丝蛋白创面敷料临床试验报告(主要结果)

丝蛋白创面敷料临床试验报告〔主要结果〕11.1 争论背景II度烧伤和供皮的敷料。在创面掩盖物中，应用于II度烧伤创面和供皮区的敷料主要性能除了常规要求：包括粘附性、通透性、屏障功能、削减苦痛、顺应性、耐用性、不干扰创面愈合过程以潮湿环境、主动抑制创面渗液渗出，具有促进创面坏死组织脱落，从而减轻炎症反响丝蛋白创面敷料简介主要用途①用于治疗深II度及中厚供皮区创面为代表的深度创面或皮肤缺损：作为创面修复敷料，避开创面暴露，防止创面感染，减轻苦痛，促进创面愈合。②用于治疗浅II度及刃厚供皮区创面为代表的浅度创面或皮肤缺损：作为创面修复作为创面治疗敷料，应用时间：1—15天。形态构造1提纯后，承受冷冻枯燥工艺加工而成，微孔材料的外观为白色；上层12医用硅橡胶膜(见图2)。敷料厚度：2.0mm左右1丝蛋白创面敷料的构造示意图上外表(b)下外表2丝蛋白创面敷料外表的扫描电子显微镜照片产品特性及作用机理面粘附；的流失；③良好的生物安全性：无细胞毒性、刺激性、过敏性；裂；⑤能减轻苦痛：保护神经末梢免受外界刺激；⑥促进创面愈合：利用蚕丝丝素蛋白良好的生物相容性和丝素微孔材料保水力气，为的的基质过度沉积，无占位性；⑦适当的通透性：能把握水分蒸发。生产工艺过程桑蚕生丝—脱胶〔碳酸钠溶液，98-100℃，2小时〕—洗涤—枯燥—丝素纤维—溶解〔氯化钙的乙醇溶液，70℃，1-2小时〕—原料来源本产品使用的主要原料是桑蚕生丝——由定点缫丝厂生产。〔缫丝〕〔来自于绿色养蚕基地〕茧〔70—125℃，4-7小时〕—干茧—混茧—剥茧〔剥去蚕茧外层散乱的茧衣〕—选茧〔选除有明显疵点的蚕茧〕—煮茧〔90—100℃水蒸气及高温水，10-18分钟〕—缫丝〔将蚕丝从茧层上离解出来，合并假设干跟茧丝制成连续的生丝〕—复摇—整理〔绞丝、检验、包装、再检验等〕—桑蚕生丝。原料丝素和生丝分别有相应的行业标准和国家标准。原料源头把握：蚕种——家〔桑〕蚕种，来源于江苏省蚕种场；养蚕及烘茧——苏豪国际集团下属蚕业公司溧阳绿色〔定点企业〕。产品特性说明－丝蛋白创面敷料的非吸取性：由于本品承受高温等工艺处理，使丝素微孔材料内的丝素结晶化，使其在掩盖在创面的短期〔15天〕[13]。－丝蛋白创面敷料的保水性：利用丝素的较强亲水性，同时利用微孔丝素材料的多孔境。丝蛋白创面敷料的透湿性：丝蛋白创面敷料上外表的医用硅橡胶膜能有效避开创面暴露，阻挡细菌入侵，削减水分、热量、蛋白质和离子的流失；同时允许适量水蒸气透过，可以有效防止创面积液。蚕丝丝素材料的安全性蚕丝丝素的构造〔桑蚕〕丝。蚕丝由丝素〔又称“丝芯蛋白”,约占75%〕和丝胶〔约占25%〕两种蛋白质组成。丝素纤维位于蚕丝内部，是纤维状蛋白，结晶度较高，不溶于水；丝胶包裹于丝素外围，是球状蛋白，可溶于水。家蚕丝素的主要成分是H链，H链的核心区域由12个低简洁度的“结晶”区域和11段几乎一样拷贝的43Gly-X94%的序列，X65%,丝氨酸占23%,酪氨酸占9%70个氨基酸残,GAGAGSGAASGly-X严格重复。依据蚕丝丝素的产生原理，丝素蛋白纯度高，不含有生物杂质5龄期后，蚕的绢丝腺〔蚕体内的一个腺体〕5排列的构造——液晶。吐出后即形成丝素纤维。要提纯〔大〕高，不含有细胞、细胞器、其他蛋白、多糖、DNA或其片段、蚕病原微生物等生物杂质。尚未觉察蚕与人类存在病原微生物穿插感染的可能性蚕属于昆虫纲、鳞翅目、蚕蛾,在国内外大量的争论说明，丝素蛋白材料具有牢靠的生物安全性20长。列举几篇争论报道如下：UngerR.E.Unger,K.Peters,etal.Endothelializationofanonwovensilkfibroinnetforuseintissueengineering:growthandgeneregulationofhumanendothelialcells.Biomaterials,2023,25:5137-5146)争论了几种人源细胞对丝素蛋白无材料上的黏附和生长状况。结果说明这些细胞在丝素材料的纤维上能快速黏附并扩增。细Zhang等(X.Zhangetal.Invitroevaluationofelectrospunsilkfibroinscaffoldsforvascularcellgrowth.Biomaterials，2023，29：2217-2227Kuniyo等(KuniyoInouye,MasatoKurokawa,ShigemichiNishikawa,MasuhiroTsukada.UseofBombyxmorisilkfibroinasasubstratumforcultivationofanimalcells.BiochemicalandBiophysicalmethods,1998,37:159-16)4争论了多种哺乳动物30%和50%。丝素蛋白能促进贴壁细胞的生长，并且丝素材料可以替代胶原蛋白作为细胞培育的基质材料。Norihiko等(NorihikoMinoura,Sei-IchiAiba,etal.Attachmentandgrowthoffibroblastcellsonsilkfibroin.Biochemicalandbiophysicalpesearchcommunications,1995,2(208):511-516和增殖。IlariaDalIlariaDalPra,GiulianoFreddi,etal.Denovoengineeringofreticularconnectivetissueinvivobysilkfibroinnonwovenmaterials.Biomaterials,2023,26:1978-99生。L．MeinelReginaV,SamuelP,WayneM.OrientationofsilkⅢattheairwaterinterface.Journalofcolloidandinterfacescience,2023,266:68-7)3将蚕丝丝损部位，8周后生骨根本连接了缺损，说明蚕丝丝素支架材料具有良好的骨组织相容性。－— [47][89][1011][12]－— ISO标准要求RNAmRN的A[13]。－[1415]－曾在江苏省药监局注册的“AST-1全有效〔原苏州丝绸工学院〕“AST-1丝素创面保护膜”产品，注册证号：苏药器监〔准〕95264098号〔附录14.5〕。该产品曾批量用于临床，临床应用〔14.6〕好的透水蒸汽性，安全有效。“丝蛋白创面敷料”作为“AST-1丝素创面保护膜”的延长〔丝素蛋白〕仍连续了原产品未蚕丝丝素作为美国强生公司蚕丝手术缝合线原料，生物安全性久经考验丝蛋白创面产品注册型式检验结果显示产品具有较高安全性pH值、无菌、重金属含量、生物相容性等工程进展了检测，并在此根底上制定了注册产品标准，经江苏完整，不裂开；在50℃±1℃环境中，收缩率为0.6％-1.1％，不大于5％；按YY/T0148C24h500g.m-2,符合标准要求；pH1级，符合标准要求；无皮肤致敏反响、无皮肤刺激反响。检测结果说明：丝蛋白创面敷料具有较高的安全性。动物试验试验分组和动物模型制作SPFSD36只〔中国医学科学院上海试验动物中心〕230-250g。于术前一天硫化钡脱毛，经2.5%戊巴比妥钠〔35mg/kg体重〕腹腔注射麻醉，18〕凡士林纱布〔生产厂：绍兴振德医用敷料〕76度水温烫伤103天，5天，8天，11天和14天取材。每组每个时相点动物数为3只。试验过程如图1—6。图1SD麻醉大鼠 图2硫化钡脱毛17图3SD大鼠脱毛后 图4大鼠背部皮肤二度烫伤大鼠烫伤深度的检测SD大鼠烫伤后，皮肤外表红润，轻度水肿。Masson”s染色观看显示：正常皮肤表图7、图8所示。图7烫伤皮肤 图8正常皮肤试验取材和观看于术后3天，5天，8天，11天和14天更换外敷料，同时进展创面大体观察。另外，行创面组织取材，大小约0.5×0.5cm2，马上置10%福尔马林溶液固定。标本制成石蜡切片后，Masson”s染色观看创面愈合过程中组织学变化〔胶原纤维呈绿色，胞浆呈红色，胞核呈兰黑色〕大鼠创面愈合过程的大体观看3红润，如图9、图10所示。术后8天比照组创面外表形成黄色焦痂，质较硬。试验组创面清洁，潮湿，大局部坏死组织已脱落，局部创面开头上皮化，如图11、图12所示。术后14组创面已根本愈合，皮肤清洁光滑，如图14所示。118天118天128天

103天

13、图13比照组术后14天 图14试验组术后14天大鼠创面愈合过程的组织Masson”s 染色观看3痂皮呈脱落趋势，如图15、图16示。术后8天，比照组炎症反响仍明显，可见表皮层少量细胞生长聚拢，试验组大量细胞在表皮层生长聚拢，如图17、图18所示。术后14天，表皮层仍在形成过程中，试验组表皮层已形成，而且具备角质层构造，如图19、图20所示。图19比照组术后3天 图20试验组术后3天图23比照组术后8天 图24试验组术后8天27142814天动物试验结论程的作用。鉴于“丝蛋白创面敷料”在动物试验中表现出一种优异的生物敷料特性，结合苏州市华信丝绸技术开发公司生产的“AST-1创面保护膜”〔主要材料为丝素蛋白〕的临床试用报告〔附录14.6〕，显示出“丝蛋白创面敷料”具有良好的应用前景。因此，有必要性能。

2、临床一般资料本临床试验依据丝蛋白创面敷料临床试验方案的要求进展，针对本试验临床过程中消灭者沟通并解决。具体标准如下：受试者入选标准：年龄18～65岁，性别不限；假设为烧伤患者，二度烧伤创面〔含浅Ⅱ度，深Ⅱ度〕限于三天以内的颖30%；病人同意参与本试验，并签署知情同意书；无严峻心、肝、肾及血液系统合并症及无全身严峻感染者；非甲肝、乙肝、艾滋病、结核等传染性疾病处于活动期者；受试者排解标准：〔1〕1865岁以上者；〔2〕III度烧伤面积大于30％或伴有严峻全身感染者；〔3〕原有严峻心脏病、不稳定〔4〕原有慢性肾脏疾病，肾功能不全，入院时血清肌酐大于正常上限的 1.25倍；〔5〕原有明确的肝脏疾病，入院时肝功能AST或ALT大于正常值上限的1.5倍；〔6〕哺乳期、孕期的妇女；〔7〕4周内使用过对主要脏器有损害的药物者；〔8〕有哮喘、荨寻麻疹等过敏体质的患者，对丝素蛋白材料有过敏史者。糖尿病患者；有精神疾患者。全身或局部使用促进创面愈合药物的患者；争论者认为不宜参与本临床试验的患者。受试者剔除标准：试验期间觉察违反入选要求，予以剔除；试验期间如因不良大事不得不去除移植物或实行其他治疗，则实行相应的治疗措施，并予以脱落处理；受试者撤消知情同意、依从性差、治疗无效改用其它疗法者；〔4〕必需记录并通知监查员。〔1〕试验中消灭严峻的安全性问题，应准时中止试验；申办者要求中止；试验过程中试验方案有重大失误，难以评价治疗的安全性和有效性；行政部门要求中止。选择对象数量及选择理由依据本临床试验争论的主要疗效指标创面愈合时间估量样本量。本争论假设为：丝蛋白创面敷料用于II度烧伤创面及供皮区创面掩盖的愈合时间与灭菌凡士林纱布不等。试验参数设定：假设假定α=0.05，Power=80%，试验组：比照组按1：1设计。依据文献资料，两组创面愈合时间合并的标准差约为 2天左右，假设试验组创面愈合时间较比照组缩短1天，估量试验组为32例、比照组32例。考虑到实际可能发生的脱落〔20%计〕，3636例。依据浅IIII层设计，浅II度烧伤创面及刃厚皮供皮区创面72例〔试验组36例、比照组36例〕，深II二度烧伤创面及中厚皮供皮区创面72例〔试验组36例、比照组36例〕，共14401上海交通大学医学院6666附属瑞金医院2402南通大学附属医院121212124803苏北人民医院121212124804中国人民兰军区兰州总医院州666624合计36363636144中心中心供皮区创面 供皮区创面合计试验组 比照组 试验组 比照组创面感染治疗创面。过敏反响马上停顿使用本产品，查明过敏缘由。不良大事处理在试验中如消灭严峻不良大事，担当临床争论的单位须马上实行必要措施，保护受试者安全，并在243、临床试验方法本临床试验承受随机、开放、灭菌凡士林纱布平行比照试验设计。将入选病人随机分成试验与比照两组，浅IIII度烧伤创面及中厚皮供全性和临床疗效。随机分组本争论虽为开放性试验，但为避开受试者入组时可能存在的选择性偏倚，由南京医科大学流行病与卫生统计学系生物统计学专业人员承受计算机SAS程序模拟产生随机数，分组。比照本试验承受灭菌凡士林纱布作为比照组。试验创面的选择由于关节等活动部位及持续受压迫部位可能会影响伤口愈合程度和时间，因此，试验用器械试验用器械由苏州苏豪生物材料科技、绍兴振德医用敷料有限公司供给。试验组：规格型号：20100mm；10100mm〔SHF-1型〕〔企业标准〕20230901比照组：〔灭菌批号：3.5. 伦理学要求本临床试验必需遵循赫尔辛基宣言和中国有关临床试验争论法规、规范进展。在试验书，并以争论档案保存其中。3.6. 试验流程试验流程图访视访视使用前〔1〕2345与手术日相比的时间天数〔天〕创面完全愈合71014知情同意书X人口学资料X病史记录和体格检查X血常规XXX尿常规XXX血肝肾功能XXX使用日当天观看X使用后创面观看XXXX记录不良大事XXXX注：血生化包括ALT、AST、BUN、Cr。对于浅二度烧伤创面及刃厚皮供皮区创面，于访视点2进展第2次血常规、尿常规、肝肾功能检查，并42次血常规、尿常规、肝肾功能检查，并翻开创面观看、记录。:,:是否固定良好。使用后创面观看：创面愈合状况，记录病人的苦痛程度、创面边缘的炎性反响程度。入院 有可能 知情

,不入组

,,填筛,保存知情同意检查 入组 同意

按方案 体检:

编号丝蛋白创面敷料临床试验流程简要图示7．丝蛋白创面敷料使用方法：〔1〕贴附前贴附前，应用无菌生理盐水充分浸泡丝蛋白创面敷料，必要时更换生理盐水。〔2〕贴附时依创面大小，贴附1张或数张，与创面严密贴附。手术时将“微孔”面〔微孔材料面，白色或淡黄色〕面对创面贴附。使用多张产品时，产品与产品之间依据需要固定。〔3〕贴附后上面用纱布掩盖固定。〔4〕留意事项本品由专业医生贴附或在专业医生指导下贴附。本品为无菌产品，开封后应马上使用。开封后未用完局部应丢弃，本产品不得再次灭菌使用。如觉察铝箔包装袋有破损，制止使用3.8、临床观看时间点及观看要求临床观看时间点的设置如下：访视1创面使用丝蛋白创面敷料或凡士林油纱布就位前、就位后访视27天访视310天访视414天访视5创面完全愈合〔访视点〕观看时间在各访视点按临床评价标准记录一次病人创面的愈合状况、苦痛程度〔访视点〕观看时间1II度创面；丝蛋白创面敷料或灭菌凡士林纱布就位后是否固定良好。访视点2II创面愈合状况，拍照记录并测量创面大小、病人的苦痛程度、创面边缘的炎性反响程度，II视创面愈合状况翻开或不翻开创面，记录病人的苦痛程度、创面边缘的炎性反响程度，不3创面边缘的炎性反响程度，不进展血常规、尿常规、肝肾功能检查。访视点4IIII5边缘的炎性反响程度，不进展血常规、尿常规、肝肾功能检查。安全性评价试验中亲热观看不良大事并评价，对临床消灭的不良反响，应准时、乐观地治疗，随访至病症消逝，并记录。度、创面边缘的炎性反响程度。观看工程〔1〕人口学资料：性别、年龄。〔2〕生命体征：呼吸、体温、心率。〔3〕一般临床资料：病史、查体状况。〔4〕试验室检查——血常规、尿常规、肝、肾功能。〔5〕有效性评价——按有效性评价标准进展观看。〔6〕4、所承受的统计方法及评价方法FAS〔FullAnalysisSet〕:ITT原则确定1符合方案集PPS〔Per-ProtocolSet〕:是FAS总集的子集合，包括全部符合试验方案、依从性好、试验期间未用用品、完成CRF的病例。安全性分析集SAS〔SafeAnalysisSet〕：即安全性数据集，指用过试验敷料并至少有一次安全性评价记录的病例。FASFASPPS进展分析，但以FAS分析的结论为主。当FAS和PPS所得结论一致时，可以增加结论的可信度。统计分析打算统计分析将承受SAS9.1.3统计分析软件进展计算。全部统计检验p0.05不同治疗组各次就诊的计量资料将承受均数±标准差进展统计描述。与筛选期根底值t〔ANOVA〕进展比较。不同治疗组各次就诊的计数资料承受频数〔构成比〕进展统计描述。两组治疗前后的20变化承受X检验或非参数检验。〔1〕脱落分析：两组总脱落率和由于不良大事而脱落的比较将承受X2检验。〔2〕根底值的均衡性分析：承受方差分析或X2检验来比较将人口学资料和其它根底值指标，以衡量两组均衡性如何。〔3〕床试验，在作此分析时，将考虑中心效应对疗效指标的影响。〔4〕安全性分析：承受X2检验或精准概率计算比较两组不良大事发生率，并列表描述本次试验所发生的不良大事。5、临床评价标准创面愈合状况21愈合率＝

治疗前伤口面积－治疗后未愈伤口面积治疗前伤口面积

10％伤口面积测量方法：承受坐标纸尺放置于伤口边缘，拍照记录并计算面积。痊愈：创面愈合率≥90％90%＞创面愈合率≥60％进步：60%＞创面愈合率≥20％无效：创面愈合率＜20％有效率＝〔痊愈人数＋显效人数〕 /观看人数×100％程度工程红肿程度工程红肿热渗液无轻中重0123012301230123、苦痛程度评分承受VAS法对患者自觉病症进展评估。即承受一条长约10厘米的标尺,一面标有10个刻度,两端分别“0“分端和“10“分端“0“分表示无痛,“10“、不良反响评价不良反响发生率计算公式如下：该组病例总数%=不良反应病例数该组病例总数该组病例总数6、临床试验结果入组状况及依从性本临床试验随机入组144例，创面应用灭菌凡士林纱布者〔A组〕，72例，脱落4例，实为68例；创面应用丝蛋白创面敷料者〔 B组〕，72例，10％222317113953.74%6-1-1,6-1-26-1-3，轻度违反方案未剔除病例状况见表6-1-4。可比性〔或灭菌凡士林纱布〕可比。具体项临床数据比较参考表6-2-1至表6-2-7。受试者在性别、年龄、试验前对本疾病的治疗、创面类型、创面部位、创面面积等一般资料方面，两组间比较差异均无统计创面愈合状况全部入组受试者的创面最终都愈合。但创面应用丝蛋白创面敷料者平均愈合时间比应〔P=0.0013，P=0.0018〕；凡士林纱布者，统计分析有显著差异〔P=0.0049〕；分层分析说明，深II度创面应用丝安全性评价心率、呼吸、体温变化：不良影响。在两组受试者疗程中，心率、呼吸、体温变化根本相像，组间比较差异无统计学意义，具体参考表 6-4-1、6-4-2。血、尿各项化验结果：临床结果显示：丝蛋白创面敷料作为创面临时性掩盖物，到达了安全，无致敏、免疫排斥反响的要求。临床试验过程中，两组受试者均无致敏、肝肾功能损伤等不良反响。血尿常规、肝肾6-4-3至表6-4-9。主要疗效指标：创面愈合时间〔天〕临床统计数据结果说明：创面应用丝蛋白创面敷料者愈合天数比应用灭菌凡士林纱布者短。FAS分析〔参考表6-5-1〕：创面应用丝蛋白创面敷料者和应用灭菌凡士林纱布者两组中位愈合天数〔比照A组为14天，试验B组为12天〕组间比较差异有统计学意义〔P=0.0013〕。分层分析争论结果如下：浅 II度两组中位愈合天数〔比照A组为14天，试验B组为13天〕组间比较差异有统计学意义〔P=0.0349〕，深II度两组中位愈合天数〔比照验B组为12天〕组间比较差异也有统计学意义〔P=0.0139〕。

A14天，试PPS分析〔参考表6-5-2〕：创面应用丝蛋白创面敷料者和应用灭菌凡士林纱布者两组中位愈合天数〔比照A组为14天，试验B组为13天〕组间比较差异有统计学意义〔P=0.0018〕。分层分析争论结果如下：浅 II度两组中位愈合天数〔比照A组为14天，试验B组为13天〕组间比较差异有统计学意义〔P=0.0370〕，深II度两组中位愈合天数〔比照试验B组为12天〕组间比较差异也有统计学意义〔P=0.0189〕。

A14天，创面愈合状况：临床统计结果说明：使用后7天B组痊愈率和显效率高于A组；使用后14天，II度创使用后7天临床疗效FAS分析(参考表6-6-1)：两组疗效等级比较差异有统计学意义(P=0.0049)；A组的痊愈率为7.94%，B组的痊愈率为27.94%，校正中心效应组间比较差异有统计学意义 (P=0.0027)；A组的显效率为9.52%，B组的显效率为32.35%，校正中心效应后组间比较差异有统计学意义(P=0.0011)。使用后14天临床疗效FAS分析(参考表6-6-2、6-6-3)：创面应用丝蛋白创面敷料者(B组)和应用灭菌凡士林纱布者(A(P=0.0321)。创面应用丝蛋白创面敷料者痊愈率为78.87%，而应用灭菌凡士林纱布者为 62.69%，校正中心效应组间比较差异有统计学意义(P=0.0262)；A组的显效率为71.64%，B组的显效率为83.10%，校正中心效应后组间比较差异无统计学意义(P=0.0949)。分层分析结果显II(P=0.7669)，两组痊愈率及显效率校正中心效应后组间比较差异无统计学意义(P=0.7386，P=0.8077)；深II度中两组疗效等级比较差异有统计学意义(P=0.0042)，两组痊愈率及显效率校正中心效(P=0.0023P=0.0204)。应用灭菌凡士林纱布者主诉创面换药时苦痛严峻。两组疗程中分别都以用药后7天、10天和14天换药时为苦痛观看记录点，两组间比较差异统计结果分别是： P<0.0001、P<0.0001、P=0.0006，两组间比较差异有统计学意义。具体参见表6-6-4。创面炎症反响：26临床数据显示：应用丝蛋白创面敷料的创面无明显的炎症反响用丝蛋白创面敷料对创面前期有抑制渗液渗出效果。

，且应临床过程中，应用丝蛋白创面敷料和应用灭菌凡士林纱布的两组创面在红、肿、热方7面敷料对创面早期有抑制创面渗出效果，且组间比较有统计学意义〔P＝0.0395，P＝0.0103〕，6-6-5。7、临床试验中觉察的不良