槐角多糖含量测定方法的研究

槐角多糖含量测定方法的研究

【关键词】紫外分光光度法槐角多糖提取含量测定

多糖类化合物是多种中草药的有效成分之一，具有多种生物活性。某些多糖不但具有抗癌、抗炎、抗病毒、抗衰老等作用，还是理想的免疫增强剂。目前对多糖的研究不断深入，而且不断有新的多糖被发现，但从槐角中提取多糖还未见有文献报道。我们从槐角中提取出多糖，并测定了槐角多糖的含量。

1材料与方法

仪器与试剂UV-265WF紫外-可见分光光度计;722型分光光度计。苯酚试剂:苯酚200g加铝片和碳酸氢钠g，蒸馏收集180～182℃馏分。称取30g加蒸馏水溶解，定容于500ml容量瓶中，放入棕色瓶中，冰箱中保存备用。其他试剂均为分析纯。样品槐角于石家庄市冬季采摘，常水清洗，去除杂质，80℃干燥去除水分，通风阴凉处保存。经鉴定符合中国药典2000年版槐角项下规定。方法

标准曲线的制备取干燥的葡萄糖标准品100mg，加水溶解并定容至于100ml。精密量取标准液10μl、20μl、40μl、60μl、80μl、100μl，分别置具塞试管中，加蒸馏水稀释至，摇匀，加6%苯酚溶液1ml，迅速加浓硫酸5ml，室温放置40min，以蒸馏水，1ml苯酚液，5ml浓硫酸混合液按上述操作做空白，用紫外-可见分光光度法，在490nm波长处测定吸收度，对测得数据进行线性回归，回归方程为:A=+，相关系数r=。

换算因素的测定精密称取60℃干燥至恒重的槐角多糖精制品35mg，置100ml容量瓶中，加入少量蒸馏水溶解，并稀释至刻度，摇匀，精密量取，照标准曲线制备项下的方法测定吸收度。从回归方程中求出多糖供试液中葡萄糖的浓度。按下式计算换算因素:f=W.。式中W为多糖重量，C为多糖稀释液中葡萄糖的浓度，D为多糖的稀释因素;测得f=。

供试液的制备取80℃干燥1h的槐角粉沫5g，精密称定，置索氏提取器中，加入10倍量95%乙醇提取3次，除去黄酮等醇溶性杂质，每次2h，药渣置通风处自然晾干后置烧瓶中，加水50ml，水浴提连续提取3次，每次2h，提取液合并，高速离心后过滤，滤液逆向流水透析，除去小分量物质及色素，透析内液定容至500ml，得供试液。

稳定性实验取样品溶液按标准曲线制备项下的方法测定吸光度，每隔lh测定一次，结果表明5h内稳定性良好。

回收率测定精密称取槐角粉末，加入槐角多糖，再于索氏提取器中用95%乙醇回流2h，残渣溶剂挥去后，连续用水回流2h，反复洗至250m1容量瓶中定容。摇匀后，精确移取lml，按绘制标准曲线方法测其吸光度值，按样品测定方法进行测定。计算多糖含量、平均回收率为%，RSD=%。

含量测定精密量取供试品液，加水，按标准曲项下方法操作，测定吸收值，从回归方程中求出供试液中葡萄糖的含量。按下式计算样品中多糖含量。

多糖含量=×100W，其中C为供试液中葡萄糖的浓度，D为供试液的稀释因素，f为换算因素，W为供试样品重量。测得多糖平均含量为%。

2讨论

多糖在强酸作用下水解生成单糖，并迅速脱水生成糠醛，糠醛与酚性物质如苯酚缩合成有色化合物，反应迅速，完全，有色物质稳定，并且有色物生成量与多糖浓度存在定量关系，这样用分光光度法在适当波长处可以得到多糖含量。本法简便快速，易行。

多糖广泛存在于自然界，是多种中草药的有效成分之一，具有多种生物活性

［1，2］，是理想的免疫增强剂。它能促进T细胞、B细胞、NK细胞、Mφ细胞等免疫细胞的功能，还能促进白介素、干扰素、肿瘤坏死因子等细胞因子的产生。同时槐角中还含有大量的黄酮类化合物。目前对多糖和黄酮的研究方兴未艾，多糖和黄酮的作用机理以及生物功能与结构的关系的研究不断深入，而且不断有新的多糖类物质被发现。我们仅测定了槐角中多糖的含量，槐角多糖的结构组成和生理活性有待进一步研究。

【参考文献】

1雷晓凌，赵树进，范秀萍，等.弯斑蛸多糖对