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膀胱癌尿脱位细胞周期及细胞dna含量的检测

膀胱癌是尿液中最常见的肿瘤。在这项工作中,我们检测了24例膀胱癌尿失眠症和细胞氮含量的变化,并分析了肿瘤细胞周期和dna含量的变化,以了解膀胱癌病理程度的关系,为膀胱癌的发生和预后的评估提供了一定的理论依据。1材料和方法1.1同侧肾不正交检查本组24例。男23例,女1例;年龄46~78岁,平均62岁。临床表现有无痛性血尿22例,膀胱刺激征6例、腰痛伴血尿2例,排尿困难、下腹痛及尿潴留各1例。单发肿瘤13例,多发肿瘤11例,癌转移及复发各1例。IVU提示同侧肾不显影3例。FCM检查尿脱落细胞发现正常二倍体11例(46%),异倍体13例(54%),出现异倍体者其DI值为0.89~2.73(仅1例<1),平均1.6。其中,单/多发肿瘤出现异倍体各为7例(53%)、6例(54%)。病理分级:单发膀胱癌1级4例,Ⅰ~Ⅱ级4例,Ⅱ级3例,Ⅲ级2例;多发膀胱癌1级6例,Ⅰ~Ⅱ级3例,Ⅱ级0例,Ⅲ级2例。出现异倍体者1级6例(单发/多发各3例)、Ⅰ~Ⅱ级2例(单发/多发各1例)、Ⅱ级1例(单发)、Ⅲ级4例(单发/多发各2例),无异倍体者Ⅰ级2例、Ⅰ~Ⅱ级6例、Ⅱ级3例、Ⅲ级0例。尿脱落细胞检查阳性2例(8.3%),该2例均查见异倍体。全组均确诊为膀胱移行细胞癌。1.2检测方法1.2.1主体高校血药浓度内装,收集人类培养过程中的人类检验每例患者均于膀胱镜检查时收集冲洗液。具体方法是:经尿道插入膀胱镜看见肿瘤后,经膀胱镜行生理盐水膀胱冲洗,收集膀胱冲洗液200~300mL即刻送检或4℃冰箱保存24h内送检。尿液收集完毕行肿瘤活检,以避免活检后出血对检测结果产生影响。1.2.2流式细胞仪检测方法采用美国BD公司制造的CycleTEST1.2.3评估的结果以DNA指数(DI值)表示DNA含量,DI值为被测样品峰道值与正常二倍体细胞G1.3统计分析2结果2.1表1显示了膀胱癌病理程度与异倍体率之间的关系两组数据折线图如下:2.2表2显示了异基因体和双基因体的细胞周期2.3表3显示了两组之间的全球体细胞周期2.4表4显示了异倍体的双重体和异倍体细胞的周期2.5fm检测尿破细胞的直方图3异倍体的发现与病理分级的关系膀胱癌是泌尿系统的常见肿瘤,恶性程度较高,其病理以移行性膀胱癌为主。目前,诊断膀胱癌的方法很多,尿脱落细胞学检查是膀胱癌无创伤性诊断最常用的手段,但其敏感性较低,很容易漏诊。本组资料亦见,尿脱落细胞检查的阳性率仅为8.3%,明显低于FCM的倍体分析(54%)。膀胱镜检查是诊断膀胱癌的标准检查,研究表明,膀胱癌细胞的出现可能早于膀胱镜观察到的病变,而且由于癌细胞较易于脱落,尿脱落细胞中有95%为癌细胞流式细胞术(flowcytometry,FCM)是一项新型的、发展迅速的生物医学分析技术,它是集激光技术、光电测量技术、计算机技术、流体力学以及细胞免疫荧光化学技术、单克隆抗体技术为一体的新型高科技细胞分析技术笔者对24例膀胱癌患者的膀胱冲洗液进行了流式细胞术检测,发现54%出现了异倍体,明显低于文献报道(38/46)此外,本组结果也显示,异倍体在膀胱癌Ⅰ和Ⅲ级时出现几率最高,Ⅱ级以内较低;而无异倍体率与病理分级的关系正好与之相反。表明肿瘤细胞分化程度影响异倍体的出现,分化越好或越差时异倍体出现的机率最高。有异倍体者,其Ⅱ级以下所占比例(61.6%)明显低于无异倍体者(72.7%),而Ⅱ级以上(38.5%)却显著高于无异倍体者(27.3%),且Ⅲ级比例达到30.8%。上述结果提示,随着膀胱癌病理分级的增加,异倍体率也就随着增加。存在异倍体的13例患者,对比其二倍体和异倍体的细胞周期结果可见,异倍体细胞的S期所占比例显著高于前者,表明膀胱癌在出现异倍体时,其肿瘤细胞DNA合成占据明显优势,也进一步推测肿瘤细胞可能对正常细胞的增殖分化具有明显的抑制作用,可能正是这种异常的不断消长促进了肿瘤细胞的不断增殖和分化,从而推动了膀胱癌的发展。总之,上述研究结果表明:膀胱癌细胞的分化程度影响异倍体的出现,异倍体是判断膀胱癌病理分级的重要依据,异倍体预示着膀胱癌的潜在高恶性和不良预后;随着肿瘤细胞分化增殖程度的增高,异倍体率呈现

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