浙江省地方标准《罗氏沼虾第1部分种苗繁育技术规程》编

浙江省地方标准《罗氏沼虾第1部分：种苗繁育技术规程》编制说明一、立项背景罗氏沼虾[Macrobrachiumrosenbergii(DeMan)1879]，又名马来西亚大虾，淡水长臂大虾，金钱虾，大河虾，英文名为TheGiantFreshwaterPrawn。是世界上最大的淡水沼虾，原产于整个南亚和东南亚地区以及大洋洲北部和西太平洋岛屿，全年生活在这些地区的淡水或咸淡水水域中，并在受潮水影响的河口地区进行繁殖，当幼体变态成幼虾后，便逐渐溯河上游，在河沟、湖泊及水田中生长。在东南亚的一些天然水域里，雄虾体长达40厘米，体重600多克，雌虾体长25厘米，体重200克，是沼虾属中个体最大的一种。由于罗氏沼虾的个体大、食性广、易生存、生长快、病害少、肉味美、生产周期短，因而具有较高的经济价值，人工养殖发展十分迅速。现已成为世界性养殖品种。我国已1976年从日本引进，经过四十多年的发展，特别是近年来随着选育良种的推广、人工育苗技术的改进和养殖技术的发展，养殖面积与产量得到了迅速提升，至2017年，我国罗氏沼虾年育苗量达200亿尾以上，养殖面积约3万公顷，从苗种、饲料、成虾、加工到国内外贸易等产业总产值超过100亿元。浙江省的罗氏沼虾年育苗量达120亿尾以上，占全国罗氏沼虾育苗量的60%，对全国的罗氏沼虾养殖业贡献巨大。我省原有的《无公害罗氏沼虾第1部分：虾苗繁育》(DB33/T397.1-2003)，标龄已超过12年，且与罗氏沼虾苗种生产有关科学技术的发展不相适应，相关标准中的部分技术内容与指标已经落后于现实科技水平，不能真正起到指导和规范罗氏沼虾苗种生产的作用。如原标准中因当时产业发展的局限性，还无法明确罗氏沼虾苗种生产用亲本的来源要从“国家罗氏沼虾遗传育种中心”或“国家级罗氏沼虾良种场”引进，或引进经国家审定的新品种等，难于保证亲本质量。又如，在刚废止的《无公害罗氏沼虾第4部分：苗种》(DB33/397.4-2006)中，虽在虾苗培育过程中明确禁止使用孔雀石绿，但没有细分有色孔雀石绿和无色孔雀石绿；虽有呋喃西林代谢物、呋喃唑酮代谢物检测项，但少了呋喃它酮、呋喃妥因代谢物检测项；而现有国内外的研究表明，罗氏沼虾甲壳中天然带有呋喃西林代谢物氨基脲(SEM)，以检测SEM含量作为使用违禁药品呋喃西林依据不科学，新的修订标准中建议在虾苗检测中取消SEM的检测。根据行业主管部门对罗氏沼虾产品质量的监管要求，增加了氯霉素残留量的检测项。在刚废止的《无公害罗氏沼虾第4部分：苗种》(DB33/397.4-2006)标准中，规定出售的虾苗严禁携带罗氏沼虾野田村病毒(MrNV，又称诺达病毒)。为此，我省作为全国罗氏沼虾苗种主产地，在不断积累相关资料、数据和技术的基础上，非常有必要及时对现行的罗氏沼虾苗种生产标准进行科学的修订，总结出一套适合我省罗氏沼虾产业发展的苗种生产技术标准，才能继续引领我省乃至全国罗氏沼虾产业的健康可持续发展。与此同时，本次罗氏沼虾人工繁育技术的修订，在规范和提高我省罗氏沼虾苗种产业发展的同时，也能为我国现行13-15年的罗氏沼虾行业标准(《罗氏沼虾养殖技术规范》SC/T1033-1999，《无公害食品罗氏沼虾养殖技术规范》NY/T5159-2002)中有关繁育技术部份的修订提供参考。二、工作简况1、任务来源《罗氏沼虾第1部分：种苗繁育技术规程》的编制修订任务来源于浙江省质量技术监督局《关于下达2013年第三批省地方标准制修订计划的函》(浙质函【2013】136号)，项目序号为29。2、协作单位项目承担单位为浙江省淡水水产研究所，无协作单位。3、主要工作过程从1995年起，标准主要起草人连续20多年开展罗氏沼虾的育、繁、推工作。通过创建“浙江省省级罗氏沼虾良种场”(2003年)、“国家级罗氏沼虾良种场”(2004年)、“国家罗氏沼虾遗传育种中心”建设(2007年)，不断改进和完善罗氏沼虾的育、繁、推技术。在罗氏沼虾苗种产业发展过程中，出现的两次重大病害(2001年、2010年)，均被标准主要起草人及标准承担单位攻克。经标准主要起草人及标准承担单位连续10多年的研究，成功选育出国内第一个经全国水产原种和良种审定委员会审定通过的国家水产新品种--罗氏沼虾“南太湖2号”(品种登记号：GS-01-001-2009)，此新品种已连续多年被农业部列为渔业主推品种予以推广。通过承担科技部农业科技成果转化资金项目“罗氏沼虾‘南太湖2号’新品种产业化中试”（2011GB2C200002）、科技部农业科技成果转化资金项目“罗氏沼虾良种选育技术产业化中试”(2007GB2C200124)、省重大科技专项“罗氏沼虾多性状复合育种技术研究与示范”(2007C12059)、省农业科技成果转化资金项目“罗氏沼虾无诺达病毒苗种培育技术中试”(2004D70013)、湖州市重大科技专项“罗氏沼虾幼体重大流行病病原、诊断技术与综合防治研究”(2011C11018)等项目的实施，发表与罗氏沼虾育、繁、推相关论文45篇，获专利11项，出版著作5册，“罗氏沼虾‘南太湖2号’新品种培育与配套技术研究”获浙江省科技一等奖(2013年)、“罗氏沼虾病毒性肌肉白浊病病原的分离鉴定及诊断技术研究”获浙江省科技二等奖(2004年)、“罗氏沼虾良种选育技术研究”获浙江省科技三等奖(2006年)。标准编制修订单位作为“国家级罗氏沼虾良种场”的技术依托单位，近10多年来，已繁育推广罗氏沼虾良种虾苗近80亿尾，在此期间，繁育技术逐年改进并积累了大量的数据。根据标准修订需要，查询了国内罗氏沼虾人工繁育技术与苗种质量方面相关的标准、文献、科研成果等资料，对罗氏沼虾相关的标准及文献进行了采集，对采集的各方面资料进行了分析总结。通过整理研究及参考其它相关资料，总结提出了标准草稿，于2015年9月形成浙江省地方标准《罗氏沼虾第1部分：种苗繁育技术规程》征求意见稿。2015年10月以来，征求了浙江省海洋与渔业局产业处、浙江水产技术推广总站、浙江省水产质量检测中心、杭州市农业科学研究院、湖州市农业局水产站、宁波大学、湖州师范学院、嘉兴市秀洲区农经局、嘉兴市嘉善县农经局水产站、杭州市西湖区农业技术推广中心等10个单位的专家与同行意见，其中10位专家分别反馈了修改意见，标准编制小组根据专家回馈的修改意见采纳31条，未采纳的修改意见有17条，并给出了未采纳的理由(详见征求汇总表)。为使本标准更科学、简练、准确和实用，根据相关专家提出的意见和建议，标准起草组又开展了2年的相关观察、验证和总结，主要包括规范罗氏沼虾SPF苗种繁育技术方法、“铁虾”防控技术方法等，对修订标准作了进一步的修改和补充，形成了修订标准的送审稿，并于2019年5月31日通过评审委员会专家评审，根据评审意见修改后，最终形成本标准修订的报批稿。4、主要起草人及其所做的工作姓名职务/职称工作单位承担的工作杨国梁教授级高工浙江省淡水水产研究所制定修订标准结构与编写框架、起草修订标准相关内容及编制说明等。高强高级工程师浙江省淡水水产研究所负责人工育苗技术工艺细化、模式图编写和征求意见稿的修改等。陈雪峰副研究员浙江省淡水水产研究所负责种虾筛选、培育工艺。林锋助理研究员浙江省淡水水产研究所负责罗氏沼虾野田村病毒的快速检测方法。潘晓艺副研究员浙江省淡水水产研究所负责罗氏沼虾双顺反子病毒的快速检测方法。夏正龙工程师浙江省淡水水产研究所收集相关的技术资料、标准等，参与标准的编写。黄振远助理研究员浙江省淡水水产研究所收集相关的技术资料、标准等，参与标准的编写。慎佩晶助理研究员浙江省淡水水产研究所收集相关的技术资料、标准等，参与标准的编写。三、标准编制原则和确定地方标准主要内容的依据1、编制原则本标准修订遵循先进性、科学性、实用性的原则，注重标准的可操作性和应用性，严格按GB/1.1-2009《标准化工作导则》的要求进行编写。在引用最新科研成果外，同时吸收生产实践中创造并验证正确的新经验和新方法，注重科学性与可操作性相结合，以利于标准颁布后的推广和应用。2、主要内容确定依据主要根据我国和我省罗氏沼虾人工繁育生产实践以及已有科研成果、产业发展需求，结合标准修订编写小组近10多年在罗氏沼虾育、繁、推方面所做的省部级科学研究、成果转化与苗种推广中取得的成果为依据。（1）增加了场址环境条件标准修订编写小组根据罗氏沼虾国家遗传育种中心、国家级罗氏沼虾良种场、罗氏沼虾省级良种场等单位的场址选择和相关设施配备条件，以及实际繁育效果情况，通过分析和整合，进一步规范了罗氏沼虾育苗场建设的相关条件要求。（2）增加了亲本引进与质量要求，亲本的质量将直接影响繁育工作的开展和繁育虾苗的质量。为此，本次修订从罗氏沼虾繁育源头的亲本引进渠道和质量要求等方面进一步规范了亲本质量的选择标准。国家罗氏沼虾遗传育种中心或国家级罗氏沼虾良种场培育的良种虾苗或亲本，质量把控更加严格和稳定。另外，对引进亲本的培育、相关病原检测、运输、消毒方法等方面也通过研究进行了完善和修订。（3）在虾苗质量安全要求中，随着罗氏沼虾育苗产业的发展，新增加了虾苗的淡化苗全长、规格合格率、残次率、死亡率要求，修订降低了出苗池池水盐度要求标准。通过本次对虾苗质量安全要求标准的修订，进一步规范了罗氏沼虾虾虾苗质量评判标准。（4）增加了虾苗运输要求，虾苗运输是罗氏沼虾繁育工作中最后一个环节，也是非常重要的一个环节。本次修订规范化的增加了虾苗运输对包装、运输密度、运输用水和运输防护等内容的要求。（5）完善了罗氏沼虾野田村病毒的检测方法（附录A），增加了罗氏沼虾育苗常见疾病及防治方法（附录B）和罗氏沼虾育苗用饵料（饲料）制作方法（附录C）。标准修订编写小组通过对近年来在罗氏沼虾繁育过程中出现的主要病原分析，建立了快速高效的检测技术方法，通过本次标准修订将常见疾病及防治方法和饵料制作方法以附录形式加入到了修订标准中，进一步完善了罗氏沼虾繁育技术标准，确保了繁育虾苗的质量。四、主要试验分析报告、相关技术和经济影响论证本标准的修订是充分吸收浙江南太湖淡水水产种业有限公司(即浙江湖州国家级罗氏沼虾良种场)的企业标准《罗氏沼虾“南太湖2号”养殖技术规范》(Q/ZJNTH001-2009)中的相关技术经济指标，经多年验证，行之有效，尤其是在近二年的生产实践与良种推广中，效果显著。表1是近两年根据本标准从种质库中引进罗氏沼虾“南太湖2号”SPF亲本和本标准中的技术参数后，育苗企业成功培育出优质罗氏沼虾苗种，取得显著的经济与社会效益。其中2014年产值与利润超千万的种业企业1家，2015年，产值与利润超千万的种业企业5家。表1种业企业验证情况表年份种业企业良种扩繁量(亿尾）产值（万元）利润(万元）2014浙江南太湖淡水水产种业有限公司6.78

220010222015浙江南太湖淡水水产种业有限公司8.02375731672015江苏富裕达特种水产良种场4.3

200912942015湖州源生虾苗场6.5

247016252015扬州市永业罗氏沼虾良种繁育有限公司5.5220015752015湖州兴渔罗氏沼虾育苗场(市推广站)3.215361100合计34.3141729783五、重大意见分歧的处理结果和依据在本标准的修订过程中，没有出现重大意见分歧，在标准的实施过程中，有待于广泛征求相关研究、推广、管理、育苗企业及养殖专业合作社等单位中的各位专家、同行意见，根据我国和我省实际情况，按照标准化的原则，协商解决分歧意见。六、国内外现行相关法律、法规和标准情况本标准修订的罗氏沼虾人工繁育技术规程，基本是以国内研究与生产实践为基础。目前国外有一些关于罗氏沼虾人工繁育与养殖生物学报道，但未见同类标准发布。本标准主要是涉及罗氏沼虾人工繁育等方面的相关技术，规范的对象是罗氏沼虾亲虾和幼体；《罗氏沼虾养殖技术规范》SC/T1033-1999和《无公害食品罗氏沼虾养殖技术规范》NY/T5159-2002主要是涉及罗氏沼虾人工养殖方面的相关技术，规范的对象是罗氏沼虾仔虾、幼虾和商品虾。通过本标准的修订，进一步规范了罗氏沼虾人工繁育技术，为两个养殖技术规范提供更加优质的罗氏沼虾虾苗。本标准的修订遵循现行法律、法规，与其他相关的强制性标准无冲突。七、预期的社会经济效益及贯彻实施标准的要求、措施等建议通过从国家罗氏沼虾遗传育种中心引进正宗的罗氏沼虾“南太湖2号”SPF亲本，再参照本标准中的相关技术参数和要求，罗氏沼虾育苗企业育苗成活率均在85%以上，繁育的罗氏沼虾良种虾苗具生长快、成活率高、饲料利用率高、出肉率高等优点，并且无“长不大的铁虾”显现出现，无论是对各罗氏沼虾育苗企业，还是对广大罗氏沼虾养殖户而言，都具有显著地社会经济效益。该标准发布实施后，建议各级水产技术推广部门、水产苗种协会、罗氏沼虾育苗场认真组织学习，必要时可组织召开标准宣传会，就标准的相关内容进行解读，并通过到罗氏沼虾育苗场召开现场会等形式推进罗氏沼虾人工繁育技术的推广，以期进一步规范和指导罗氏沼虾育苗场对该项标准的理解与应用，提高社会与经济效益。八、提出标准强制实施或推荐实施的建议和理由虽然在本标准的修订中规定了亲本引进时必须检测罗氏沼虾野田村病毒为阴性。整个标准是为开展罗氏沼虾人工繁殖各相关环节所设立的生产操作规范，带有指导性质，有利于促进我省罗氏沼虾苗种生产的标准化、规范化、科学化，使技术先进性和实用性融为一体，促进我省罗氏沼虾产业健康持续发展，为农业增效、农民增收和实现产业转型升级作贡献。因此，建议本标准为推荐性标准。九、贯彻地方标准的要求、措施等建议及设立强制性标准实施过渡期的理由，并根据国家经济、技术政策需要提出标准实施时间的建议本标准修订是在现行浙江省地方标准《无公害罗氏沼虾第一部分：虾苗繁育》（DB33/T397.1—2003）的基础上进行的，因此，待本标准修订完毕，通过浙江省市场监督管理局组织的专家审定并发布实施以后，建议立即废止现行的浙江省地方标准——《无公害罗氏沼虾第一部分：虾苗繁育》（DB33/T397.1—2003），直接执行本修订标准，以便快速的解决罗氏沼虾苗种繁育过程中繁育成活率低、苗种质量较差等产业问题，尽快转化为生产力。十、其他应予说明的事项参考文献：[1]New,M.B.2002.Farmingfreshwaterprawn:amanualforthecultureofthegiantriverprawn(Macrobrachiumrosenbergii).FAOFisheriesTechnicalPaperNo.428Rome.[2]GuoliangYang,MikeFrinsko,XuefengChen,etal.CurrentstatusofthegiantfreshwaterprawnindustryinChina,withspecialreferencetolivetransportation,AquacultureResearch[J],AquacultureResearch,2012,43:1049-1055[3]ShengLuan,GuoliangYang,JunyiWang,etal.GeneticparametersandresponsetoselectionforharvestbodyweightofthegiantfreshwaterprawnMacrobrachiumrosenbergii[J].Aquaculture,2012,363:88-96[4]ShengLuan,JunyiWang,GuoliangYang,etal.GenecicparametersofsurvivalforsixgenerationsinthegiantfreshwaterprawnMacrobrachiumrosenbergii[J],AquacultureResearch,2013,45(8):1-11[5]ShengLuan,GuoliangYang,JunyiWang,etal.SelectionresponsesinsurvivalofMacrobrachiumrosenbergiiafterperformingfivegenerationsofmultitraitselectionforgrowthandsurvival[J],AquacultureInternational,2014,22(3):993-1007[6]DQian,ZShi,SZhang,etal.Extrasmallvirus-likeparticles(XSV)andnodavirusassociatedwithwhitishmusclediseaseinthegiantfreshwaterprawn,Macrobrachiumrosenbergii[J],JournalofFishDiseases,2003,26:521-527[7]DQian,WLiu，JXWU,etal.PreparationofmonoclonalantibodyagainstMacrobrachiumrosenbergiiNodavirusandapplicationofTAS-ELISAforvirusdiagnosisinpost-larvaehatheriesineastChinaduring2000-2004[J],Aquaculture，2006,21:1144-1150[8]JRBonami,ZShi,DQian,etal.Whitetaildiseaseofthegiantfreshwaterprawn:separationoftheassociatedvirionsandcharacterizationofMrNVasanewtypeofnodavirus[J],J.FishDis.2005,28:23-31.[9]JSWidada,SDurand,ICambournac,DQian,etal.Genome-baseddetectionmethodsofM.rosenbergiinodavirus,apathogenofthegiantfreshwaterpraw,M.Rosenbergii:dot-blot,insituhybridizationandRT-PCR[J],J.FishDiseases，2003,26:583-590[10]JoannesSriWidada,VeroniqueRichard,ZhengliShi,etal.Dot-blothybridizationandRT-PCRdetectionofextrasmallvirus(XSV)associatedwithwhitetaildiseaseofprawnMacrobrachiumrosenbergii[J],DisAquatOrg.2004,58:83-87[11]VanPouckeC,DetavernierC,WilleM,etal.InvestigationintothepossiblenaturaloccurenceofsemicarbazideinMacrobrachiumrosenbergiiprawns[J].JournalofAgriculturalandFoodChemistry.2011,59(5):2107-2112[12]McCrackenR,HannaB,EnnisD,etal.TheoccurrenceofsemicarbazideinthemeatandshellofBangladeshifresh-watershrimp[J].\o"Foodchemistry."FoodChem.2013,136(3-4):1562-1567[13]SaariL,PeltonenK,Novelsourceofsemicarbazide:levelsofsemicarbazideincookedcrayfishsamplesdeterminedbyLC/MS/MS[J].FoodAdditContam,2004,21(9):825-832[14]马大勇,胡红浪,孔杰.近交及其对水产养殖的影响[J].水产学报,2005,29(6):849-856[15]钱冬,杨国梁,刘问,等.罗氏沼虾苗肌肉白浊病病原的初步研究[J].水生生物学报，2002,26(5):472-476[16]杨国梁,孔杰,高强,等.罗氏沼虾不同养殖条件下的生长和存活率相关分析[J].海洋水产研究,2008,29(3):74-79[17]杨国梁.罗氏沼虾人工育苗及养殖新技术(上)[J].科学养鱼,2008,10:12-13[18]杨国梁.罗氏沼虾人工育苗及养殖新技术（中）[J].科学养鱼,2008,11:12-14

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