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微生物检验实验室嗜血杆菌属检验标准操作规程1.概述嗜血杆菌属包括流感嗜血杆菌、埃及嗜血杆菌、副流感嗜血杆菌、杜克嗜血杆菌等9个种。临床上以流感嗜血杆菌最为常见。2.标本类型血液、痰、脑脊液标本。3.鉴定3.1形态与染色革兰阴性短杆菌。3.2培养特性在巧克力琼脂平板上35℃培养18~24小时，形成微小、无色透明似露滴状的菌落。在血琼脂平板上形成极小、圆形、透明的菌落，并有“卫星现象”。3.3生化反应分解葡萄糖，不分解蔗糖和乳糖，吲哚、触酶和硝酸盐还原试验均为阳性。3.4鉴别要点3.4.1本菌属特征革兰阴性细小杆菌，多形性，菌落为无色透明似露滴状，卫星现象阳性，生长需要X、V两种因子，普通培养基不生长。3.4.2流感嗜血杆菌的种间鉴别见表嗜血杆菌鉴别的关键性试验菌名X因子V因子溶血葡萄糖蔗糖甘露糖木糖触酶硫化氢流感嗜血杆菌 + + - + - - + + -埃及嗜血杆菌 + + - +- - - + -溶血嗜血杆菌 + + + +- - + + +杜克嗜血杆菌 + - - - - - - - -副流感嗜血杆菌 - + - + + + - V +副溶血嗜血杆菌 - + + + - - - + +惰性嗜血杆菌 - + - W - - - V -副嗜沫嗜血杆菌 - + - + + V V - +嗜沫嗜血杆菌W - - + + - - - +注：“+”为90%以上菌株阳性，“-”为90%以上菌株阴性，“V”为11-89%菌株阳性，“W”为弱发酵反应。3.5操作步骤3.5.1涂片、革兰染色呈革兰阴性短小杆菌。3.5.2鉴定从巧克力琼脂平板上挑取可疑菌落，用微生物鉴定仪或传统生化反应进行细菌鉴定。4.药敏参见《药物敏感性试验标准操作规程》及CLSIM100-S20最新版本文件。5.质量控制见《质量管理程序》。6.检验结果解释与分析如果检出β-内酰胺酶阳性流感嗜血杆菌则提示对青霉素、氨苄西林、阿莫西林耐药（耐药机制大多为TEM型β-内酰胺酶）。如果流感嗜血杆菌β-内酰胺酶阴性，而对氨苄西林耐药，则对阿莫西林-克拉维酸、氨苄西林-舒巴坦、头孢克罗、头孢他啶、头孢尼西、头孢丙烯、头孢呋辛均耐药。7.临床意义流感嗜血杆菌常寄居于正常人呼吸道（在呼吸道定植者可达到人群的50%），当机体抵抗力下降时，可引起人类呼吸道感染；也也可随血液入侵组织内部，引起脑膜炎、关节脓肿或其他部位的化脓感染。副流感嗜血杆菌寄居在人类的上呼吸道，可引起呼吸道感染，偶尔引起心内膜炎等。8.鉴定流程血液、脑脊液血液、脑脊液巧克力、血琼脂平板挑取可疑菌落涂片、吲哚试验可疑菌落有“卫星现象”药敏试验、生化试验嗜血杆菌属痰、脓液增菌参考文献[1]周庭银编著.临床微生物学诊断与图解，第二版，上海：上海科学技术出版社，2007[2]叶应妩，王毓三，申子瑜主编，全国临床检验操作规程，第三版，南京：东南大学出版社，2006[3]中国合格评定国家认可委员会，CNAS-GL23:2008医学实验室质量和能力认可准则在临床微生物学检验领域的指

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