食品添加剂的测定-抗氧化剂的测定

BHA、BHT含量的测定（气相色谱法）

技能点：标准溶液的配制BHA、BHT标准品准备二BHA、BHT标准储备液的配制三BHA、BHT标准使用液的配制四目录仪器准备一仪器准备一仪器规格仪器规格电子天平0.0001g刻度移液管1mL、5mL、10mL冰箱4℃烧杯100mL容量瓶10mL、50mL玻璃棒移液枪试剂瓶BHA、BHT标准品准备二标准品纯度BHA≥99.0%BHT≥99.3%BHA、BHT标准储备液的配制（1mg/mL）三定容至50mLBHA、BHT标准储备液（1mg/mL）准确称取BHA、BHT标准品各50mg（精确到0.1mg），用乙酸乙酯和环己烷混合溶液定容至50mL，配置成1mg/mL的储备液。4℃标准储备液于4℃冰箱中避光保存。BHA、BHT标准使用液的配制四吸取BHA、BHT标准储备液0.1mL、0.5mL、1.0mL、2.0mL、3.0mL、4.0mL、5.0mL于一组10mL容量瓶中，用乙酸乙酯和环己烷混合溶液定容。此标准系列的浓度为0.01mg/mL、0.05mg/mL、0.1mg/mL、0.2mg/mL、0.3mg/mL、0.4mg/mL、0.5mg/mL，现配现用。0.05mg/mL0.1mg/mL0.3mg/mL0.5mg/mL0.2mg/mL0.4mg/mL0.01mg/mLBHA、BHT含量的测定

技能点：测定原理与试剂配制测定原理一适用范围二试剂配制三目录测定原理样品中的抗氧化剂用有机溶剂提取、凝胶渗透色谱（GPC）净化后，用气相色谱氢火焰离子化检测器检测，采用保留时间定性，外标法定量。一适用范围1.本法适用于食品中BHA、BHT含量的测定。2.测定依据：GB5009.32-2016第四法（气相色谱法）。二试剂配制1.试剂2.仪器准备3.试剂配制4.标准品三BHA、BHT含量的测定（1）环己烷（C6H12）（2）乙酸乙酯（CH3COOCH2CH3）（3）石油醚：沸程30℃～60℃（重蒸）（4）乙腈（CH3CN）（5）丙酮（CH3COCH3）（6）水：GB/T6682规定的一级水1.试剂（除另有说明，本法所用试剂均为分析纯）仪器规格仪器规格量筒50mL玻璃棒烧杯250mL试剂瓶2.仪器准备BHA、BHT含量的测定乙酸乙酯和环己烷混合溶液（1＋1）：量取50mL乙酸乙酯和50mL环己烷混匀。3.试剂配制：乙酸乙酯和环己烷混合溶液（1＋1）BHA、BHT含量的测定50mL环己烷50mL乙酸乙酯乙酸乙酯和环己烷混合溶液（1＋1）4.标准品BHA、BHT含量的测定BHA标准品，纯度≥99.0%。BHT标准品，纯度≥99.3%。BHA、BHT含量的测定（气相色谱法）

技能点：试样溶液的测定试样处理三净化四色谱参考条件五标准曲线的制作六试样溶液的测定七目录试样制备二仪器与设备一仪器与设备一仪器规格仪器规格气相色谱仪配氢火焰离子化检测器（FID）涡旋振荡器凝胶渗透色谱仪（GPC）或可进行脱脂的等效分离装置粉碎机分析天平0.01g和0.1mg有机系滤膜孔径0.45μm旋转蒸发仪离心管50mL试样制备固体或半固体粉碎混匀，然后用对角线法取四分之二或六分之二，或根据试样情况取有代表性试样，密封保存；液体样品混合均匀，取有代表性试样，密封保存。二试样处理三3.1.油脂样品3.2.油脂含量较高或中等的样品（油脂含量15%以上的样品）3.3油脂含量少的试样（油脂含量15%以下的样品）和不含油脂的样品（如口香糖等）试样处理：油脂样品3.1定容至10.0mL混合均匀的油脂样品，过0.45μm滤膜后，准确称取0.5g（精确至0.1mg），用乙酸乙酯和环己烷的混合溶液定容至10.0mL，混合均匀待净化。0.45μm滤膜等待净化试样处理：油脂含量较高或中等的样品3.2定容至10.0mL根据样品中油脂的实际含量，称取5g混合均匀的样品，置于250mL具塞锥形瓶中，加入适量石油醚，使样品完全浸没，放置过夜，用快速滤纸过滤后，旋转蒸发回收溶剂，得到的油脂用乙酸乙酯和环己烷的混合溶液定容至10.0mL，混合均匀待净化。等待净化试样处理：油脂含量少的试样3.3称取1g（精确至0.01g）试样于50mL离心管中，加入5mL乙腈饱和的正己烷溶液，涡旋1min充分混匀，浸泡10min。加入5mL饱和氯化钠溶液，用5mL正己烷饱和的乙腈溶液涡旋2min，3000r/min离心5min，收集乙腈层于试管中，再重复使用5mL正己烷饱和的乙腈溶液提取2次，合并3次提取液，加0.1%甲酸溶液调节pH=4，待净化。重复提取2次，合并3次提取液，调节酸度，等待净化加入5mL乙腈饱和的正己烷溶液涡旋1min，浸泡10min加入5mL氯化钠溶液涡旋2min3000r/min，离心5min净化四将试样处理中得到的试样经凝胶渗透色谱装置净化，收集流出液蒸发浓缩至近干，用乙酸乙酯和环己烷混合溶液定容至2mL，进气相色谱仪分析。不同试样的前处理需同时做试样空白试验。色谱参考条件五（1）色谱柱：5%苯基-甲基聚硅氧烷毛细管柱，柱长30m，内径0.25mm，膜厚0.25μm，或等效色谱柱。（2）进样口温度：230℃。（3）升温程序：初始柱温80℃，保持1min，以10℃/min升温至250℃，保持5min。（4）检测器温度：250℃。（5）进样量：1μL。（6）进样方式：不分流进样。（7）载气：氮气，纯度≥99.999%，流速1mL/min。标准曲线的制作将标准系列工作液分别注入气相色谱仪中，测定相应的抗氧化剂，以标准工作液的浓度为横坐标，以响应值（如：峰面积、峰高、吸收值等）为纵坐标，绘制标准曲线。六试样溶液的测定将试样溶液注入气相色谱仪中，得到BHA、BHT的响应值，根据标准曲线得到待测液中BHA、BHT的浓度。七式中：X——试样中抗氧化剂含量，mg/kg；ρ—