玻璃器皿的清洗包扎干热灭菌及常见培养基配置湿热灭菌

玻璃器皿的清洗包扎干热灭菌及常见培育基配置湿热灭菌一、目的要求二、试验材料三、操作步骤污程度等的不同而有所不同。玻璃器皿的洗涤方法2%的盐酸或洗涤液，浸泡后用自来水冲洗干净。使用过的玻璃器皿的洗涤方法试管、培育皿、三角烧瓶、烧杯等可用瓶刷或海绵沾上肥皂或洗衣粉或去干净，常在器壁上附有10洗涤液浸泡数小时，然后再用自来水充分冲洗。装有固体培育基的器皿应先将其刮去，然后洗涤。带菌的器皿在洗涤前先2%0.25%24(3)载玻片与盖玻片用过的载玻片与盖玻片如滴有香柏油，要先用皱纹5—10min，用0.5—2h，自来水冲去洗涤液，最终用蒸馏水换洗数次，待干后浸于95%酒精中保存备用。洗涤液的配制与使用洗涤液的配制洗涤液分浓溶液与稀溶液两种，配方如下:浓溶液重铬酸钠或重铬酸钾(工业用)50g自来水150mL浓硫酸(工业用)800mL50g自来水850mL浓硫酸(工业用)100mL配法都是将重铬酸钠或重铬酸钾先溶解于自来水中，可渐渐加温溶解，冷却后(2)原理重铬酸钠或重铬酸钾与硫酸作用后形成铬酸，酪酸的氧化力量极强，因而此液具有极强的去污作用。(3)使用留意事项(a)洗涤液中的硫酸具有强腐蚀作用，玻璃器皿浸泡时间太湿布抹去;(b)玻璃器皿投入前，应尽量枯燥，避开洗涤液稀释;(c)此液的使用仅限于玻璃和瓷质器皿，不适用;(d)有大量有机质的器皿应先行擦洗，然后再用洗涤液，这是由于;(e)盛洗涤液的容器应始终加盖，以防氧化变质;(f)洗涤液可反复使用，但当其变为墨绿色时即已失效，不能再用。(二)空玻璃器皿的包扎培育皿的包扎5—85太大，多8吸管的包扎0.5cm1.5cm花，以免紧，吹吸纸条的近吸管卷入好，进展干热灭菌。试管和三角烧瓶等的包扎层报纸铁丝篓中，用大张报纸将一篓试管口做一次包扎，包纸的目的在于保存期避开灰尘侵入。最好再加一层牛皮纸。内，然后放入电热烘箱中。试验所需为此时烘箱红灯亮，说明烘箱已开头加热，当温度上升至所设定温度后，则烘箱绿灯亮，表示巳停顿加温。恒温当温度升到所需温度后，维持此温度2h。降温切断电源，自然降温。70?以下后，才能翻开箱门，取出灭菌物品。一、目的要求二、试验材料1mol/LNaOH、NaCL、1mol/LHCl、KHPO?3HO、MgSO4?7HO、FeSO?7HO242242pH纸、记号笔、线绳、纱布三、操作步骤(一)牛肉膏蛋白胨培育基的配制牛肉膏蛋白胨培育基是一种应用最广泛和最一般的细菌根底培育基。其配方如下:3gl0gNaCl5g15—20g1000mL、pH7.4—7.61.烧杯人热水中，牛肉膏便与称量纸分别，马上取出纸片。蛋白胨极易吸潮，故称量时要快速。用玻棒的琼脂放出，最终补足所失的水分。1mol/LNaOH，边加边搅拌，pH1mol/LHClpH调整通常pH的浓度。4.过滤:液体培育基可用滤纸过滤，固体培育基可用4层纱布趁热过5.时可用三角漏斗以免使培育基沾1/5，灭菌后制成斜1/4灭菌后垂直待凝。才能起到防3,5防棉塞脱落。凝水沾湿棉纸。然后用记号笔注明培育基名称、组别、日期。20min。如因特别状况没能准时灭菌，则应放人冰箱内临时保存。整斜度，使斜面长度不超过试管总长的一半。24-48h，无菌生长时可以使用，或放置1高氏1号培育基是用于分别和培育放线菌的合成培育基。其配方如下:1.配20g、KNO1g、NaCl0.5g、KHPO?3HO0.5g、KSO?7HO0.5g、3242242FeSO?7HO1g15—20g1000mL、pH7.4—7.6422.用少量冷水其完全溶FeSO?7HO421gFeSO?7HO，0.01g/mL421mL充水分到所3.pH(三)马丁氏培育基的配制马丁氏培育基是用于分别真菌的选择培育基。0.5g5g10g15—20g24421000mLpH。的水中。1,的水溶液，在3.3mL，混匀后，参加琼脂加热溶化，方法同牛肉膏蛋白胨培育基配制。分装、包扎、灭菌及无菌检查同牛肉膏蛋自胨培育基配制。45?左右时才能参加。可先将链霉素配成1,的溶液(配好的链霉素溶液保存于1,0.3mL，使每毫升培育基中含链霉30μg。(四)高压蒸汽灭菌法高压蒸汽灭菌法适用于培育基、无菌水、工作服等物品的灭菌。1.2.装料:将装料桶放回锅内，装入待灭菌的物品。装有培育基的容器放置时要防止液体溢出，瓶塞不要紧贴桶壁，以免冷凝水沾湿棉塞。锅盖，对齐螺口，然后以同时旋紧相对的两个螺栓的方式拧紧全部螺栓，并翻开排气阀。排出的气流很强并有嘘声时，说明锅内空气已排净(沸后约5min)。121?，20min灭菌。阀，放净余下的蒸汽后，再翻