白扁豆生产中总磷脂含量的测定

白扁豆生产中总磷脂含量的测定

白豆来自豆科植物。为药食兼优的食物,以种子、种皮(扁豆衣)、花(扁豆花)供药用或食用。该药临床多经炒制后应用,具健脾化湿,和中消暑的功效,用于脾胃虚弱,食欲不振,大便溏泻,白带过多,暑湿吐泻,胸闷腹胀等。有关白扁豆的有效成分,据报道含有磷脂类成分。本实验着重以湖南省平江县白扁豆GAP基地不同试验小区为研究对象,同时对照云南、贵州、江西等地产的白扁豆,对其总磷脂及其组分的含量进行了比较分析,为白扁豆的质量研究提供了科学的依据。现将其总磷脂的含量分析报道如下,其他方面的研究我们将陆续予以报道。1设备和材料1.1仪器UV-1600紫外可见分光光度计(北京)。1.2l-1硫酸磷标准液:为磷酸二氢钾配成0.01mg·ml-1溶液。磷显色液:为3mol·L-1硫酸：水：2.5%钼酸铵：10%抗坏血酸(1：5：1：1)配制而成的溶液,配制时按上述顺序加入,且当天使用。消化液:为70%高氯酸(GR)。Folch试剂为氯仿：甲醇(2：1)配制而成的溶液。1.3白灰豆白对于白对于白对于明金的产白扁豆采自湖南省平江县GAP种植基地16个试验小区产,市售白扁豆分别产于云南、江西、贵州、桂东等省,均经湖南中医药大学药学院药植资源教研室周日宝教授确认为正品。2方法和结果2.1标准溶液的配制将分析纯磷酸二氢钠预先置105℃烘箱烘至恒重,然后放在干燥器中使温度降至室温,精密称取磷酸二氢钾0.0220g,用水溶解置50ml容量瓶中定容,配成0.01mg/ml的磷标准液作为贮备液置冰箱备用。2.2改良folch试剂精密称取干燥至恒重的白扁豆粉末(40目)1.005g,置具塞三角锥形瓶中,精密量取改良Folch试剂100ml,称定重量后,置超声波仪中提取40min,称量补足减少的溶剂,过滤,待用。2.3方法研究2.3.1内容物的预处理精密吸取0.0,0.2,0.4,0.6,0.8,1.0ml贮备液于硬质试管中,加入0.25ml消化液,进行消化,冷却后小心将内容物以显色剂冲洗转至50ml容量瓶中,以显色剂定容;60～70℃水浴恒温10min,取出,冷却至室温,以空白管对照,于700nm处测定吸光度为0.000,0.1299,0.2747,0.4081,0.4974,0.6323。以进样量(μg)为横坐标,吸光度A为纵坐标,绘制标准曲线,求得标准方程为:Y=0.02023X+0.061375,r=0.9973。2.3.2标准溶液及空白管对白砂糖吸收剂用量的影响精密吸取0.2ml贮备液,加入0.25ml消化液进行消化,冷却后小心将内容物以显色剂冲洗转至5ml容量瓶中,以显色剂定容;60～70℃水浴恒温10min,取出,冷却至室温,以空白管对照,于700nm处每隔2h测定1次,其吸光度分别为:0.9591,0.9574,0.9585,0.9598,0.9601。其RSD%=0.113%,可见供试品溶液在8h内稳定。2.3.3吸光度测定精密吸取0.2ml贮备液,按上法连续测定5次,其吸光度分别为:0.9677,0.9682,0.9683,0.9684,0.9687。其RSD%=0.038%,表明本法所用仪器精密度较高。2.3.4吸光度的测定精密吸取0.2ml贮备液5份,按上法测定,其吸光度分别为:0.9490,0.9477,0.9603,0.9472,0.9475。其RSD%=0.59%,表明本法重复性较好。2.3.5贮备液消化剂的制备精密吸取1号样0.5ml,5份,分别加入贮备液0.1、0.15、0.2、0.25、0.3ml,按前法进行消化后,定容至50ml,然后测定其吸光度。(见表1)2.4磷显色剂对标准管冷却按文献采用总磷脂钼蓝比色法进行测定。精密吸取0.5ml上述提取液,于硬质玻璃试管中,水浴上挥干溶剂,加消化液0.2ml,另取2只试管作为标准管及空白管,各加消化液0.2ml,于标准管中加入磷标准液。将上述试管放在试管架上,置电炉上消化,试管内容物由棕黑色变为无色透明时使冷却,于各管中精密加入磷显色剂5ml,放入60～70℃水浴中恒温10min,取出冷却至室温。以空白管调零,于700nm波长比色测定样品磷脂,将所得结果乘以磷脂转换系数25即得磷脂含量。2.5结果中药材白扁豆磷脂含量测定的结果。(见表2)3微域生态环境从表2可知,湖南省平江县基地产的白扁豆中总磷脂的含量与云南、贵州、江西等地产的白扁豆中总磷脂的含量相当,且含量比较稳定。而白扁豆在生长发育过程中喜温暖气候、湿润环境,怕寒霜。以微酸性至微碱性的粘壤土、壤土或砂质壤土最好,砾土及盐碱土则不宜栽种。而平江县位于湖南省东北部,自然条件具有地质构造复杂,四面环山,群峰密布,溪谷纵横,地势比较大,气候垂直变化突出,土壤垂直分布明显,植被垂直差异性强等特点。且具有深山谷地多,山坡日照时间短,直射光少等特点,形成了很多适合白扁豆生长的微域生态环境。另外,平江县民间有着悠