种子活力测定综合性实验计划

综合性实验—《主要农作物种子活力测定》实验计划实验安排与分工表实验内容实验时间主要参加者备注幼苗评定试验5月19—24日低温发芽试验5月19—24日加速老化试验5月19—23日电导率测定5月20日四唑定量法测定5月22日实验具体内容实验一幼苗评定试验实验原理通过测定种子的发芽速度和幼苗生长势来判断种子活力，一般情况下活力高的种子发芽快且生长健壮，种子发芽后将种子分为发芽和未发芽两类，在将幼苗分成三级：一级健壮幼苗：胚芽健壮，深绿色，初生根健壮或初生根少但有大量次生根；为高活力种子。二级健壮幼苗：胚芽短或细长，初生根少或细弱；为低活力但具有发芽力的种子。三级不正常幼苗：根或芽残缺或根芽破裂，苗色褪绿。二、实验材料

种子材料：豌豆试剂：细沙水仪器：恒温培养箱发芽盒镊子操作步骤5月19日上午8:30，取4份试样，每份50粒，种子置于沙床中，深度3cm，于20℃、相对湿度95%—98%、光照12h、光照度12000xl的条件下培养6d，5月24日上午8:30取出幼苗进行评定。注意事项1、及时观察种子的发芽状况，适时补充水。2、取出幼苗鉴定时动作要轻缓，注意保留幼苗的根。实验二低温发芽试验实验原理棉花早春播种常遇低温，会引起胚根损伤，下胚轴生长速率降低，棉花发芽的最低温度一般为15℃，实验采用18℃低温模拟田间低温条件，高活力种子能抵抗低温条件而生长。最后，检查幼苗生长状况，苗高（根尖至子叶着生点的距离）达4cm以上的即为高活力种子。二、实验材料

种子材料：脱绒棉籽试剂：滤纸细沙仪器：发芽盒黑暗培养箱镊子三、操作步骤5月19日上午8:30，取脱绒棉籽4份，每份50粒，将棉籽均匀置于沙床中，深度3cm，于18℃黑暗条件下发芽6d，5月24日上午8:30检查幼苗生长状况，按照标准计数。四、注意事项及时观察种子的发芽状况，适时补充水。计数时不要弄断幼苗，测量长度时选好测量工具。实验三加速老化试验实验原理种子在高温（40~45℃）和高湿（约95%相对湿度）条件下能快速劣变，高活力种子能忍受逆境条件处理，劣变较慢，形成正常发芽的幼苗；而低活力种子劣变较快，长成较多不正常幼苗或者完全死亡。统计正常发芽的幼苗、不正常幼苗和死亡种子数即可判断种子活力高低。实验材料种子材料：小麦试剂：滤纸水仪器：恒温培养箱镊子操作步骤5月19日上午8:30，取小麦种子4份，每份50粒，将小麦种子均匀分布于纸床中，卷好后置于高温（40~45℃）和高湿（约95%相对湿度）培养箱中培养5—7d，分别于5月23日上午8:30和5月25日上午8:30统计正常发芽的幼苗、不正常幼苗和死亡种子数。注意事项注意加水的量，保证在发芽过程中水分量充足。统计幼苗数时，注意分清幼苗所属的类别。实验四电导率测定实验原理种子吸胀初期，细胞膜重建和修复能力影响电解质的渗出程度，高活力种子膜完整性修复速度快，能最大程度修复任何损伤，渗出物少，而低活力种子修复能力弱，渗出物多。所以高活力种子浸泡液的电导率低于低活力种子。电导率与田间成苗成负相关。二、实验材料种子材料：豌豆种子试剂：热水去离子水塑料薄膜仪器：80mm烧杯电导仪恒温水浴锅分析天平操作步骤5月20日上午8:30，取50粒种子称重（精确至2位小数），2个重复。取直径80mm左右的烧杯3个，用热水和去离子水洗净。将种子放入烧杯中，加入250ml去离子水，水温为20℃，另一烧杯内加去离子水作对照，烧杯须用薄膜盖盖好，以减少水分蒸发和被灰尘污染。将所有烧杯置于20℃恒温水浴锅中放置24小时，5月21日上午8:30在恒温水浴锅中用电导仪测定浸泡液和对照的电导率。将各重复样品的电导率减去对照电导率然后求平均，然后查看种子生物学教材174页表7—5确定种子活力大小。注意事项电导率受许多因素的影响，如种子大小及完整性、种子水分、浸泡的温度及时间、容器的大小、溶液体积等影响，所以应严格按操作步骤进行试验。测定最好使用去离子水，也可用蒸馏水代替，水温应为20℃。所有电导率都应在20℃条件下测定，因为微小的温度变化会电导率发生很大差异。实验五四唑定量法测定实验原理1、种子经TTC染色后，用丙酮或乙醇将红色的三苯基甲（TTCH）提取出来，然后用分光光度计测定提取液的光密度值，或从标准曲线上查出TTCH含量（ug/ml），以定量计算脱氢酶的活性，光密度值高或TTCH含量高表明种子活力强。实验材料种子材料：小麦种子试剂：Na2S2O4TTC溶液蒸馏水丙酮仪器：微量注射器（移液枪）分光光度计恒温水浴锅具塞试管3支三、操作步骤1、标准曲线制作取5ml容量瓶5个，加入极少量Na2S2O4，再用微量注射器分别加入0.1%TTC溶液25、50、75、100、150ul，并加水定容，摇匀，配置成5、10、15、20、30ug/ml的TTCH标准溶液，在分光光度计上于490nm处分别测定其光密度，并以光密度为横坐标，TTCH浓度为纵坐标绘制标准曲线。2、将待测种子浸泡至充分吸胀，除去种皮，剥出整粒种子，每个样品数可数取相同粒数，3次重复。将样品放进具塞试管中，加入10ml0.1%TTC溶液，于38℃左右的恒温水浴中黑暗下染色1-3小时，然后将样品全部倒入研钵，加少许石英砂及丙酮，充分研磨，将研磨液全部倒入容量瓶中，用丙酮冲洗研钵2-3次，并倒入容量瓶，定容并摇匀。然后用分光光度计