消毒与灭菌技术-物理消毒灭菌法

高压灭菌锅类型

高压灭菌锅又名高压蒸汽灭菌锅，可分为手提式灭菌锅和立式高压灭菌锅。利用电热丝加热水产生蒸汽，并能维持一定压力的装置。主要有一个可以密封的桶体，压力表，排气阀，安全阀，电热丝等组成。

立式高压灭菌锅手提式灭菌锅高压蒸汽灭菌锅结构高压锅操作步骤：1

在外层锅内加适量的水，将需要灭菌的物品放入内层锅，盖好锅盖并对称地扭紧螺旋。2

加热使锅内产生蒸气，当压力表指针达到

33.78kPa时，打开排气阀，将冷空气排出，此时压力表指针下降，当指针下降至零时，即将排气阀关好。3

继续加热，锅内蒸气增加，压力表指针又上升，当锅内压力增加到所需压力时，将火力减小，按所灭菌物品的特点，使蒸气压力维持所需压力一定时间，然后将灭菌器断电或断火，让其自然冷后再慢慢打开排气阀以排除余气，然后才能开盖取物灭菌锅使用注意事项：a

待灭菌的物品放置不宜过紧。b

必须将冷空气充分排除，否则锅内温度达不到规定温度，影响灭菌效果。c

灭菌完毕后，不可放气减压，否则瓶内液体会剧烈沸腾，冲掉瓶塞而外溢甚至导致容器爆裂。须待灭菌器内压力降至与大气压相等后才可开盖。d

已有微电脑自动控制的高压蒸气灭菌锅，只需放去冷气后，仪器即可自动恒压定时，时间一到则自动切断电源并鸣笛，使用起来很方便。

谢谢观看干热灭菌箱结构主要由箱体、风机、高效过滤器、加热系统、电气控制柜组成。1.控制器上电，显示窗上排显示“InP”，下排显示“量程值”约3秒后进入到正常显示状态。2.温度及恒温时间的查看与设定。点击“设定”键，进入到温度设定状态，显示窗下排显示提示符“SP”，上排显示温度设定值(先个位值闪烁)，可通过移位、增加、减小键修改到所需的设定值;再点击“设定”键，进入到恒温时间设定状态，显示窗下排显示提示符“St”，上排显示恒温时间设定值(先个位值闪烁)，可通过移位、增加、减小键修改到所需的设定值;再点击“设定”键，退出此设定状态，修改的设定值自动保存。操作步骤注意事项(1)待灭菌的物品于烤前应洗净，以防附着在表面的污物碳化;(2)玻璃器皿干烤前应洗净并完全干燥，灭菌时勿与烤箱底、壁直接接触，灭菌后温度降到40℃以下再开箱，以防止炸裂;(3)物品包装不能过大，安放的物品不能超过烤箱的高度的2/3，物品间应留有空隙，粉剂和油脂的厚度不得超过1.3cm。(4)温度高于170℃时，有机物会碳化。故有机物品灭菌时，温度不可过高。谢谢热力灭菌法温度是影响微生物生长繁殖和代谢活动的最重要因素之一。高温对微生物有明显的致死作用。高温灭菌的机理有：高温能使菌体蛋白质变性或凝固，导致酶蛋白及生物活性物质失活、核酸结构被破坏，而使菌体死亡。热力灭菌包括干热灭菌法和湿热灭菌法。在同一温度下，湿热灭菌效力比干热灭菌大。因为湿热比干热穿透力强，能较快的提高灭菌物品内部的温度；湿热中细菌容易吸收水分，使菌体蛋白质易于凝固变性；湿热的蒸汽有潜热效应存在，水由气态变为液态时释放出潜能，可迅速提高被灭菌物体的温度。干热灭菌法干热的杀菌作用是通过脱水干燥使大分子变性。一般细菌繁殖体在干燥状态下，80-100℃经1h可被杀死；芽胞则需要160-170℃经2h才能死亡。1．焚烧：直接燃烧或置于焚烧炉内燃烧的一种灭菌方法，是最彻底的灭菌方法之一。仅适用于废弃物或动物尸体等。2．烧灼：将需要灭菌的物品直接用火焰灼烧的一种灭菌方法。适用于微生物实验室的接种环、试管口、瓶口等的灭菌。有些外科金属器械也可用此法灭菌，但要注意器械需擦拭干净。3．干烤：利用干燥空气进行灭菌的一种方法。常使用电烤箱进行，加热160-170℃经2h。适用于高温下不变质、不损坏、不蒸发的物品，如玻璃器皿、瓷器、金属制品等的灭菌。湿热灭菌法这是最常用的灭菌方法。1．煮沸消毒法：在101.325kPa(1个大气压)下，水的煮沸温度为100℃，一般细菌的繁殖体5min可被杀死，细菌芽胞需要煮沸1-2h才被杀死。此法常用于消毒食具、刀剪等。水中加入2%碳酸氢钠，既可以提高沸点105℃，促进杀灭细菌的芽胞，又可以防止金属器皿生锈。海拔高度影响水的沸点，高海拔用此法消毒时，可按海拔每升高300m增加2min的标准来延长消毒时间。2.流通蒸汽消毒法：又称常压蒸汽消毒法，是利用1个大气压下100℃的水蒸气进行消毒。细菌繁殖体15-30min可被杀灭，但不能全部杀灭细菌芽胞。此法常用的器具为Arnold消毒器，我国的蒸笼具有同样的道理。3.间歇灭菌法：利用反复多次的间歇加热以达到灭菌的目的。将需灭菌物品置于流通蒸汽灭菌器内，100℃加热15-30min，杀死其中的繁殖体。取出后放37℃孵箱过夜，使残存的芽胞发育成繁殖体，次日再蒸1次，如此连续3次以上，可达到灭菌的效果。此法适用于一些不耐高热的含糖、牛乳等培养基。如有些物质不耐100℃，则可将温度减低至75-80℃，每次加热时间延长至30-60min，次数增加至3次以上，也可达到灭菌目的。4.高压蒸汽灭菌法：利用密闭的高压蒸汽灭菌器灭菌的方法。灭菌的温度取决于水蒸气的压力。在密闭的高压蒸汽灭菌器内，在一个大气压（101.326kPa）下,水蒸气的温度是100℃。随着压力升高，蒸汽的温度也相应地升高。当锅内压力达到103.4kPa时，温度可达到121.3℃，维持15-20min，可杀灭包括细菌芽胞在内的所有微生物。适用于耐高温耐湿物品的灭菌，如一般培养基、生理盐水、玻璃器皿、金属器械、手术敷料等。使用高压蒸汽灭菌法时应注意：高压蒸汽灭菌器内的温度和压力有关，也和蒸汽的饱和度有关。如灭菌器内有冷空气，则压力表表示的压力与相应的温度不相符合，会影响灭菌效果。因此，在使用时要排尽灭菌器内的冷空气，以免影响灭菌效果。5.巴氏消毒法：是由巴斯德最早创建，常用于牛乳、酒类、果汁等的消毒。具体方法有：加热61.1-62.8℃30min或71.7℃15-30s，现在多采用后一种方法。处理后均需将温度迅速降到10℃以下，这样可杀死全部病原菌又不破坏食品的营养成分和风味。辐射灭菌法辐射是能量的一种传播方式，不同的辐射射线的波长、强度、性质差异较大，对微生物的影响也各有不同。辐射射线对微生物，特别是病原微生物通常是不利的。辐射根据其物理学特性，可分为非电离辐射和电离辐射。前者包括可见光、日光、紫外线、微波、激光等，后者包括α射线、β射线、γ射线、X射线等。1.紫外线（ultravioletray,UV）:波长在240-300nm的紫外线具有杀菌作用，其中以265-266nm最强，这与DNA的吸收光谱范围一致。紫外线主要作用于菌体细胞内的DNA，使一条DNA链上两个相邻的胸腺嘧啶共价结合或两条DNA链上的胸腺嘧啶聚合，形成二聚体，使菌体的DNA复制发生障碍，抑制细菌的生长繁殖，引起细菌的基因突变或死亡。经紫外线照射发生损伤的微生物细胞再暴露于可见光中，在可见光的作用下，部分受损的细胞可恢复正常，这种现象称为光复活现象。紫外线可作用于细菌DNA，亦可作用于病毒的DNA和RNA。紫外线的穿透力很弱，普通玻璃、纸张、尘埃、水蒸气等均能阻挡紫外线，故仅适应于实验室、手术室、无菌室、传染病房、动物房等室内空气和不耐热物体的表面消毒。用于室内空气消毒时，一般按10-15m2安装30W紫外灯管一支，照射30min可杀死空气中的微生物。对物体表面消毒时，灯管离物体表面的距离不宜超过1m，紫外灯管的有效消毒区为光源周围1.5-2m范围内，所需时间为30min。直接的紫外线照射，可导致人和动物的眼睛、皮肤的灼伤，长期的高强度紫外线照射可诱发皮肤癌变，故使用紫外线时应注意防护。辐射灭菌法2.日光：是太阳辐射的各种射线（红外线、紫外线、可见光）的总和。直射阳光有很强的杀菌作用，日光照射是常用的简易自然消毒法。许多细菌的繁殖体，在日光下直射半小时至数小时发生死亡。细菌芽胞对日光的抵抗力比繁殖体强。许多芽胞在日光下照射20h才发生死亡。日光的杀菌效果因地、因时、因环境不同而异。根据日光光线的波长，日光可分为可见光、红外线、紫外线。日光的红外线可使物质干燥，微生物因缺水使其生长繁殖受到抑制；日光中的紫外线是日光杀菌的主要因素。3.微波：是波长为1-1000mm的电磁波，可穿透玻璃、陶瓷和薄塑料等物质，但不能穿透金属表面。微波主要靠其热效应灭菌，因其热效应不均匀，灭菌效果也不可靠。主要用于食品、非金属器械、检验用品、药杯及其他用品的消毒。4.电离辐射：电离射线具有较高的能量和穿透力，对微生物有致死作用，包括高速电子、X射线和γ射线等，在足够剂量时，对各种微生物均有致死作用。其机制是：通过干扰DNA合成，破坏细胞膜，引起酶系统紊乱；水分子经辐射产生游离基和新分子，如过氧化氢作用于微生物，促进死亡。电离辐射常用于大量一次性医用塑料制品的消毒，亦可用于食品、药品和生物制品的消毒，而不破坏其营养成分。由于电离辐射对真菌的杀灭很有效，所以在中草药、中成药的防霉变处理方面具有一定的使用价值。滤过除菌法滤过除菌法是用物理阻留的方法除去液体或空气中的微生物，达到无菌目的。所用的器具是滤菌器。滤菌器含有微细小孔，只允许液体或气体通过，而大于孔径的微生物等颗粒不能通过。滤过除菌法主要用于一些不耐高温灭菌的血清、毒素、抗生素以及空气等的除菌（但不能除去更小的病毒、支原体和某些L型细菌）。滤菌器的种