中医证候动物模型研究进展

中医证候动物模型研究进展

中医动物实验最初是为了将动物解释知识应用于人体。其次，对动物疾病本质的观察和对动物添加适当的人类因素的观察。中兽医则一直在家畜体上实践中医的证候理论。在现代则首先开始于中药药理研究,针灸经络上的运用则是其继起者。作为当代中医动物实验重点的证候模型,1960年开始有散在研究,1977年后发展较迅速。中医证候动物模型研究的意义首先在于避免人体实验而且动物实验更易于实现实验目标;其次,对中医而言,中医动物模型研究还有建立基础医学学科,引进实证方法论和理性生物观,引进实验方法等意义;第三,对现代中医动物实验研究的各方面均可能促进其完善。证候模型的制备在证型确定、动物选择、造模因素确定、模型诊断与评价、实验指标选择、症病结合模型设计等方面有其自身规律。在1980年代,证候模型主要应用于中医基础理论研究领域,1990年代以来在中药药理研究方面也有较多应用。1.肾衰竭的生物模型肾虚证为素体亏虚、年高肾亏、房劳过度、久病及肾、或服药过当、情志内伤等所致。(1)质激素小鼠肾功能变化及证证病结合的基本认识1960年易宁育从复方治疗结果区分出实验性肾上腺再生型高血压和肾血管型高血压分属阳虚证和阴虚证;1963年邝安坤发现过量使用肾上腺皮质激素小鼠有肾虚表现;至今已有下丘脑损伤、肾上腺皮质功能改变、甲状腺功能改变、性腺功能改变、DNA合成抑制、衰老、肾脏功能损害、恐伤肾、膀胱排尿无力、胎儿宫内发育迟缓、骨髓造血机能障碍、外伤及肾、锁阳应用、缺铁等各类肾虚证模型,以及多种肾虚证证病结合模型。肾上腺皮质激素模型主要从应用时间、激素的长效与短效、以及是否停药区别肾阴虚证与肾阳虚证。临床肾虚证有DNA合成抑制的改变。衰老则属生理性肾虚证。(2)加强肾生理研究各模型的生物学特征与模型制备有关。肾虚证模型已广泛用于肾虚证和衰老的病理研究、以及海龙蛤蚧精、猪苓多糖、川附子提取物、还精煎、固真冲剂等中药的药理研究。王米渠对惊恐伤肾肾虚证大鼠进行心理遗传学研究;施玉华应用10种肾虚证动物模型对肾虚证理论进行系统的形态学研究;杨梅香用肾阴虚模型比较龟上下甲的药效。2.脾虚证的动物模型脾虚证由饮食失调、劳倦损伤、吐泻太过、肝气乘脾、过服寒凉食物、久病体弱、禀赋不足等所致。(1)主要有各类有机溶剂模型的药物1977年北京中医学院建立限量饮食脾气虚模型;1979年北京师范大学生物系消化生理科研组、北京中医研究所病理生理研究室创立大黄苦寒泻下脾虚证模型;至今已形成苦寒或(苦寒)泻下、限量营养、限量营养加邪侵、副交感神经功能亢进、饮食失节、耗气破气、味过于酸、溃疡性结肠炎、胆汁氢氧化钠、环磷酰胺、熟地、气候法伤湿、秋水仙碱、复合因素等各类脾虚证模型,以及多种脾虚证证病结合模型。造模要素有苦寒泻下、耗气破气、限量营养、劳倦过度、利血平等五大类,以大黄苦寒泻下模型使用率最高。复合模型制备应用较多。与其他虚证模型一样,脾虚证模型不仅要求慢性形成,更要强调慢性恢复。脾虚模型无“限量营养”之名的各造模要素中,也多在本质上有明显强制性营养不良作用。蒋渝比较了不同动物对脾虚证造模的敏感性差异。(2)对肠液的促进作用对不同模型制备的脾虚证模型间的病理差异进行比较研究已成新的趋势,如大黄与利血平脾虚证模型在肠液分泌量上有明显不同。脾虚证模型已被用于健脾灵、四理汤、绞股蓝总皂甙等70余种中药新药的药理研究。厉兰娜利用偏食酸加饥饱失常加应激加冷刺激脾虚证模型克服幽门螺杆菌感染的困难。黄煦等以脾虚证模型进行药证动力学研究。在脾虚证模型的研究报告中约45%的篇幅是病理形态学内容。3.肝脏综合征的动物模型肝脏证候以实证为主,由情志郁结,郁怒伤肝,或肝郁化火;生血不足,失血太多;肝肾阴虚,不能制约肝阳;感受湿热之邪等所致。(1)肝郁证病结合模型1971年日本有地滋建立局部药物及针刺应用胸胁苦满模型;1979年湖南医学院建立艾叶注射肝郁证模型;至今已有埋针、CCl4注射法胸胁苦满模型,艾叶注射、急性激怒、慢性激怒、模具、束缚法等肝郁证模型,CCl4急性和慢性损伤、饥饱失常加逃避训练法肝郁脾虚模型,CCl4损伤加甲状腺素和利血平肝肾阳虚模型,大肠肝菌内毒素注射法肝火证模型,电刺激“怒吼中枢”、破坏膈区法怒伤肝模型,雌性动物雌激素注射乳痞模型,以及多种肝脏证候证病结合模型。李德新等认为中医学主要把怒分为郁怒和暴怒两种。王霞灵等报道女性肝郁患者血清E2浓度均高于对照组。王希浩发现肝郁型月经病血清泌乳素水平升高。(2)生物学的特点和应用肝郁证病理改变中,怒与郁的平衡需加以掌握。应用CCl4建立的肝郁脾虚证模型用于猪苓多糖、柴芪注射液和强肝软坚汤的药理研究。4.心虚证的动物模型心虚证由久病、暴病伤阳耗气、年高脏气衰弱、或血之化源不足、失血、热病伤阴等所致。与心血瘀阻病机关系密切。(1)急性心肌缺血模型1987年孙福立建立睡眠剥夺法心虚证模型;1989年金雁建立高胆固醇性免疫损伤加慢性放血心虚证模型;1995年程伟建立急性心肌缺血法心虚证模型;同年孙蓉建立睡眠剥夺法心气阴两虚心律失常证病结合模型以及高胆固醇性免疫损伤加慢性放血心气虚心律失常证病结合模型。(2)生物学的特点和应用目前的模型尚不能表现心神方面之心虚证。心虚证模型已用于参葛胶囊、舒心宝等中药新药研究。5.肺肠综合征的动物模型肺脏证候为劳损,感受外邪,久喘久咳伤肺所致。(1)储机病理机构模型1976年山西中医研究所内科呼吸组建立早状腺功能低下或肾上腺皮质功能低下SO2熏法肺虚寒证模型;及甲状腺功能亢进加SO2熏法肺阴虚证模型;1981年天津市和平医院病理科建立刨花烟熏法肺气虚证模型;及氢化可的松、利血平和甲状腺素应用加刨花烟熏法肺阴阳两虚证模型;至今已有慢性支气管炎肺虚(痰阻)证、急性呼吸窘迫综合征肺虚证、内分泌功能改变加慢性支气管炎肺虚证、禀赋不足加/或后天失调法肺脾两虚易感体质、气候因素加慢性支气管炎肺虚证、风寒犯肺证、“形寒寒饮则伤肺”证候、肺失通调水道、肺失与大肠相表里、卫气虚证、肺阳虚证、哮喘“痰瘀伏肺”等各类肺脏证候模型。(2)间以使炎证为主，注意太过以慢性支气管炎法建立肺虚证模型应有足够造模时间以使炎证转为慢性,但也要注意太过则可能出现从肺气虚—脾阳虚—肾阳虚的发展过程。肺脏证候模型已用于补肺止咳方、养阴止咳汤等中药研究。6.气虚血虚的动物模型气虚证由久病、年老体弱、饮食失调、用药不当等所致。血虚证由失血过多,或脾胃虚弱生化不足,或七情过度暗耗阴血,或用药不当所致。(1)血虚证模型的建立1964年上海医学院附属广慈医院舌象研究小组建立慢性失血气虚证模型;1977年上海中医研究所建立失血加限量营养血虚证模型;同年贲长恩,叶百宽建立乙酰基苯肼溶血性贫血血虚证模型;至今已有慢性失血法、吗啡成瘾法、低压缺氧法、过劳法、小剂量γ射线照射气虚证,禁食加寒冷虚损,胶体碳粒封闭机体网状内皮系统“正气虚”,溶血性贫血、失血性贫血、失血性贫血加营养不良、失血性贫血加饥饱失常、再生障碍性贫血血虚证等各类气血虚证模型。金雁认为失血法模型中,血红蛋白低与不低是鉴别气虚与血虚的标准之一。张早华发现高原气虚发病率随海拔高度升高和移居高原年限延长而递增。(2)非血红蛋白性血虚证模型气虚证模型要注意与各脏腑气虚证模型的关系。慢性失血法气虚证模型体温稍高,耳根稍热,与临床吻合。应探讨非贫血性血虚证模型的研制。血虚证模型已用于气血注射液、痛经Ⅰ号等中药药理研究。7.血液瘀积受病血瘀证为气虚、气滞、热毒、血寒等原因,使血液运行受阻,瘀积于经脉或器官之内;或各种原因使离经血液,不能及时排出消散而瘀滞于某一处所致。(1)建立适应病理生理的各类血脂证模型1974年山西医学院建立家兔腹腔内自身血凝块血瘀模型;1975年山西省中医研究所报道异丙肾上腺素所致心肌梗死血瘀模型;同年上海第一医学院病理生理教研室建立高分子右旋糖酐静脉注射致微循环障碍血瘀模型;至今已有全身性血液循环系统改变、腹腔血凝块、血栓形成、局部血液循环障碍、高脂性疾病、骨折及外伤、器官移植、衰老、胎儿宫内发育迟缓、辐射骨髓损伤、心肌缺血性改变、脑血管疾病、肺脏疾病、肾脏疾病、肾血管性高血压、肠粘连、肝硬变、盆腔静脉系瘀血、子宫内膜异位、慢性肾功能衰竭等各类血瘀证模型,以及血瘀证病证结合模型。近年来血瘀证模型有回归复合模型的趋势。(2)不同品种药物效血药浓度证模型的结果对不同模型制备建立的血瘀证模型的病理认识均要强调区别和比较。有研究发现,大肠杆菌内毒素法血瘀证模型为低凝高粘模型,金黄色葡萄球菌血瘀证模型为高凝高粘模型,地塞米松加大肠杆菌内毒素法血瘀证模型为高凝模型。血瘀证模型已用于冠心Ⅱ号、宫外孕Ⅱ号、川芎注射液、丹参注射液、水蛭等多种中药药理研究,以及宫外孕、动脉粥样硬化、颅内血肿等疾病的治疗研究。8.阴寒之邪,或组病阴邪寒热是辨证疾病性质的两个纲领。寒证多由外感阴寒之邪,或内伤久病,阳气耗伤,阴邪内盛所致。热证多由外感火热之邪,或七情化火,或饮食不节,积蓄为热,或阴虚阳亢所致。(1)寒证、热证的制备1970年代有实验表明,动物服用温补药组成的痰饮丸后,在较冷的环境和较热的环境中死亡率不同;1979年北京中医研究所用热性中药喂饲动物建立阴虚模型;1982年梁月华用寒凉药、温热药建立寒证、热证动物模型,并在以后对造型方药不断简化、改进[28~30];至今已有寒性和热性方药法虚寒证、虚热证,温度控制肝细胞培养法寒证、热证,自然体质法寒证、热证,补气法实热证,气候法寒证、热证,辛温燥热食物法虚热证、先天性阴虚证,热体加五三粉法内燥、寒体加蜂蜜猪油法内湿,饥饿和寒冷虚寒证模型,利血平、可乐亭、二乙基二巯基氨甲