典型产品的分离纯化工艺-药食两用植物小根蒜多糖的提取及其糖含量测定（药物分离纯化课件）

药物分离与纯化技术课程典型产品的分离纯化工艺--药食两用植物小根蒜多糖的提取及其糖含量测定药食两用植物小根蒜多糖的提取及其糖含量测定—典型产品的分离纯化工艺大纲1.实验目的2.实验原理3.实验方法及步骤4.注意事项5.结果与分析药食两用植物小根蒜多糖的提取及其糖含量测定—典型产品的分离纯化工艺（一）实验目的1、了解多糖的性质及其常用的提取方法2、掌握水煮醇沉法提取分离小根蒜多糖的操作方法3、掌握苯酚硫酸法测定小根蒜多糖含量的方法药食两用植物小根蒜多糖的提取及其糖含量测定—典型产品的分离纯化工艺（二）实验原理

多糖是由单糖聚合形成的一类天然高分子化合物，它是维持生命机体正常运转的基本物质之一。现已发现的多糖化合物有数百种，广泛分布于植物、动物和微生物中。糖类生物化学的形成与发展，在分子生物学范畴远远落后于蛋白质和核酸，但它作为有机化学开展的研究，甚至比核酸和蛋白质还要早。药食两用植物小根蒜多糖的提取及其糖含量测定—典型产品的分离纯化工艺（二）实验原理研究多糖的结构和活性，首先要对多糖进行提取分离和纯化。多糖的种类繁多，对于不同的目标物，其提取方法也不同。提取多糖的原料通常是先用丙酮、乙醚或乙醇进行预处理，以除去原料中的脂类物质。多糖药食两用植物小根蒜多糖的提取及其糖含量测定—典型产品的分离纯化工艺（二）实验原理常用的多糖提取方法有：热水浸提法；酸浸提法；碱浸提法；酶法等前3种为化学方法，酶法为生物方法，其中较常用的是水提法和碱提法。

此外，利用超声波、微波等技术可有效地提高多糖的提取率和产品质量，并缩短反应时间。多糖提取的目的是为了使尽可能多的多糖成分从原材料中分离出来，为进一步分离纯化打好基础。药食两用植物小根蒜多糖的提取及其糖含量测定—典型产品的分离纯化工艺小根蒜；95%乙醇；6%重蒸苯酚（6克苯酚溶于100ml水）；电热恒温鼓风干燥箱；高速组织捣碎机；恒温磁力搅拌器；水浴锅；可见分光光度计；离心机等。 （三）材料和试剂小根蒜药食两用植物小根蒜多糖的提取及其糖含量测定—典型产品的分离纯化工艺（四）实验方法及步骤1.提取工艺流程小根蒜炮制品——→80℃烘干——→粉碎（孔筛0.5mm）——→石油醚回流脱脂（料液比1：3,时间3h）——→55℃烘干——→80%乙醇回流—→65℃烘干——→粉碎——→加水磁力搅拌浸提45min——→离心（5000r/min,10min）或抽滤——→上清液——→加95%乙醇至75%浓度——→抽滤——→滤渣——→干燥——→称重——→测糖含量药食两用植物小根蒜多糖的提取及其糖含量测定—典型产品的分离纯化工艺2、实验步骤1）取小根蒜粉碎干品约10.0g，置于150ml烧杯中；2）按固液比1:10浸泡后，搅拌均匀；3）在90℃温度下，通过恒温磁力搅拌器或水浴锅浸提45min；4）水煮液离心或抽滤，得残渣和上清液，残渣弃去；5）上清液置于烧杯，加95%乙醇使其终浓度为75%；（四）实验方法及步骤抽滤磁力搅拌器药食两用植物小根蒜多糖的提取及其糖含量测定—典型产品的分离纯化工艺6）将上述溶液离心或抽滤，得醇沉多糖；7）醇沉多糖部分依次用少量无水乙醇、丙酮分数次洗涤；8）将醇沉多糖置于表面皿中置于烘箱60℃干燥5h；9）醇沉多糖干燥后称量，计算提取率；（四）实验方法及步骤烘箱表面皿药食两用植物小根蒜多糖的提取及其糖含量测定—典型产品的分离纯化工艺10）制定葡萄糖标准曲线取经105℃干燥恒重的葡萄糖0.5000g，稀释定容至100mL，从中取出1ml溶液加蒸馏水定容至50ml，此时葡萄糖浓度为0.1mg/ml，精密吸取以上浓度的葡萄糖标准液各0.2mL、0.4mL、0.6mL、0.8mL、1.0mL，分别置于20ml比色管中，再依次加入蒸馏水，使终体积为2ml，同时吸取2ml蒸馏水于比色管中作空白对照，然后在以上各管中各加入5%苯酚1mL，摇匀后立即加入5mL浓硫酸，振荡，室温放置20min后，用紫外分光光度计在490.0nm处测定其吸光值（四）实验方法及步骤标准曲线案例药食两用植物小根蒜多糖的提取及其糖含量测定—典型产品的分离纯化工艺11）样品含量测定:取干燥小根蒜多糖10mg，定容后100ml，吸取样品液1.0mL，加入1mL水，按上述步骤操作，测光密度，以标准曲线计算总糖含量（四）实验方法及步骤药食两用植物小根蒜多糖的提取及其糖含量测定—典型产品的分离纯化工艺(五)注意事项1、粉碎尽可能使其粒度大小一