5种果蔬中有机磷农药的测定

5种果蔬中有机磷农药的测定

有机磷农药是20世纪40年代发展起来的一种农业杀虫剂。现在世界上有数百种有机磷农药,我国也有200多种,有机磷农药的使用量约占我国农药总使用量的70%,其中,又以甲胺磷、敌敌畏、对硫磷、氧化乐果等毒性较高的品种使用较多。有机磷农药在防治农作物虫害、确保农作物高产稳产、提高农畜产品的产量和质量方面起着重要的作用,是继有机氯农药后广泛使用于蔬菜、水果、谷类及茶叶等作物的一大类农药。这些农药的大量使用与滥用,容易造成农产品污染,发生中毒事件。因此,对农产品特别是新鲜水果、蔬菜实施农药残留检测,了解目前市场果蔬中农药残留的污染状况,从源头上保证果蔬的质量安全,对构建和谐社会、保障食品安全有重要意义。当前我国水果、蔬菜上农药残留检测技术主要是仪器法和生物法两大类。仪器法多采用传统液-液萃取和柱层析净化前处理技术,气相色谱单柱、单检测器定性定量,步骤烦琐,耗时长,一次处理检出农药品种少,难以满足市场对未知多残留品种检测需要。生物法包括酶联免疫法,简单快速,易操作,但检测的农药品种有限,难以准确定性定量。笔者使用仪器法,采用乙腈直接萃取的前处理技术,直接浓缩进样,利用双柱双检测器同时对7种有机磷农药在5种果蔬中的农药残留进行定性定量检测,以期为贵阳市农贸市场上果蔬中的农药残留快速检测提供参考。1材料和方法1.1材料表面1.1.1波斯坚果苹果、梨、草莓、甘蓝和番茄各2kg,购于贵阳市花溪区农贸市场。1.1.2标准品溶液的制备敌敌畏、甲拌磷、乐果、对氧磷、对硫磷、喹硫磷、伏杀硫磷7种标准品,购于环境保护部标准样品研究所,浓度均为10(g/mL,纯度均为99%,用重蒸丙酮稀释成适当浓度的标准储备液于-4℃冰箱保存。1.1.3试剂乙腈(分析纯),丙酮(分析纯,重蒸处理),氯化钠(分析纯,140℃烘烤4h)。1.1.4ql-901旋转轴器Agilent6890N气相色谱仪,配Agilent-7683自动进样器、FPD检测器,装DB-1和DB-17石英毛细管柱,美国Agilent公司;QL-901旋涡混合器,江苏海门市麒麟医用仪器厂;氮吹仪,上海安谱科学仪器有限公司;超声波清洗器,上海精密仪器仪表有限公司;离心试管(15mL)、具塞量筒(100mL)、烧杯和移液管等玻璃仪器。1.2方法1.2.1样品采集将从农贸市场购买的苹果、梨、草莓、甘蓝和番茄果蔬样品随机取500g,作添加回收率样品用水清洗后处理;实测样品直接处理。1.2.2样品处理1样品是在演示过程中制作的取500g样品在垫有牛皮纸的菜板上先切成小块,再在食品加工器中粗粉碎,备用。2高效组织粉碎法准确称取25.0g粉碎好的样品置于100mL烧杯,加50mL乙腈,转移到高速组织捣碎机中,高速匀浆2min,将匀浆好的样品过滤到100mL具塞量筒内,具塞量筒内放入5gNaCl,口上放有带滤纸的玻璃漏斗,收集滤液(约40mL)后盖上塞子,剧烈振荡1min,静置10min,使乙腈与水相分层。3氮气吹至近干准确吸取10mL上层的乙腈相溶液,放到100mL烧杯中,在80℃水浴上用氮气吹至近干。用2mL丙酮溶解样品溶液,完全转移至15mL离心管中,再用约3mL丙酮分2次洗烧杯并转移至离心管,最好准确定容至5.0mL,在旋涡混合器上混匀离心管中的溶液,分别倒入2个样品瓶中,待GC-FPD分析。1.2.3单次添加水平不同时点添加回收率试验设置0.05mg/kg、0.5mg/kg和1.0mg/kg3个添加水平,每个添加水平3个平行。样品检测进行3个平行试验。1.2.4测试方法色谱柱:石英毛细管柱DB-1(30m×0.53mm×1.0μm)和DB-17(30m×0.53mm×1.5μm);进样口:220℃;检测器:260℃;程序升温:初始温度150℃,保持2min,以8℃/min升温至250℃,保持15min;恒压模式;载气:高纯氮,10mL/min,保持13min,以2mL/min速度增加至15mL/min,保持5min;不分流进样,进样量1.0μL。标准样品色谱图见图1,敌敌畏、甲拌磷、乐果、对氧磷、对硫磷、喹硫磷、伏杀硫磷分别对应色谱图中1～7个峰。2结果与分析2.1扫码过滤技术的应用采用双柱双检测器进行定性定量,双柱测得目的物的保留时间(RT)应与农药扫描表双柱标样的保留时间(RT)相符。从空白样品色谱图(图2)和标准样品添加色谱图(图3)可知,7种有机磷农药在DB-1和DB-17色谱柱上都得到很好的分离。由于水果、蔬菜是比较复杂的基质,特别是番茄的本底更加复杂,很容易造成干扰,用单柱单检测器很难确定是农药还是干扰物。因此,笔者用性质不同的两个柱子,同种农药在两个柱子上的保留时间是不同的,若干扰物在一个柱子上干扰农药测定,在另一个柱子同时干扰该农药的可能性很小,所以可以很好地进行定性确证。定量采用外标法,利用两柱也可以更准确的定量。这7种农药在苹果、梨、草莓、甘蓝、番茄等上也达到了很好的分离和检测效果,充分显示本方法的优越性。2.2最低检出浓度由表1可看出,7种有机磷农药在该仪器条件下,在DB-1和在DB-17两根柱子上的保留时间分别为2.4490～17.1080min和3.6200～26.6750min,27min内能完全分离。最低检出浓度在DB-1和在DB-17两根柱子上分别为0.0200～0.0500mg/kg和0.0250～0.0900mg/kg。最低检测限值符合我国规定最大残留限量值要求。2.3加标回收率测定按试验设计,准确称取苹果、梨、草莓、甘蓝、番茄5种蔬菜、水果进行试验,充分混匀后按“1.2.2”、“1.2.3”、“1.2.4”项操作进行测定,平均回收率基本为80%～120%,相对标准偏差(RSD)在12%以下。完全符合农药残留准则关于回收率和相对标准偏差的规定。2.4药在贵州槲家果中的检出限从表2看出,甲拌磷、对硫磷和伏杀硫磷均未检出或低于最小检出限,其中,甲拌磷和对硫磷属于国家明令禁止在蔬菜、果树、茶叶、中草药材上使用的农药,说明,目前国家明令禁止农药在贵阳花溪地区执行得较好。喹硫磷在梨、草莓、甘蓝中有检出,甘蓝中最高,为0.21mg/kg。对氧磷在苹果和梨中有检出,在梨中最高,达0.5mg/kg。敌敌畏和乐果在5种果蔬中均有检出,敌敌畏在草莓中含量最高,达0.31mg/kg,在番茄中最低,为0.06mg/kg;乐果在梨中含量最高,达0.81mg/kg,在苹果中最低,为0.08mg/kg。虽然7种农药残留量均低于我国规定的最大残留限量(MRLs),但敌敌畏和乐果的检出率较高,说明,两种农药广泛应用于果蔬病虫害的防治上,应该