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文档简介
第16 细胞计数：取对数生长期的单层培养细胞，用0.25%胰蛋白酶消化并吹打成单个细10%胎牛血清的培养液中。用细胞计数板人工计数或者以取细胞悬液0.3mL，加入0.9mL结晶紫(或台盼至)染液，混匀后再计0.02%B0.05%的苯胺(根据增殖能力)接种于培养皿中。一般分每皿50、100、200个细胞的梯度密度分别接种含37℃预温375CO22～3固定：弃去培养上清液，用PBS小心浸洗2次。加纯甲醇或1:3醋酸/甲醇5mL，固定15分钟。然后去固定液，加适量Giemsa染色液染10～30分钟，然后使用带网格的透明片叠在培养皿上，肉眼计数，或在低倍镜下计数大于50个细胞3次独立重复的数据都分析完后进行统计分析并绘制柱状图。平使用带网格的透明片叠在培养皿上，肉眼计数，或在低倍镜下计数大于50个细胞3次独立重复的数据都分析完后进行统计分析并绘制柱状图。平
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