快速鉴别砂土的方法

快速鉴别砂土的方法

砂仁是临床常用的中药。它来自江科豆坤阳春砂、绿壳砂和亚甲基砂。l.waetsenjen.海南沙木鱼刺l.w干燥成熟的果实具有益气、镇痛、健胃、消食、安顿呕吐等功效。砂仁在市售商品中伪品较多。《中国药典》从1990年版起采用提取挥发油进行薄层色谱鉴别,至2005年版未作修订,其实验耗时长,样品消耗量大。根据1990、1995、2000、2005年版中国药典及文献,砂仁目前的鉴别方法有:性状鉴别、显微鉴别、薄层色谱鉴别、GC-FTIR、GC-MS、凝胶电泳技术等。本文建立的方法,能快速检出砂仁指标成分乙酸龙脑酯,通过色谱指纹信息区别阳春砂和海南砂,并能分辨出阳春砂仁栽培变种大青苗和黄苗仔。1管drumminsp.薄层层析硅胶G,分析纯(青岛海洋化工厂);定量毛细管(DrummondScientificCo.USA.);乙酸龙脑酯对照品(由中国药品生物制品检定所提供,批号:0759-9001),其它试剂均为分析纯。2市场或分别提供药品检验所提供收集的26份砂仁药材分别来自于产地广东省阳春县蟠龙山地区砂仁种植户、广州市清平药材市场或分别由深圳、韶关、清远、肇庆、江门、海南省等药品检验所提供。经鉴定为阳春砂AmomumvillosumLour.、海南砂AmomumlongiligulareT.L.Wu.、进口砂、艳山姜A.zerumbetBurttetSmith。3方法和结果3.1供试品溶液配制取砂仁药材,去壳,取种子团粉末(通过三号筛)1g,用70%乙醇润湿粉末,加石油醚(60~90℃)5ml,超声处理30min(必要时加冰,控制水温),滤过,取滤液作为供试品溶液。另精密吸取乙酸龙脑酯对照品适量,加乙醇制成每1ml含10μl的溶液。照薄层色谱法(《中国药典》2005年版一部附录ⅥB)试验,吸取砂仁药材溶液和乙酸龙脑酯对照品溶液各5μl,分别点于同一硅胶G薄层板上,以环己烷-醋酸乙酯(22∶1)为展开剂,展开,取出,晾干,喷以5%香草醛硫酸溶液,在105℃加热至斑点显色清晰。3.2提取前区域斑线的确定见图1。供试品色谱在与对照品色谱相应位置上显相同颜色的斑点;药典方法提取挥发油得到仅3个斑点,本文建立的提取方法能得到10~12个斑点,与药典规定的提取挥发油所得的色谱相比,斑点更加丰富、可辨,具有明显的指纹差异。而阳春砂比海南砂多1~2个色谱斑点;同时自产地收集的阳春砂仁栽培变种大青苗与阳春砂仁在薄层色谱上有所区别。4讨论4.1超声处理是试验品色谱的基础。在百分本文采用石油醚和乙醚两种溶剂,对以下提取方式进行比较:①浸渍过夜;②超声处理30min;③70%乙醇润湿后加溶剂超声处理30min;④药典方法(提取挥发油)。由挥发油提取的供试品色谱除原点外只有3个斑点,而其他三种方法提取的供试品色谱均为10~12个斑点。其中①浸渍过夜;②超声处理30min所得的色谱乙酸龙脑酯大小、颜色与对照品色谱斑点相比甚弱;用70%乙醇润湿后加溶剂超声处理30min得到的色谱图最为理想,其样品主斑点明显比其它提取方式的清晰,并具有丰富的指纹信息。4.2在提取溶剂的比较中采用石油醚(60~90℃)和乙醚两种溶媒,得到的色谱图相似,由于乙醚在超声处理时易挥发损失,故建议使用石油醚。4.3macheny-nage的hplus-ferting-20高效板曾使用①硅胶G自制板;②MACHERY-NAGEL的DC-FertigplattenSILG-25(普通板);③MACHERY-NAGE的HPTLC-FertigplattenNano-DURASIL-20(高效板);④普通预制板(烟台市化学工业研究院);⑤高效预制板(烟台市化学工业研究院);⑥硅胶G预制板(MERCK),色谱效果总体相似,以硅胶G自制板首选,其次为MN普通板、MN高效板。4.4色谱大小对从土砂中砂片的色谱影响来自产地种植户的阳春砂与来自清平药材市场和各药检所收集的砂仁色谱相差不大;艳山姜(购自清平药材市场)所显示的斑点有8个,但乙酸龙脑酯斑点极弱;进口砂所显示的斑点有9个,乙酸龙脑酯主斑点较弱。4.5砂大青苗和阳春砂黄苗仔本文从产地种植户处收集到阳春砂仁有大青苗(正种)及黄苗仔(栽培变种)。文献曾以电镜扫描种子表面纹理特征和果皮内表面纹理特征进行鉴别;文献则主要根据药材性状将栽培变种分为长果型和圆果型,并以电镜扫描花粉粒的特征鉴别它们,但认为这两品种的差异是否稳定尚需进一步调查和研究。参考文献描述,本文收集到的样品,阳春砂大青苗为长果型,阳春砂黄苗仔为圆果型,两者在薄层色谱上有区别,本文首次在成分上区别两栽培变种,为阳春砂的种质鉴定提供了新依据。1.阳春砂(黄苗仔):阳春三丫岭种植户Ⅰ;2.阳春砂(大青苗):阳春三丫岭种植户Ⅱ;3.阳春砂:阳春泡虎顶种植户;4.阳春砂:阳春拧拓岑盅种植户;5.阳春砂:阳春猪笼坑种植户;6.阳春砂:阳春坑仔种植户;7.阳春砂:阳春下塘种植户;8.海南砂:购自清平市场;9.砂仁药材:购自清平市场(高州产);10.砂仁药材:购自清平市场(广宁产);11.砂仁药材:购自清平市场(云南产);12.乙酸龙脑酯对照品:中检所;13.砂仁药材:分别由深圳、韶关、清远、肇庆、江门药检所收集,按《中国药典》方法挥发油提取,所得TLC均只有三个斑点;14.砂仁药材:深圳市药检所