河北省沙河市二十冶综合学校高中分校高中生物选修三1.2基因工程操作步骤2学案

课题：基因工程的基本操作程序（第二课时）编写马晓瑞高二生物姓名班级【学习目标】1．基因表达载体的构建2．将目的基因导入受体细胞的方法【重点难点】重点：1．基因表达载体的构建2．将目的基因导入受体细胞的方法难点：将目的基因导入受体细胞的方法【自主学习】一、基因表达载体的构建（1）基因工程的核心（2）构建表达载体的目的:使目的基因在受体细胞中，并且可以遗传给。（3）表达载体必须有、、、、。（4）启动子位于基因的，它是识别和结合的部位，驱动基因转录得到。终止子位于基因的，也是一段有特殊结构的。启动子与终止子的结构单位是（5）标记基因的作用是。（6）构建过程的示意图：（7）由于受体细胞不同，将基因导入受体细胞的方法也不同，所以基因表达载体的构建不是千篇一律的。二、将目的基因导入受体细胞（阅读课本12—13页）（一）转化：目的基因进入受体细胞内，并且在受体细胞内的过程。（二）将目的基因导入植物细胞（1）受体细胞：（2）农杆菌转化法（采用最多的方法）①农杆菌特点：易感染植物和裸子植物，对_______植物没有感染力；Ti质粒的可转移至受体细胞，并整合到受体细胞的上。②转化过程：构建的表达载体转入→导入植物细胞→→目的基因的遗传特性得以稳定维持和表达。(3)基因枪法：是单子叶植物中常用的一种基因转化方法，但是成本较高。(4)花粉管通道法：我国独创的一种方法（三）将目的基因导入动物细胞（1）方法：（2）受体细胞：(3)操作程序：目的基因表达载体→取卵(受精卵)→显微注射→注射了目的基因的受精卵移植到性动物的内发育→新性状动物。（四）将目的基因导入微生物细胞（1）原核生物特点：、多为、相对较少等。(2)大肠杆菌最常用的转化方法是：处理细胞，成为细胞→表达载体与感受态细胞混合→细胞吸收DNA分子。【师生互动，问题探讨】1.启动子与起始密码子有何区别？2.终止子与终止密码子有何区别？3.基因表达载体的构建需要哪些工具酶，如何将目的基因与运载体连接起来形成重组DNA分子（以质粒为运载体）？【自我检测】1．正确表示基因工程顺序操作的四个步骤的是()A．获取目的基因→将目的基因导入受体细胞→基因表达载体的构建→目的基因的检测与鉴定B．目的基因的检测与鉴定→获取目的基因→基因表达载体的构建→将目的基因导入受体细胞C．获取目的基因→基因表达载体的构建→将目的基因导入受体细胞→目的基因的检测与鉴定D．基因表达载体的构建→获取目的基因→将目的基因导入受体细胞→目的基因的检测与鉴定2.下列获取目的基因的方法中需要模板链的是()①从基因文库中获取目的基因②利用PCR技术扩增目的基因③反转录法④通过DNA合成仪利用化学方法人工合成A．①②③④B．①②③ C．②③④D．②③3.PCR技术扩增DNA，需要的条件是（）①目的基因②ATP③四种脱氧核苷酸④DNA聚合酶等⑤mRNA⑥核糖体A．①②③④B．②③④⑤C．①③④⑤D．①②③⑥4.有关基因工程的叙述中，错误的是（）A．DNA连接酶将黏性未端的碱基对连接起来B．限制性内切酶用于目的基因的获得C．目的基因须由载体导入受体细胞D．人工合成目的基因不用限制性内