碳酸氢铵对小鼠的ld50及可信性研究

碳酸氢铵对小鼠的ld50及可信性研究

碳酸氢铵（俗称臭粉）是食品行业中应用广泛的缓解剂。配方为ch5no3。碳酸氢铵在食品加工过程中,产生出氨和二氧化碳,可以使食物变得膨松。由于限制明矾的使用,所以在食品中常用碳酸氢铵来替代,实际使用时与碳酸氢钠合用,可作面包、饼干、煎饼等膨松剂的原料,亦用作发泡粉末果汁的原料;还可用于绿色蔬菜、竹笋等烫漂,以及医药及试剂;发酵粉亦以本品为主要成分,配以酸性物质;碳酸氢铵也可作为肥料。经研究它会对皮肤、眼和呼吸系统造成刺激。此外,在油炸和烘烤过程中形成的丙烯酰胺,经大量的试验动物研究证明它属于中等毒性物质,主要引起神经毒性,现没有证据证明人体在丙烯酰胺暴露量下与癌症发生率有直接关系。为了日常生活中安全使用碳酸氢铵,本试验进行急性毒性试验研究。1材料和方法1.1材料表面碳酸氢铵:天津市天力化学试剂有限公司,分析纯。试验动物:昆明种小鼠,体重20~25g。1.2方法1.2.1动物死亡情况观察找出0(Dn)和100%(Dm)估计致死剂量。取20只小鼠,按性别分类后,根据体重随机分为5组。禁食24h。配制系列浓度的碳酸氢铵,以各浓度的0.02mL·10g-1给每只小鼠一次性腹腔注射,连续观察7d,记录动物的死亡情况。根据观察结果,当出现4/4死亡时,如其前一组为3/4死亡,则取4/4组的剂量为Dm,如前一组为2/4或1/4死亡,考虑到4/4组的剂量在正式实验中可能的死亡率低于70%,为慎重起见,可将4/4组的剂量乘以2作为Dm;当出现0/4死亡时,如其后一组的死亡率为1/4,则取0/4组的剂量为Dn,如后一组死亡率大于1/4,考虑到0/4组的剂量在正式实验中可能的死亡率高于70%,则将0/4组的剂量除以2,作为Dn。采用此方法,确定碳酸氢铵的Dm、Dn分别为495mg·kg-1和369mg·kg-1。1.2.2试验1,碳酸氢铵剂量试验取体重20~25g左右的小鼠40只,按体重随机分成4组,每组10只,雌雄各半。剂量比值根据公式设为0.907,碳酸氢铵各组剂量分别为495mg·kg-1、449mg·kg-1、407mg·kg-1和369mg·kg-1。试验前禁食24h,正常给水。按0.2mL·10g-1腹腔注射一次性给药。1.3观察指标给药后,连续观察7d,详细记录不同浓度梯度下小鼠每天的死亡数和时间,及出现的异常现象。1.4ld50的标准误用、可信限及测量方法统计各组小鼠死亡数,计算死亡率(p),按孙氏改良寇氏公式[7~9],计算LD50值;lgLD50的标准误按(2)式计算;LD50的95%可信限按(3)式计算。其中:Xm为最大剂量的对数;i为相邻两组高剂量与低剂量之比的对数;p为各组死亡率(以小数表示);Σp为各组动物死亡率的总和。2结果与分析2.1小鼠死亡数及死亡时间对小鼠的影响给药后,小鼠暂时出现不进食,呼吸困难,烦躁不安等症状,小鼠死亡前剧烈抽搐、浑身发抖、在鼠笼中乱撞,直到死去,死后眼睛、尾巴均发黑,且尸体僵硬。存活小鼠10min后开始进食,以后均未出现行为异常。各组小鼠死亡数和死亡时间见表1,从表1可看出,给药后小鼠在3d内死亡,后4d小鼠未见死亡。雄性小鼠的死亡数多于雌性小鼠。2.2可信限碳酸氢铵半数致死量试验原始数据和计算资料见表2,按照表内数据和计算公式(1)、(2)和(3)得出:Sm=0.00648,X50=2.6671LD50的95%可信限为:452.2~478.40mg·kg-1。3碳酸氢铵的安全性LD50值是以动物死活的质反应为指标的毒性数据,此数值可作为衡量药物毒性或效应大小的常用指标。半数致死量与毒性成反比,致死量越大毒性越小,致死量越小毒性越大。已知碳酸氢铵对小鼠静脉注射的LD50值为245mg·kg-1,我们测得LD50小鼠经腹腔注射的为463.6mg·kg-1,因此碳酸氢铵具有毒性。碳酸氢铵分解全部是气体,无残渣,没潜在的污染性,实际碳酸氢铵的