桑树叶斑病防治PPT

汇报提纲研究背景结论与讨论研究目的研究内容结果与分析第二页，共二十四页。研究背景：在很多蚕区，桑树容易发生桑树叶斑病，影响桑树的生长发育，桑叶老化脱落，造成桑叶减产，叶质下降，蚕儿食下病叶后，吸收不到有利于蚕儿生长发育所需的营养，会降低蚕儿抗病的能力，影响蚕茧(cánjiǎn)的产量和质量。第三页，共二十四页。研究目的：采用咪酰胺不同(bùtónɡ)浓度对桑树病菌的抑制率和EC50研究，为提高桑树的产量和质量提供理论依据。

第四页，共二十四页。研究内容：以云南保山、曲靖两地区带有叶斑病的桑叶为材料，采用菌落直径(zhíjìng)法，对杀菌剂咪酰胺的EC50进行测定。算出咪酰胺对病原菌的敏感性。带病桑叶(sānɡyè)第五页，共二十四页。试验(shìyàn)技术路线图植物保护学院何永红老师提供编号为SHB的病原菌病原菌分离病原菌活化

病原菌纯化

单孢分离

鉴定形态鉴定分子鉴定

农药测定曲靖、保山、采集新鲜带病桑叶5%NaClo处理常温培养3～5天显微镜下常温培养3～5天第六页，共二十四页。菌株编号名称采集地点分离部位病斑形状病斑颜色1保2-2保山叶片斑点状黑褐色2曲4-1-1曲靖枝条斑点状黑褐色3曲6-2-1曲靖叶片条状黑褐色4曲5-1-1曲靖叶片斑点状黑褐色5曲5-1-2曲靖叶片斑点状黑褐色6曲2-2-2曲靖叶片斑点状黑褐色7曲2-1-2曲靖枝条斑点状黑褐色8曲5-2-1曲靖叶片条状黑褐色9曲3-1-1曲靖叶片斑点状黑褐色供试菌株分别(fēnbié)从保山、曲靖采样得到。从桑树的叶片和枝条部位分离可得病原菌，病斑部有条状和斑点状，病斑颜色都为黑褐色。表1桑树病菌采集地点(dìdiǎn)、分离部位和病症第七页，共二十四页。编号名称正面形态背面形态孢子堆1保2-2粉红色丝状粉红色黑色较少2曲4-1-1白色丝状白色黑色丰富3曲6-2-1米白色有轮纹絮状桔黄色有轮纹黑色丰富4曲5-1-1米白色有轮纹丝状白色黑色丰富5曲5-1-2白色丝状桔黄色有轮纹黑色较少6曲2-2-2白色有轮纹丝状黑黄相间有轮纹黑色丰富7曲2-1-2黑白相间有轮纹絮状黑黄相间有轮纹黑色丰富8曲5-2-1黑白相间有轮纹丝状黑黄相间黑色丰富9曲3-1-1黑白相间有轮纹丝状黑黄相间有轮纹黑色丰富表29种菌株在PDA平板上的形态(xíngtài)特征第八页，共二十四页。A、菌株在PDA平板(píngbǎn)上的正面形态B、菌株在PDA平板(píngbǎn)上的背面形态图1菌株在PDA平板(píngbǎn)上的形态第九页，共二十四页。序号采样地点孢子形状孢子颜色孢子长（um）孢子宽（um）1保山孢子很小椭圆形近无色，成堆时绿色1.64～2.300.84～1.382曲靖纺锤形、长椭圆形或卵形无色长：9～142.5～43、8、9曲靖棒状中间4色胞同色，有尾和须。黑褐色本长：11.83～15.11须长：5.43～9.84尾长：2.02～4.932.30～3.634曲靖长卵形或倒棍棒形榄褐色孢子痕长：14～48孢子长：33～147孢子痕宽：6～13；孢子宽：9～335曲靖镰刀形或梭性无色9.55～15.191.89～2.696曲靖长卵形、椭圆形或纺锤形深蓝色或深紫色16～254.5～67曲靖小型孢子椭圆形或卵形，大孢子椭圆形至长卵形无色小孢型子5.3～10.5大型孢子7.5～17小型孢子2.8～5大型孢子2.5～5.5表3桑树病害孢子(bāozǐ)形态第十页，共二十四页。

观察(guānchá)结果表明（表3和图2）1号菌株初步鉴定为亚木霉（Trichodermakoningii），2号菌株初步鉴定为桑幹枯病（Phomopsissp）,3、8、9号菌株初步鉴定为拟盘多毛孢（Pestalotiopsis），5号菌株初步鉴定为禾赤霉菌（Gibberellazeae），4号菌株初步鉴定为甘蓝长尾交链孢霉（Alternariabrassicae），5号菌株初步鉴定为禾赤霉菌（Gibberellazeae），6号菌株初步鉴定为桑牙枯病（Fusariumcerealis），7号菌株初步鉴定为蔓枯病菌（Didymellabryoniae）。

A、3号菌株孢子(bāozǐ)形态B、1号菌株孢子(bāozǐ)形态C、5号菌株孢子(bāozǐ)形态形态学鉴定(jiàndìng)结果图2桑树病害孢子形态第十一页，共二十四页。分子鉴定结果：

本试验中分离的9个菌株与从GeneBank比对结果表明，保2-2、曲4-1-1、曲6-2-1、曲5-1-1、曲5-1-2、曲2-2-2、曲2-1-2、曲5-2-1、曲3-1-1号菌株是亚木霉、桑干枯菌、细极链格孢、甘蓝(gānlán)长尾交链孢霉、禾赤霉菌、桑牙枯菌、蔓枯病菌、细极链格孢、天竺葵链格孢。第十二页，共二十四页。菌种AccessionMaxidentDescriptionGenebank比对结果保2-2AF218790.199%Trichodermakoningii亚木霉曲4-1-1AB302247.199%Phomopsissp桑干枯菌曲6-2-1HM467832.199%Alternariatenuissima细极链格孢曲5-1-1JF439449.199%Alternariabrassicae甘蓝长尾交链孢霉曲5-1-2HQ671191.199%Gibberellazeae禾赤霉菌曲2-2-2GU584950.199%Fusariumcerealis桑牙枯菌曲2-1-2EU167573.199%Didymellabryoniae蔓枯病菌曲5-2-1JQ417902.1100%Alternariatenuissima细极链格孢曲3-1-1JF422727.199%Alternariaporri天竺葵链格孢表4分离(fēnlí)菌株在Genebank比对结果第十三页，共二十四页。菌株抑制率浓度10ug/ml浓度30ug/ml浓度50ug/ml浓度100ug/ml浓度150ug/ml保2-20.50710.66140.70390.66930.622曲4-1-10.30940.25880.22710.30350.5024曲6-2-10.55660.72110.70390.29610.8013曲5-1-10.52030.66440.77560.84240.8525曲5-1-20.4950.63830.71670.79670.8083曲2-2-20.50.55560.59520.73810.881曲2-1-2-0.3650.19570.47830.44780.6609曲5-2-10.19650.05880.28590.44710.5141曲3-1-10.27650.25880.30240.30590.4471表5桑树病菌(bìngjūn)对咪酰胺的抑制率

第十四页，共二十四页。实验表明咪酰胺对桑树病菌的抑制率较强，在咪酰胺浓度(nóngdù)为10ug/ml，30ug/ml，50ug/ml，100ug/ml，150ug/ml的PDA平板上培养的桑树病菌抑制都较明显。图3咪酰胺对桑树病菌(bìngjūn)的抑制效果图

咪酰胺对桑树病菌的抑制效果图0.000000.200000.400000.600000.800001.00000147101316192225283134374043菌株抑制率第十五页，共二十四页。农药测定结果

本实验(shíyàn)为桑树病菌在加入浓度10ug/ml和30ug/ml的咪酰胺在PDA平板上的生长状况。实验(shíyàn)表明桑树病菌对咪酰胺较敏感，不同的桑树病菌对咪酰胺的敏感度不同。图4不同浓度的咪酰胺对桑树病菌(bìngjūn)的抑制效果图第十六页，共二十四页。本实验为桑树病菌(bìngjūn)在加入浓度为50ug/ml、100ug/ml和150ug/ml的咪酰胺在PDA平板上的生长状况。实验表明咪酰胺的浓度越高桑树病菌(bìngjūn)越敏感，对桑树病菌(bìngjūn)的抑制率越强。图5不同(bùtónɡ)浓度的咪酰胺对桑树病菌的抑制效果图第十七页，共二十四页。本实验为不同的桑树病菌在PDA平板上的正常(zhèngcháng)生长状况。本实验表明不同地区的桑树病菌并不完全相同，病菌的菌落大小，颜色，菌丝的长短，有无菌丝，生长快慢都不相同。在不同地区不同气候条件下影响桑树减产的主要病害不同。图6桑树病菌的正常生长(shēngzhǎng)状况图第十八页，共二十四页。咪酰胺对桑树病菌的抑制效果：咪酰胺的EC50从0.012774ug/ml-17.815ug/ml。EC50＜0.1的菌株有3个分别是细极链格孢（3号）、甘蓝长尾交链孢霉（4号）和禾赤霉菌（5号）这4个菌株对咪酰胺的敏感性最强。证明(zhèngmíng)咪酰胺能有效防治亚木霉、细极链格孢、甘蓝长尾交链孢霉和禾赤霉菌所引起的桑树病害。序号菌株EC50ug/ml1保2-20.0431672曲4-1-117.8153曲6-2-10.0127744曲5-1-10.0808465曲5-1-20.0990046曲2-2-20.1375857曲2-1-20.9441328曲5-2-11.6770019曲3-1-117.02504表6咪酰胺对桑树病菌(bìngjūn)的EC50第十九页，共二十四页。

8个菌株对咪酰胺的EC50分布(fēnbù)有一个单峰，其中6号（桑牙枯病菌）、3号（细极链格孢）、4号霉（甘蓝长尾交链孢）和5号（禾赤霉菌）这四个菌株的EC50<0.5，1.5＜EC50＜2的菌株是8号（细极链格孢）。2号（桑干枯病）和9号（天竺葵链格孢）的EC50>2。即除了EC50＞2的这两菌株外，其余6个菌株菌落对咪酰胺敏感。

图7咪酰胺对桑树病菌(bìngjūn)的EC50分布图第二十页，共二十四页。结论(jiélùn)与讨论桑树病菌的病原：

本文鉴定表明，云南省引起桑树真菌病害的病原有：细极链格孢（Alternariatenuissima）、甘蓝长尾交链孢霉（Alternariabrassicae）、禾赤霉菌（Gibberellazeae）、桑牙枯病（Fusariumcerealis）、蔓枯病菌（Didymellabryoniae）、天竺葵链格孢（Alternariaporri）。前人研究表明云南桑树病害主要是侵染性病害，而引起桑树侵染性病害的病原物主要是真菌，属于子囊菌纲（Ascomycetes）、担子菌纲（Basidiomycetes）和半知菌类（Fungiimperfecti）。菌丝体发达，有隔膜和分枝，菌丝体可构成菌核、子座、子囊果等组织体。此外，本文还分离到一株亚木霉（Trichodermakoningii），亚木霉（Trichodermakoningii）是否(shìfǒu)对桑树的其它病原有防治效果，需进一步研究。第二十一页，共二十四页。

本文中，咪酰胺可以有效防治桑树真菌病害，在供试的8个菌株中有三个菌株：细极链格孢（Alternariatenuissima）、甘蓝长尾交链孢霉（Alternariabrassicae）和禾赤霉菌（Gibberellazeae）的EC50<0.1，表明咪酰胺对桑树上的这些病菌抑制和杀菌作用很显著。2007年仇铁烨用咪酰胺防治水稻恶苗病的效果显著，每hm2用咪酰胺60ml，对秧苗期和