小柴胡汤治疗lps诱导发热的实验研究

小柴胡汤治疗lps诱导发热的实验研究

小柴胡汤是伤寒的一部分。它由柴胡、黄甘草、半夏、生姜和枣七味药物组成。本方为治疗伤寒少阳证的基础方,又是和解少阳的代表方剂。以和解少阳、扶正祛邪、和胃降逆为其主治。近年人们对该方进行了大量的药效学实验研究,为指导临床拓展运用及传统古方开发奠定了基础。1小柴胡汤对lps致病性大鼠体温的影响小柴胡汤具有较好的解热作用。钱妍制备SD大鼠LPS诱导发热模型,用小柴胡汤灌胃治疗,并以板蓝根煎剂进行对照,显示小柴胡汤和板蓝根冲剂均能抑制LPS所致大鼠体温的升高,与对照组比较在不同时间点差异有统计学意义(P<0.05),小柴胡汤组降温效果略优于板蓝根组,但中药组间差异无统计学意义(P>0.05)。孙明瑜等实验显示,小柴胡汤分煎合液与合煎液组在SD大鼠注射LPS后多个观察点的体温均较模型组明显降低(P<0.05,P<0.01),合煎液与分煎合液均有显著的解热作用。2直径、最低抑菌浓度mic的抑菌浓度小柴胡汤体外试验对多种细菌具有抑制作用。袁长津等用琼脂扩散法、试管稀释法测定显示,小柴胡汤对乙型溶血性链球菌、嗜血流感杆菌、金黄色葡萄球菌、绿脓假单胞菌、大肠埃希菌的抑菌环直径依次为(12.05±0.23)mm、(14.25±0.23)mm、(13.20±0.31)mm、(10.20±0.35)mm、(12.01±0.46)mm,最低抑菌浓度(MIC)依次为200.00mg/mL、100.00mg/mL、100.00mg/mL、100.00mg/mL、250.00mg/mL、200.00mg/mL。顾本清等用体外抑菌试验和尿道致病性大肠杆菌尿道上皮细胞黏附实验证明,小柴胡汤对大肠杆菌的增殖及尿道致病性大肠杆菌对尿道上皮的黏附效应均有抑制作用。3对大鼠肺膜炎模型的影响小柴胡汤具有激素样及非激素样抗炎作用。钱妍制备小鼠肺炎链球菌感染模型,用小柴胡汤治疗并同板蓝根煎剂对照,发现小柴胡汤可明显降低肺炎链球菌感染模型动物死亡的发生率(93.3%~26.7%,P<0.05)。白晶等用小柴胡汤及其药物配伍观察其对大鼠胸膜炎模型的影响,显示小柴胡汤及其药群配伍各组大鼠胸腔渗出液体积、渗出液中白细胞数量、髓过氧化物酶(MPO)以及血清IL-8、NO含量均显著降低(P<0.01),胸腔渗出液溶菌酶(LZM)含量显著升高(P<0.01)。表明小柴胡汤及其药群配伍均具有显著的抗炎作用,对胸膜炎有一定的防治功能。4抗感染药物4.1小柴胡汤对vb3基因表达的影响小柴胡汤具有抗柯萨奇病毒感染和保护心肌细胞的作用。蒋丽敏等用体外培养的新生大鼠心肌细胞感染柯萨奇病毒B3(CVB3)作为病毒性心肌炎模型,实验显示CVB3感染心肌细胞48h,琥珀酸脱氢酶(SDH)活性明显下降,经小柴胡汤治疗后,SDH活性接近正常水平。王雪峰等用柯萨奇病毒B3亲心肌株(CVB3m)腹腔注射诱导Balb/c乳鼠心肌炎模型,以小柴胡汤灌胃治疗后显示,小柴胡汤在急性期均能明显提高NK细胞活性、调节T细胞亚群功能,与对照组比较有显著性差异(P<0.05)。通过比较小柴胡汤作用细胞与病毒的不同环节,提示小柴胡汤具有保护细胞减轻病毒感染功能及直接杀伤CVB3m的作用。4.2小柴胡汤制剂组小柴胡汤有一定的抗鸭乙型肝炎病毒的作用。刘中景等通过体内抗鸭乙型肝炎病毒(DHBV)的实验研究显示,小柴胡汤水煎浓缩剂全方不同剂量对DHBV的复制均有一定的抑制作用,而以20倍剂量组的抑制作用为最佳;小柴胡汤不同药味对DHBV均有一定的抑制作用,而全方组作用较半方组及单味柴胡组为优,其抑制作用弱于西药无环鸟苷,但较为持久,停药后无反跳。陈压西等以重庆麻鸭乙型肝炎动物模型实验显示,用小胡柴汤胶囊治疗1个月及大剂量(1000mg/(kg·d))小柴胡汤胶囊治疗2周都能使血清乙型肝炎病毒(DHBV-DNA)滴度总体水平降低(P<0.05)或极显著降低(P<0.01)。表明该药抗病毒作用与剂量大小、用药时间长短有关。5小柴胡汤对大鼠肝纤维化中timp-1mrna小柴胡汤具有明显的抗氧化能力和免疫调节作用,因而对肝损伤可起到一定的保护作用,能减轻肝纤维化程度,调节改善肝脏功能。刘应柯等实验表明,给大鼠顺铂或阿霉素,皆可导致肝肾功能与结构损害,超氧化物歧化酶(SOD)及谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-px)活性及GSH含量下降,丙二醛(MDA)含量升高,应用加味小柴胡汤则可明显减轻肝肾功能及组织损害,升高T-AOC、SOD、GSH-PX活性及GSH含量,降低MDA含量。河福金等通过给大鼠灌胃白酒、橄榄油、吡唑的方法建立动物模型,实验显示小柴胡汤能促进肝内糖、蛋白质的合成,增强肝细胞对有害因子的抵抗能力,能很好地保护肝细胞膜系统,提高其稳定性,因而对酒精性肝损伤具有良好的防护作用。吴丽花等研究发现,小柴胡汤胶囊剂对四氯化碳(CCl4)及D-GalN所致大鼠的肝损伤有一定保护作用。温志坚等研究结果表明,小柴胡汤提取物能明显降低D-GalN、CCl4、CCl4复合物等3种因素所导致的肝损伤大鼠的ALT、AST水平,并具有明显的抗肝纤维化作用。张琪等采用四氯化碳、花生油制备大鼠肝纤维化模型,并用不同剂量的小柴胡汤进行干预。结果显示,小柴胡汤通过在肝纤维化早期下调TIMP-1mRNA的表达而减轻大鼠肝纤维化的程度。帅峰通过半定量逆转录聚合酶链反应法(RT-PCR),观察小柴胡汤对大鼠肝纤维化的影响,显示小柴胡汤能使纤维化大鼠肝细胞变性坏死明显减轻,结缔组织明显减少,假小叶形成减少,小柴胡汤治疗组的TIMP-1mRNA比模型组显著降低(P<0.01)。表明小柴胡汤可通过抑制TIMP-lmRNA的表达而发挥抗肝纤维化作用。6两组患者治疗前后纤维化程度和脏器破环程度比较小柴胡汤对胰腺功能有调节作用,可用于慢性胰腺炎的治疗。朱颖等以三硝基苯磺酸(TNBS)诱发慢性胰腺炎模型大鼠,喂食小柴胡汤后显示,治疗组胰腺纤维化程度和腺体破环程度均显著低于非治疗组(P<0.001),治疗时间越长,作用越明显;同时胰腺组织内SOD、GSH-px活性显著高于非治疗组,MDA含量显著低于非治疗组,α-平滑肌肌动蛋白(SMA)、结蛋白(desmin)、胶原(Col)Ⅰ、ColⅢ、转化生长因子-β1(TGF-β1)和纤维连接蛋白(FN)的表达亦较非治疗组有不同程度的减少。表明早期应用小柴胡汤可在一定程度上抑制胰腺纤维化的进展,4周后疗效显著。7il-6活性成分小柴胡汤对局部免疫反应引起的肺炎有调节作用。同心报道日本OhtakeN等在探讨小柴胡汤对肺局部免疫反应调节作用时发现,经口给予小柴胡汤对BALB/c小鼠肺内TNF-α和IL-1β浓度无影响,但可使IL-6浓度增加。对小柴胡汤的活性组分进行研究结果显示,该方中很多成分都与IL-6诱导活性有关。体外试验显示,其主要成分之一甘草、黄芩的代谢产物甘草素对受抗CD3单克隆抗体刺激的肺单核细胞中IL-6的产生有细胞种类特异性和浓度依赖性促进作用。研究还显示,小柴胡汤对LPS诱导的肺损害的迟发型变态反应有抑制作用。清风报道,小柴胡汤中所含酚类化合物,尤其是黄芩黄素和medicarpin具有直接诱导人肺纤维细胞和免疫细胞凋亡的作用,因而对治疗间质性肺炎有效。8小鼠小鼠胃平滑电快波频率小柴胡汤组与水解压的比较见表1小柴胡汤对胃肠动力有促进作用。石拓通过对大、小鼠促胃肠动力作用实验显示,小鼠胃内色素残留量小柴胡汤组与莫沙比利组比较无显著性差异(P>0.05),与生理盐水组比较有显著性差异(P<0.05);小鼠小肠色素推进率小柴胡汤组与莫沙比利组比较无显著性差异(P>0.05),而与生理盐水组比较有显著性差异(P<0.05);大鼠胃平滑肌电快波频率小柴胡汤组与生理盐水组比较有显著性差异(P<0.05)。其机制可能与小柴胡汤通过升高胃平滑肌电快波的峰电位和频率、促进血和十二指肠组织中胃动素的释放和分泌而达到的。史青报道,用小柴胡汤提取物颗粒对雄性SD大鼠进行胃排空率(GER)和胃袢实验,显示小柴胡汤可显著升高胃内pH值,但不影响甲苯磺丁脲胃内溶解与吸收。9小柴胡汤对免疫抑制小鼠的作用小柴胡汤具有增强免疫系统功能的作用。张磊等实验显示,小柴胡汤提取物可增强小鼠特异性体液免疫功能,促进B淋巴细胞增殖。周锡顺等实验显示,灌服小柴胡汤的小鼠在4、8、16h腹腔巨噬细胞吞噬率和吞噬指数均有不同程度的提高,以16h组提高最为显著(P<0.01)。表明小柴胡汤有提高体内单核-吞噬细胞系统的吞噬功能。山辅昌由等研究认为,小柴胡汤短时间内可使末梢血单核细胞活性增加,产生L-1β,其结果激活淋巴细胞,诱导产生L-6和GM-CSF,从而发挥免疫作用。王金华等以伯氏疟原虫感染小鼠为模型,实验显示小柴胡汤或小柴胡汤与青蒿素合并用药均可显著提高疟疾小鼠的体液免疫、非特异性免疫、红细胞免疫的能力。孙艳等实验显示,小柴胡汤对荷瘤鼠化疗所引起的免疫功能低下有明显的恢复作用,明显促进化疗荷瘤鼠自然杀伤细胞(NK)活性和IL-2的产生能力。唐小云等研究发现,灌服小柴胡汤的免疫抑制小鼠的TNF-α、IL-2、IFN-γ、IL-4、IL-10各项免疫指标均明显提高,几乎与正常组小鼠的水平相当(P>0.05),与免疫抑制小鼠相比较差异显著(P<0.01)。尤其是TH1型细胞因子(IL-2和IFN-γ)浓度升高明显。表明小柴胡汤具有生物反应调节剂的作用,可明显增强免疫抑制小鼠的免疫功能。10对s180细胞的生长和形态的影响小柴胡汤具有良好的抑瘤作用。杨惠玲等采用透射电镜观察小柴胡汤对瘤细胞生长和结构的影响,显示小柴胡汤以高、中和低浓度(1000g/L、500g/L、250g/L)溶液治疗后,对荷瘤鼠S180细胞均有明显抑制作用,抑瘤率40.19%~58.73%,其中以高浓度组疗效最佳。同时可见治疗后各组S180细胞均出现凋亡的特征,其中以低浓度组为甚,而高浓度组S180细胞则以坏死为主。张丰华等用小柴胡汤大、中、小剂量(0.9g/mL、0.45g/mL、0.225g/mL)观察对S180荷瘤小鼠肿瘤血管生成的影响,显示小柴胡汤中、小剂量有明显抑瘤作用(P<0.05),且在量效关系上呈负相关,在抑制肿瘤血管生成中以小剂量为好(P<0.05);与模型组比较,小柴胡汤3个剂量组对S180荷瘤小鼠肿瘤组织VEGF都具有明显的疗效,且在量效关系上呈负相关趋势,但各治疗组间比较,则以小柴胡汤小剂量组效果最好。李江等实验表明,小柴胡汤水提组、梯度乙醇组及醇水组对H22小鼠肝癌实体瘤均有明显抑制作用,抑瘤率分别为32.35%、43.97%和25.77%(P<0.01,P<0.05)。梁靓靓等以Lewis肺癌模型小鼠实验发现,小柴胡汤对肿瘤细胞的生长有抑制作用,瘤重均明显低于模型组,差异显著(P<0.01);与模型组比较,小柴胡汤组可见瘤细胞体积缩小,异型细胞较少,细胞核致密,染色质浓缩边集,肿瘤细胞核分裂数明显减少。陶祥等研究认为,小柴胡汤高、中、低3种不同浓度(1、0.5、0.25g/mL)用药后可能通过刺激免疫器官,提高免疫功能和增加体重而达到抑瘤作用。11小柴胡汤对大鼠精子缺陷的调节小柴胡汤还有明显的抗过氧化作用,因而可用于肝癌化疗药物诱致的脂质过氧化反应;以蛔虫抽出液为抗原,小柴胡汤对肥大细胞中组胺的游离有明显的抑制和抗过敏作用;小柴胡汤还可通过下调异位内膜环氧合酶-2(COX-2)的表达,减少前列腺素的产生,或通过上调Fas蛋白的表达,促进异位内膜细胞的凋亡而抑制大鼠子宫内膜异位症的生长;小柴胡汤可使MDRmRNA转录量增加,从而使与药物吸收密切相关的MDR1的转运活性增强;以0.4mg/kg敌敌畏饲喂青紫蓝兔,1.65g/kg小柴胡汤对其损害有拮抗作用。长期毒性试验(2256、1128、100mg/kg灌胃给药180d)显示,小柴胡汤对大鼠生长发育,血液学常规,血液生化指标均无影响,主要脏器病理形态未出现毒性病变,表明应用小柴胡汤对人体没有明显的毒副作用。12柯