中华大蟾脲对三唑磷、多效唑的急性毒性试验

中华大蟾脲对三唑磷、多效唑的急性毒性试验

三醇磷的络合物为c12h16n3o3ps。建模名称为o，o-二丁基-o-（1-硝基-1、2-4-三羧基）-3-硫代磷酸酯，具有光谱杀螨作用。多效唑(Paclovutrazol或Mulitple-effecttriazole)属于含氮杂环化合物中的三唑类化合物。分子式为C15H20CIN3O,化学名称(2RS,3RS)-1-(4-氯苯基)-4,4-二甲基-2-(1H-1,2,4-三唑-1-基)-3-戊醇,它不仅具有高效的植物生长调节作用和广谱性杀菌效应,而且能够增加植物对温度,水份和空气污染等环境因子的抗逆能力,由于多效唑降解慢、易残留,也可能与三唑磷形成复合损害。这些药物可通过多种途径污染水体,从而对水生生物产生危害。蛙类是害虫的天敌,也是整个生物链的一个重要环节,其幼体蝌蚪生活在浅的水蛙、水稻田和水塘边,这些生活场所大都靠近或者处于农药施用范围内,农药在施用过程中会通过多种途径进入这些水体,从而直接对蝌蚪产生毒性影响。本文采用中华蟾蜍蝌蚪为试验对象,测试了不同浓度的三唑磷、多效唑及其混合液对其急性毒性作用,通过多效唑、三唑磷以及它们混合物的毒性比较试验,找出它们对中华大蟾蜍蝌蚪的一个相对安全的浓度;从环境保护的角度出发,可以指导农田科学用药。1材料和方法1.1保湿性助剂与整理剂三唑磷为浙江省仙居农药厂生产的20%三唑磷乳油,生产批号为20030224201,试验液的浓度按乳油中三唑磷的量计算;多效唑为山东省植物保护站服务部生产的15%可湿性粉剂,生产批号HNP37096-E0037。中华大蟾蜍蝌蚪,捕捞于南昌大学校园旁的浅水塘中,选用体长为(3.01±0.18)cm,体重为(0.228±0.029)g的蝌蚪。试验时间在2004年3~5月;试验用水采用南昌大学校园内的池塘水,用双层纱布过滤,pH值为6.89~7.14,溶解氧5.45mg/L。蒸馏水配母液。室温:预试验时为10.5℃,正式试验时为(19±0.5)℃。1.2新鲜试液的配制蝌蚪先室内放养3d,不投食。根据预试验设置7个试验组,浓度见表1和表2,再加一个空白对照组。每组用500mL的烧杯,盛液300mL,放蝌蚪10只。每24h配换新鲜试液。观察记录24、48、72和96h蝌蚪死亡数,及时清除死亡蝌蚪。1.3tivd因子公式三唑磷和多效唑的半致死量计算采用改良寇氏法。混合物短效应联合毒性,采用Marking相加指数法——AI(AditiveIndex)采用以下公式求S(混合毒性生物活性):S=Am/Ai+Bm/Bi式中,Ai、Bi单一毒物LC50值;Am和Bm为混合毒物的LC50值;S为混合毒性生物活性。将公式转换成相加指数:如果S≤1,那么AI=1/S;如果S≥1,那么AI=S(-1)+1。当AI=0时为相加作用;AI>0为协同作用;AI<0为拮抗作用。2试验结果2.1蝌蚪感染的症状蝌蚪在刚接触有毒溶液时表现得极其兴奋,剧烈的游动,在染毒后一段时间处于高浓度溶液中的蝌蚪出现中毒症状,多数蝌蚪呆滞,卧于底部不动,用玻棒触之,有的尾部剧烈颤抖,在原地游动,有的侧游,还有极少个体尾部出现弯曲。处于低浓度组的蝌蚪出现中毒的症状较轻,时间也较晚,主要表现为呆滞。而对照组的蝌蚪活动自如。死亡蝌蚪特征:表现为头部膨大,尾部缩小,弯曲,与身体成一角度。2.2多效唑毒性随暴露时间的延长毒性三唑磷的LC50在24h为5.15mg/L,48、72、96h均为5.09mg/L,可见药物对蝌蚪的毒性在24~48h内随着暴露时间延长毒性加大,48h以后其毒性不随暴露时间的延长毒性增大。多效唑的LC50在24、48、72h分别为60.12、38.46、34.32mg/L,其毒性随着暴露时间的延长毒性增大。由表1、2、3、4数据可知,多效唑的毒性远低于三唑磷。根据我国对农药毒性的分级标准,多效唑对于中华大蟾蜍蝌蚪属低毒农药,三唑磷属中毒农药。2.3唑磷和多效唑混合作用在24h内的协同作用将蝌蚪对三唑磷、多效唑及它们混合物24hLC50数据代入公式可以求出S=0.757,AI=1.32,AI>0,所以三唑磷和多效唑的混合作用在24h表现为协同作用。将蝌蚪对三唑磷、多效唑及它们混合物48hLC50数据代入公式可以求出S=0.818,AI=1.22,AI>0,所以三唑磷和多效唑的混合作用在48h仍为协同作用。3唑磷对蝌蚪的协同作用三唑磷对中华大蟾蜍蝌蚪为中等毒性,但毒性不会因暴露时间的延长而毒性加大。如果在同一田间短期内多次反复使用,则可能导致田间浓度过高,而危害到蟾蜍蝌蚪的生命。多效唑对中华大蟾蜍蝌蚪为低毒,但其毒性会随暴露时间的延长而毒性加大。考虑到多效唑易残留,其半衰期有0.5~1年,所以在同一块水田中再次使用多效唑时,毒性有可能累计增加,而给两栖类蝌蚪生命带来威胁。特别是如果在此期间同时施用三唑磷,则会造成对蝌蚪的混合毒性,因为三唑磷和多效唑的混合作用在24和48h时均为协同作用,所以在农业生产中要充分注意二者的正确施用。有资料显示有机磷农药三唑磷对鲈鱼(Latealabroxjaponicus)、梭鱼(Lizahaematocheila)、日本鳗鲡苗(Anguillajaponica)、大弹涂鱼(Boleophthalmuspectinitostris)的24、48及96h的急性半致死浓度分别为0.089、0.013、0.5~0.7、0.034mg/L;0.082、0.004、0.090、0.009mg/L;0.031、0.0029