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耐甲氧西林的葡萄球菌（MRS）检测1、 苯唑西林琼脂筛选试验培养基：MH琼脂+4%NaCL和苯唑西林（6ug/ml）倾注成平板。方法：对琼脂可进行“点”接种，或者用棉拭子蘸取相当于0.5麦氏单位的菌悬液进行,划线”接种。35笆孵育24小时，为最好地从凝固酶阴性葡萄球菌中检测耐甲氧西林菌株，需要奖平板35°C孵育48小时。结果判断：任何生长即为MRS质控菌株：金黄色葡萄球菌ATCC29213——敏感株2、 纸片扩散法（K-B法）苯唑西林和头孢西丁检测mecA基因介导的葡萄球菌耐药性解释标准菌种头孢西丁纸片法（mm） 苯唑西林纸片法（mm）SIRS I R金黄色葡萄球菌和路邓葡萄球菌凝固酶阴性葡萄球菌N22 — W21N13 11-12W10N25 - W24注：1、用透射光观察苯唑西林抑菌圈内如有任何可见的生长，都表示苯唑西林耐药，而头抱西丁用反射光观察抑菌圈内如有任何可见的生长，都表示头抱西丁耐药。2、根据此解释标准耐药者既为耐甲氧西林的葡萄球菌药敏实验纸片扩散法的操作流程于纯培养平板上挑取相同的菌落4-5个放入2ml无菌生理盐水中稀释呈0.5麦氏单位。用无菌棉签蘸取菌液在试管壁上挤压几次，压去多余的菌液，涂布整个MH平板表面，反复数次，每次旋转平板60度，使整个平板涂布均匀。涂布后的平板于室温中干燥3-5分钟，用无菌镊子取药敏纸片贴于平板表面，并用镊尖轻压一下纸片，使其贴平。每张纸片的间距不小于24mm，纸片的中心距平板的边缘不小于15mm，90mm的平板上宜贴6张药敏纸片。将贴好纸片的平板置35o孵育18-24小时后取出判断结果。判断结果：根据（CLSI规则）抑菌环的大小，判断为敏感（SX耐药（R）、或中度敏感（I）。不应报告为敏感抗生素和微生物组合依据CLSI规则第十八版信息下列抗生素/微生物组合在体外可表现活性，但在临床上无效，不应报告敏感微生物不应报告为敏感的抗生素药产ESBLs肺炎克雷伯菌、产酸克雷伯菌、大肠埃希氏菌、奇异变形杆菌青霉素类，头孢菌素类及氨曲南沙门菌属，志贺菌属i>n代头孢菌素类和氨基糖甙类耐苯唑西林的葡萄球菌属青霉素类，&-内酰胺类邓-内酰胺酶抑制剂复合物，头孢菌素类，碳青霉烯类肠球菌属氨基糖甙类（除高浓度外），头

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