶氧过饱和，因此可从改善水质方面予以解决，如立即改用较清洁的瘦水或冲注部分井水等。(8)计算受精率和孵化率通常在胚胎发育至原肠中期(即胚盘下包2/3时)计算鱼卵的受精率。在水温20—25℃时，约需8小时。受精率=受精卵数/检查卵的总数×100%孵化率是指受精卵中能孵出鱼苗的百分率，一般在出膜完成后进行计算。孵化率=受精卵出苗总数/受精卵总数×100%

项目六

鱼类人工繁殖技术任务六受精卵孵化方法三、影响孵化的环境因子

受精卵孵化过程中，水温、溶解氧、盐度、光照、混浊度、敌害生物等因子均影响胚胎发育，如果环境因子不适宜，就会大大降低孵化率。1、水温水温是胚胎发育的重要因素之一，受精卵孵化所需温度范围随亲鱼种类而变化，如冷水性鱼类虹鳟胚胎发育适温范围为7～13℃，最适水温为9℃；温水性鱼类，如四大家鱼受精卵孵化适温范围为22～28℃，最适宜水温为26±1℃；热带鱼类，如斜带石斑鱼胚胎发育的适宜水温为25～28℃。2、溶氧鱼类胚胎个体发育耗氧率存在较大差异，同种不同个体之间、不同种之间胚胎发育所需要氧气均不同，发育时期不同差异也较大。随着胚胎的发育，耗氧量逐渐增加，鲢在胚胎期的尾芽出现后，耗氧量骤然增加，为早期的2倍多。鲢胚胎不同发育阶段的耗氧量发育时期2～8细胞期

囊胚期原肠期尾芽出现心脏搏动出膜开始血液循环开始mg/（h·1000粒）0.2720.3180.3180.6570.8460.5830.983mg/（g·h）0.190.2230.2230.460.590.5970.593、水流受精卵在流动的水体中孵化时，可以得到充足的氧气。流水可以溶解并及时带走胚胎代谢产物，减少水质污染。流水还能刺激孵化酶的分泌，使仔鱼提前出膜，鳜受精卵在流水孵化环道中孵化要比在静水中孵化快得多。通过调节水的流量，使受精卵在水中适度地悬浮，可以有效抑制真菌的感染，同时也可将死卵和活卵分开。

在胚胎发育早期，胚胎对外界刺激比较敏感，此时流量不应过大，微悬浮即可。达到眼点期后，流量可增大，使受精卵悬浮运动增强。在鱼苗孵化出膜时，对流量变化更为敏感，应适当调小水流量。在确定水流量时，还应考虑鱼的种类差异，有些鱼类可能对悬浮较为敏感。4、光线鱼类胚胎发育对光的反应具有遗传因素。因此，光线对不同生态类群的鱼类胚胎发育有着不同的影响。鲟卵在有光线条件比在黑暗条件下胚胎发育速度平均要快18～26h。而且，在有光线情况下发育孵出的仔鱼个体较长和较重。黄鳝受精卵的发育需要有光的条件，500～1500lx范围时孵化率较高，在这范围内随着照度的升高出膜时间逐渐缩短，但不能超过1500lx，否则孵化率下降。直射的光线对于产卵于石砾中的鲑鳟鱼类的胚胎发育不利，引起胚胎畸形率增加。

一般来说，浮性卵发育所需的光照强度比沉性卵、尤其是比埋在砂下的卵要强一些。5、盐度盐度对胚胎的影响因鱼种类而异，且与鱼的生态习性密切相关。当盐度过高或过低时，卵膜难以调节细胞与周围介质之间的物质平衡，会造成卵细胞损伤。不同盐度会造成受精卵沉浮性变化，盐度低时会导致完全沉性，较高时会导致完全浮性，完全沉性和完全浮性均不利于孵化。军曹鱼在盐度29～38范围内，胚胎的孵化率无显著差异，当盐度超出或低于此范围时，孵化率降幅达到18～49%，且仔鱼畸形率明显提高。鱼类受精卵沉性盐度受精卵浮性盐度胚胎发育适盐范围胚胎发育最适盐度范围真鲷＜27.8＞31.211.08～48.8528.15～32.70黑鲷＜26.25＞32.1518.12～32.1520.22～34.11平鲷－－12～5228～32高体鰤＜30＞3230～4032～35鮻＜20.0＞25.210～35.615～35.6双棘黄姑鱼＜25＞3230～40