第二章生物安全防护

生物安全概要姚振江流行病与卫生统计学系广东药学院1以前的实验室...现在的实验室对个人防护有了新的要求...2生物安全概要简介实验室内感染生物危害分类感染/生物危害控制溢出响应生物医学废弃物处理总结3什么是生物安全?从业人员处理生物危害材料时的措施，以避免感染自己、他人或环境达到此目的主要通过：工程学控制行政管理控制操作与规程个体防护设备4什么是生物危害?例如：病毒、细菌、真菌和寄生虫以及他们的毒素血液和体液,还有人和动物的组织变异的细胞系和一些特定类型的核酸

是由生物或者此种生物产生的物质引起的对人、动物或环境具有潜在威胁5为什么我们关注生物危害物质？可能获得实验室感染(LAI)环境污染造成研究的污染公众知晓6实验室感染传播途径易感宿主感染源经皮接种吸入气溶胶粘膜接触食入培养物和储存物研究的动物标本免疫系统免疫状况年龄7只有20%可查到原因80%是由人为的错误造成的20%是由于设备故障造成的排在前4位的导致感染的事故溢出或溅出注射器及针尖锐的物体，碎玻璃动物或体外寄生虫的抓伤或咬伤实验室感染8实验室感染谁什么哪里何时如何研究者SARS台湾2003年12月微生物学家西尼罗病毒美国2002年8月划伤实验室工作人员流脑美国2000年气溶胶?实验室工作人员牛痘病毒欧洲2002年接触91979－1999年间实验室相关感染（LAI）的统计实验室感染10暴露的风险有关的病原体体液的类型暴露的途径暴露的持续时间暴露过程中的血液量此次暴露病毒的浓度个人保护设备使用11如果发生了暴露或可能发生了暴露开始急救通知你的管理者或指定的人向医院的急诊部门或大学的卫生服务部门报告向职业卫生、伤残和死亡办公室报告（电话或网络）12全面预防预防血传病原体传播的最简单的行之有效的方法包括: 教育洗手穿防护设备使用安全的工作规程

如果不能保证样品的非感染性，按照感染性样品处理Ifsamplescannotbeguaranteednon-infective……treatasinfectious!13生物危害的分类常见病原体非传统的病原体重组DNA组织培养动物工作解剖的标本14BSL4BSL3BSL2BSL1__水平按箭头方向由低到高

微生物对人、动物、植物和/或环境的危险性程序和设备需求

围堵策略水平需求

对人员、环境和社区的保护程度生物危害的等级15危险分组个体危险公众危险遏制例子1LowLowLevel1大肠杆菌细杆菌2ModerateLimitedLevel2大肠杆菌0157:H7,链球菌、沙门氏菌、腺病毒、肝炎病毒A、B、C，流感，麻疹。3HighLowLevel3炭疽杆菌，结核分支杆菌，汉坦病毒，HIV，黄热病度4HighHighLevel4拉沙病毒,埃博拉病毒,马尔堡病毒UnlikelytocausediseaseinhealthyworkersoranimalsRarelycauseserioushumanoranimaldiseaseMaycauseseriousdiseaseLikelytocauseveryseriousdisease常见病原体的等级16不常见的病原体传播性的海绵体脑病阮病毒疾病；致死性神经变性情况庫賈氏病,新型克雅氏病,疯牛病,绵羊瘙痒病，慢性消耗性疾病。对通常的灭活病毒的破坏方法产生抗性与危害处理办公室接触以评估其需求（防护、程序、废弃物的处理）17重组DNA危险级别依赖于DNA的来源、载体及宿主

生物安全委员会将帮助研究者作出这方面的判断遗传工程=在体外将遗传物质从一个细胞参入到另一个细胞18组织培养一般可能含有致病微生物的潜在风险Level2人和灵长类的含有支原体的细胞系当使用新的细胞系时要进行详细的评估其他Level119动物工作动物可储存感染性的微生物（自然的或引进的）等级基于所从事工作的类型对所有从事动物工作的人员都需要进行专门的动物照料培训所有的工作包括动物的使用必须得到动物委员会的许可20解剖的标本所有的标本都应考虑其可能存在的感染性微生物考虑标本的类型尤为重要血液,器官,组织脊髓,脑组织来自于感染的病人一般而言，生物2级仅仅依据于其工作的特性21感染/生物危害控制工程控制管理控制实践与操作个人防护设备22工程控制在技术层面上,通过改变危害的来源以减少或根除危害的暴露防护:一道vs二道防护水平23第一道防护（一级屏障）确保工作人员和直接环境免受感染性微生物的暴露‘保护性的外壳’封闭感染性的微生物或动物培养皿,玻璃罐,瓶塞等生物安全柜，手套箱和动物笼等装备

控制的效果取决于防护的完整性24第二道防护（二级屏障）保护实验室外的环境免遭暴露包括实验室设计和规章制度25生物安全防护水平防护水平与危险水平相似生物安全委员会将对研究提案进行评估以确保防护水平恰当。一级二级三级四级26一级水平

最基本的实验室不需要特别的设计特性不需要生物安全柜可在开放的实验台上进行工作27二级水平

具有生物危害2级的临床、诊断、研究和教学部门如果具有气溶胶或溅出的潜在风险，需要一级或二级生物安全柜必须制定处理溢出的应急方案使用权应加以控制28专门的设计和建造一级屏障保护个体二级屏障保护环境所有工作人员必须进行专门的培训：病原微生物的使用，个人防护设备，设备、废弃物处理，还有实践与操作三级水平

安全柜：Ⅲ型(全密封型)29四级水平在一个国家一般只有一个设计规范异常的严格，工作人员完全与感染性材料隔离303132生物安全柜对生物病原物理防护的有效方法，尤其当产生气溶胶时。高效分子空气过滤器能以99.97%的效率去除颗粒（最小0.3微米）有三个主要级别的安全柜（I,II,III）能提供不同水平的保护。33在生物安全柜内安全操作使用前:确保生物安全柜经过检验关闭紫外灯，打开荧光灯用适宜的消毒剂消毒工作台面将最基本的条目放入安全柜在工作之前，让排风机运转5-10分钟34使用中:确保材料和器材放置在接近安全柜内的后部，尤其是产生气溶胶的设备，不要阻挡通风口。使用技术减少飞溅和气溶胶的产生。总的工作流程应该是从清洁区域到污染区域。减少运动以免阻碍气流在生物安全柜内打开火焰存在着争议。在生物安全柜内安全操作35使用后:保持排风机工作至少5分钟以清洁安全柜移走和消毒用过的器材和材料消毒安全柜台面关闭排风机和荧光灯，打开紫外灯。在生物安全柜内安全操作36保养:2次/天--擦拭工作台面1次/周–擦拭紫外灯1次/月–擦拭所有的垂直面1次/年–紫外灯强度验证

--用甲醛气体去除沾染

(ORM)--认证(ORM)在生物安全柜内安全操作37行政管理控制危险评估医学监测培训/教育资源检查符号&标志根据程序、信息和方法将暴露危险降至最低38风险评估确定防护的种类,方法和所需的安全设备使用者的职责,

能从ORM得到的帮助考虑的方面有:实验设计,方法,个人的经验和知识情况等http://www.hc-sc.gc.ca/pphb-dgspsp/ols-bsl/lbg-ldmbl/pdf/lbg-3e-draft.pdf

*行政管理控制39医学监测

用医学方法监测环境污染对人类健康的影响，观察人群健康水平和人体对环境污染的生物学效应。培训&教育实验室专门的政策和规程生物安全培训行政管理控制40检查日常的自查生物安全检查清单此外,

检查实验室以确保其按照规程或

指导方针工作并提供反馈意见行政管理控制41标记&标签生物危害标记必须粘贴在使用生物危害材料的实验室的门上生物危害标签应贴在使用生物病原的容器、设备和储存装置上行政管理控制42实践和规程总的安全指导方针好的微生物学实践洗手专门的规程离心机注射器、针头和其他的尖锐物移液管混匀器、研磨器、超声破碎仪、冷冻真空干燥器接种环冷冻切片机43一般实验室安全指导方针基本的常识,你必须了解你所面对的实验室的危险，并且经过正确的培训以便处理这些危险。最基本的是知道所有的实验危险举出5个例子?biosafety使用移液管和移液器使用接种环分离血清打开安瓶使用离心机44良好的微生物实践(GMP)基本的使用标准适用于所有的微生物学实验工作目的预防实验室人员和环境被污染预防实验或样本被污染无菌操作、减少气溶胶产生、控制污染、个人防护、应急反应。45洗手预防感染的单纯有效的方法之一如果经常正确的执行何时洗手？

开始任何操作之前离开实验室之前当手有明显的污物时在安全柜内完成任何实验之前和之后每次脱掉手套时在触及脸和嘴之前下班时Level1lab-anonantisepticsoapcanbeused

Level2lab-requiresantiseptichandwashingsolutions46安全使用离心机使用前裂纹？过满？平衡？盖子或塞子安置正确？转速能达到？使用可封闭的转子

使用后离心完全停止？溢出或渗漏？使气溶胶沉降（30分钟）or在生物安全柜内打开47注射剂及针尽可能避免使用在生物安全柜内完成感染性材料的操作使用注射器时小心抽吸保护从塞子退出的针不要弄弯、切断或翻新针处理所有使用过的针和注射器，将其放入黄色的尖锐物体盛放器内48移液管禁用嘴吸移液管所有的生物危害材料的移液管都应在生物安全柜内使用。不要使液体溢出，使用移液管装置。避免飞溅，沿管壁将液体慢慢注入试管或瓶内不要用抽-吸混匀溶液。可再度使用的移液管应水平放置在已消毒的浅盘上49混匀器、研磨器、超声破碎器和冷冻干燥器尽可能地在BSC内操作，再打开前静置5分钟以使气溶胶沉降。安全地混匀不要用玻璃混匀罐使用后立即清除污染冷冻真空干燥器使用玻璃制造的真空部件时，