PCR技术验收中存在的缺陷课件

PCR技术验收

中发现的缺陷

上海市临床检验质量控制中心陈慧英PCR技术验收

中发现的缺陷上海市临床检验质量1质量手册的编制编制的注意点：应避免前后文件的内容重复页码不要连续，便于以后修改实用、具有有操作性质量手册的编制编制的注意点：2质量手册的编制基本内容：目录质量方针管理程序文件工作程序文件质量手册的编制基本内容：3质量手册的编制操作规程记录表分册建立的档案样本（人员技术档案、主要仪器设备档案）质量手册的编制操作规程4质量手册的编制质量手册要更新，文件的内容要与实际操作相符，应现行有效。（如有些试剂是单人单管不用UNG系统，可在SOP中却写用UNG系统）质量手册的编制质量手册要更新，文件的内容要与实际操作相符，应5管理程序文件实验室内务管理程序实验室人员配置及培训程序实验室质量控制管理程序仪器设备管理程序管理程序文件实验室内务管理程序6管理程序文件临床标本的管理程序实验室生物防护与安全管理程序（职业防护：参照艾滋病防护）实验室文件、记录的管理程序管理程序文件临床标本的管理程序7工作程序文件各区工作程序仪器设备校准程序：（需注意点）1.

温、湿度计应有校准报告和校准状态标识。2.

移液器校准应校准常用的点。3.扩增仪的校准：升降速率、光路、发射波长、本底荧光。

工作程序文件各区工作程序8工作程序文件校准报告：仪器设备的编号与校准报告的编号是否一致、校准结果是否合格。应有校准的原始记录。

工作程序文件校准报告：仪器设备的编号与校准报告的编号是否一致9工作程序文件实验耗材购买、验收、储放程序实验室清洁消毒程序（可操作性）实验室废弃物处理程序工作程序文件实验耗材购买、验收、储放程序10工作程序文件文件修改程序实验室检测结果报告程序检验过程中发生故障时的应急处理程序抱怨处理程序工作程序文件文件修改程序11操作规程主要仪器使用、维护、校准操作规程a)移动紫外线消毒车b)恒温金属浴（水浴锅）C)移液器d)离心机操作规程主要仪器使用、维护、校准操作规程12操作规程e)生物安全柜生物安全柜的使用：物品的放置应遵循左净右脏的原则，要累计使用时间，按产品说明书规定的时间更换过滤网。锐器物的放置应有安全的器皿。操作规程e)生物安全柜13操作规程f)扩增仪

扩增仪要经常清洁维护，否则会使本底增高。每周一次或二次检测的，每次使用后都要维护。操作规程f)扩增仪14操作规程标本唯一标识编号操作规程临床标本保存操作规程试剂质检操作规程操作规程标本唯一标识编号操作规程15操作规程临床标本采集、验收拒收操作规程

样品验收标准中应有单管专用。采样后不能在一周内检测的应放-70℃保存，-20℃保存DNA链较易断裂，一周内检测的宜放4℃保存。采用体液和分泌物检测的项目，样品在验收时应增加样品的镜检，有否上皮细胞。操作规程临床标本采集、验收拒收操作规程16操作规程拟开展检测项目的操作规程a)乙肝病毒－DNAb)丙肝病毒－RNAc)结核杆菌－DNAd)沙眼衣原体－DNAe)人乳头瘤病毒－DNAf)其它项目操作规程拟开展检测项目的操作规程17操作规程实验结果有效性判断操作规程室内质量控制操作规程室间质量评价操作规程操作规程实验结果有效性判断操作规程18记录表冰箱温度记录表环境温度记录表主要仪器使用、维护记录表a)移动紫外线消毒车b)恒温金属浴（水浴锅）c)移液器记录表冰箱温度记录表19记录表主要仪器校准记录a)冰箱温度计b)温湿度计c)移液器（计量所或厂家校准均可）d)扩增仪e)恒温金属浴(可用校准了的温度计校准)记录表主要仪器校准记录20记录表标本验收记录表标本拒收记录表标本保存记录表试剂质检记录表记录表标本验收记录表21记录表试剂使用记录表室内质控记录表室内质控失控报告单实验室清洁消毒记录表记录表试剂使用记录表22记录表废弃物处理记录表应急处理记录表抱怨登记表检测流程记录表（原始的实验记录）记录表废弃物处理记录表23实验室设置和环境1.

各工作区的明确标记和工作程序

（放各区入口的醒目位置）人员进出程序（科研人员）2.实验室生物安全防护

（个人防护用品、废物缸、垃圾筒）实验室设置和环境1.

各工作区的明确标记和工作程序24实验室设置和环境1）应养成随手关门的习惯；2）加阳模和加样品的加样器最好分开固定专用；3）紫外线消毒扩增子的污染是先集聚DNA分子，再击碎DNA破坏其结构，消毒时间至少4小时。实验室设置和环境1）应养成随手关门的习惯；25实验室设置和环境扩增仪、离心机、金属恒温浴应打开盖子，用紫外线照射。2，3区应备核酸的消毒液（1当量的盐酸），当爆管时使用。实验室设置和环境扩增仪、离心机、金属恒温浴应打开盖子，用紫外26人员

1.

人员资质（上岗证、检测、复核）2.

分册建立实验室人员的技术档案基本信息、主要经历培训记录、发表论文证书（毕业、资质、上岗）人员27

设备管理1.

仪器设备的标识、校准状态红色：停用绿色：正常黄色：降级使用校准标识：本次校准日期、下次校准日期、校准单位设备管理1.

仪器设备的标识、校准状态28设备管理2.分册建立仪器设备档案

基本信息、说明书、校准报告和原始结果、使用维护保养维修记录设备管理2.分册建立仪器设备档案29

设备管理3.

仪器校准周期与内容按照说明书上的出厂检验指标如扩增仪的吸收、发射荧光的波长、荧光本底、温度升降的速率4.

仪器设备使用的操作规程（SOP）现行有效，便于检测人员使用设备管理3.

仪器校准周期与内容30

检测方法1.

检测的操作规程（SOP）现行有效，便于检测人员使用2.试剂的验收、质检程序和记录新旧试剂的比对：空白、阴性对照、弱阳性标本、高值标本使用大包装试剂的应有试剂配置表检测方法1.

检测的操作规程（SOP）31检测方法3.消耗品的验收、质检程序和记录

爆管试验（高温、高速离心）抑制物试验（低、中浓度阳性标本）高压灭菌后的消耗品应有有效期的标识检测方法3.消耗品的验收、质检程序和记录321.

标本的唯一编号（可操作性）2.标本的验收验收地点最好远离检测区域验收标准应按各项目对标本的要求而定标本状态的描述

标本管理1.

标本的唯一编号（可操作性）标本管33标本管理保存

保存时间应根据报告单上对病人的承诺2.冰箱的温度记录

每天记录，记录表上应有允许温度波动的范围标本管理保存34记录和报告1.

检测过程的记录2.

报告单：

标本编号与检测原始记录一致标本接收时间的记录应显示至分标本种类和状态的描述检测方法记录和报告1.

检测过程的记录35

质量控制

室内质控的SOP：制定质控规则应具有可操作性应尽可能多的罗列失控现象和导致这些失控现象发生的可能原因，并制定相应的纠正措施质量控制

室内质控的S