elisa法检测hiv抗体的应用

elisa法检测hiv抗体的应用

为了提高血质，有效预防和控制hiv感染和传播，需要加强对hiv抗体的检测和管理。酶联免疫吸附测定法（ELISA）法灵敏度高，特异性强，是一种较为常用的检测HIV抗体的方法。但在具体的检测过程中，会受到诸多因素的影响。本研究中，笔者利用ELISA法检测76450例一般住院患者HIV抗体，探讨ELISA法在HIV抗体检测中的应用及检测影响因素。现将研究结果进行如下报告。1材料和方法1.1般住院患者采血2010年5月～2012年5月，76450例一般住院患者，其中男38230例，女38220例，年龄18～49岁。对这76450例一般住院患者进行常规检查和抽血，抽血的过程中要严格按照安全防护制度和临床采血技术规范，以及科华HIV试剂盒的说明书具体要求进行采集。抽取所有一般住院患者的静脉血3～5mL。1.2试剂检测前检查利用酶联免疫吸附试验法（ELISA）进行检测，检测前，要注意检查试剂的批和评估以及有效期。用到的仪器为山东艾德康400型全自动酶免分析仪。1.3hiv抗体阴性检测标本如不能立即测定，5d内测定的血清标本可存放于4℃，1周后测定的血清标本应低温冻存。检测过程严格按照试剂说明书的具体内容和检测规程进行操作，并注意防止出现交叉污染。多次检测，并对检测结果进行处理，建立质控图。如果经检测为阴性，则出具HIV抗体阴性报告。阳性者送至省疾控中心，利用免疫印迹法（WB）进行进一步确认。同时还要注意做好检测后的咨询和保密工作。1.4统计处理研究所得数据均输入Excel表格，并利用SPSS15.0统计软件对研究所得数据进行统一的录入和分析。2hiv抗体体构建共检测76450例一般住院患者HIV抗体，其中确认为阳性的一共有8例，阳性率为0.01%。在8例HIV抗体体感染者中，5例为男性，3例为女性，年龄21～44。不同年龄段具体感染情况如表1所示：3讨论3.1来的试剂分析方法ELISA法即为酶联免疫吸附测定法是一种从免疫酶技术发展而来的特殊的试剂分析方法，检测过程中，在加入特殊的酶底物之后，在酶的催化或水解作用之下，原本无色的底物便会呈现出颜色。于是，依靠肉眼或者分光光度计，便可以观察到具体的检测结果。3.2esa法确定了监测趋势的重要因素3.2.1试剂质量3.2.2抗凝剂的使用对于待检的血液标本，要先自然存放1～2h，使其充分凝固后，予以离心。如果标本为血浆，还要使用适量的抗凝剂。如果暂时不接受检测，还要注意妥善的存放标本，要将标本置于2-8℃的冰箱中，如果需要贮存，则温度要保持在-20℃。3.2.3温度对检测结果的影响温育对ELISA检测过程的影响较大。在检测过程中，抗原和抗体的结合，以及各种酶促反应都需要在特定的温度条件下进行。所以，检测过程中细微的温度变化极有可能会影响检测结果。例如，酶标板周围的升降温速率如果和内部孔不一致，则会造成周边与内部孔最终检测结果的不一致。因此，检测过程要严格控制室内温度（25℃左右）并关闭仪器仓门，减少环境温度对温育温度的影响。3.2.4间延长对检测的影响检测过程中，洗板不畅或者洗板等待时间过长等都会对检测造成影响。因此，在具体的检测过程开始之前一定要检测洗板机是否有堵塞，保证洗板机管路畅通！3.2.5检测试剂的选择显色时间会对检测结果的高低造成影响。因此，在检测中，不能使用放置过久或者过期的显色剂。综上所述，在利用ELISA法对HIV抗体进行检测的过程中，要积极地分析研究可能会对ELISA法检测HIV抗体的相关影响因素，选用优质的试剂，并保证检测