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微生物检验实验室诺卡菌属标准操作规程1概述诺卡菌属是一群需氧的、能形成气中菌丝、有孢子的革兰阳性菌。包括9个种，其中星形诺卡菌、巴西诺卡菌、皮诺卡菌、豚鼠耳炎诺卡菌、南非诺卡菌、新星诺卡菌等6个种与人类疾病有关。2.标本类型痰液、脑脊液、穿刺液、脓液、血液等标本。3鉴定3.1态与染色：革兰阳性，菌体为丝状，称为菌丝或菌丝体。培养早期，菌体裂解为较多的球菌或杆菌状，分枝状菌丝较小；培养后期，可见丰富菌丝体形成。在脓液、痰和脑脊液等临床标本中，为纤细的分枝状菌丝。抗酸染色弱阳性。3.2培养特性：注意寻找标本中的颗粒接种培养，在不含抗生素的沙氏培养基（SDA）或营养琼脂培养基上，22℃或35℃均可缓慢生长，需5~7天可见菌落。菌落表面有皱褶，呈颗粒状、黄色或深橙色，表面无白色菌丝。在血琼脂平板上菌落较小、凸起，呈白色，时间延长可出现橙色。3.3生化反应：分解葡萄糖，不分解甘露醇、肌醇、酪蛋白、酪氨酸和黄嘌呤，不水解淀粉，不液化明胶。3.4鉴别要点：3.4.1本菌特征：革兰阳性，菌体为丝状，抗酸染色弱阳性；生长缓慢，菌落较小；分解葡萄糖，不分解酪蛋白、酪氨酸和黄嘌呤。3.4.2与分枝杆菌的鉴别：星形诺卡菌革兰染色性强，抗酸染色性弱，盐酸乙醇易脱色，菌体呈丝状；分枝杆菌抗酸性强，不易脱色，革兰染色弱。3.4.3与红球菌属的鉴别：星形诺卡菌对青霉素耐药，红球菌则敏感。3.4.4与棒状杆菌的鉴别：星形诺卡菌菌体呈丝状，而棒状杆菌属菌体一端或两端膨大呈棒状。3.4.5与分枝杆菌属和放线菌属的鉴别三者镜下形态相似，但星性诺卡菌抗酸染色弱阳性，分枝杆菌属强阳性，放线菌属为阴性。3.5操作步骤3.5.1观察菌落特征，挑取可疑菌落，涂片染色镜检。3.5.2触酶试验参见触酶试验标准操作规程3.5.3鉴定从SDA平板上挑取纯菌落，用仪器法或传统生化法进行细菌鉴定。4.药敏参见药物敏感性试验标准操作规程及CLSIM100-S20最新版本文件。5.质量控制参见质量管理程序。检验结果解释与分析6.1新鲜的诺卡菌培养物经革兰氏染色为阳性的杆菌，特别是菌龄较短，尚无菌丝体出现时，启形态类似细菌，鉴定中应注意。6.2培养早期，菌体裂解为较多的球菌或杆菌状，分枝状菌丝较少；培养后期，可见丰富菌丝体形成。6.3有些病人痰培养诺卡菌阳性，但没有诺卡菌感染的症状，星形诺卡菌可能是呼吸道的正常菌群，有些患者有空洞性结核、癌、囊性纤维化、哮喘或其他潜在疾病的病人，其呼吸道可能有诺卡菌的寄生。7.临床意义星形诺卡菌可引起原发性化脓性肺部感染，可出现类似结核的症状。肺部病灶可向其他组织器官扩散，形成皮下脓肿、多发性瘘管、脑脓肿、腹膜炎等。巴西诺卡菌可引起足放线菌病，表现为足部或腿部皮下肿胀、脓肿及多发笥瘘管等。8鉴定流程G+球杆菌G+球杆菌血琼脂平板菌落呈黄色或深橙色菌丝（培养后期）其他细菌弱阳性抗酸染色阴性诺卡菌属、链霉菌等参考文献[1]中国合格评定国家认可委员会.CNAS-CL23:2008医学实验室质量和能力认可准则在临床微生物学检验领域

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