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青霉素酰化酶的分离纯化青霉素酰化酶的分离纯化1青霉素青霉素是常见抗生素之一。来源于点青霉、产黄青霉等真菌。对革兰氏阳性菌的生长有抑制作用R--COHNCOoH青霉素青霉素2青霉素的分类R--COHNCOoH青霉素F:R为cH3CH2CH=cHCH2青霉素G为青霉素置R为0○-CH青霉素KR为cH3(CH2)CH2青霉素FR为CH3(OCH2)2CE2青霉素v;R为<○>-0CH2氨节青霉素,R为⑨H羟氨卡吉霉素.R为H-gH青霉素的分类3青霉素的代谢途径a-氨基己二酸半胱氨酸缬氨酸ACVSa-氨基己二酰半胱氨酰缬氨酸IPNS异青霉素NAT青霉素青霉素的代谢途径4AT是一系列不同的酶。不同的AT催化不同的酰基转移反应生成不同的青霉素添加苯乙酸相应的AT催化它与异青霉素N反应生成青霉素G■添加苯氧乙酸时,相应的AT催化它与异青霉素N反应生成青霉素VAT是一系列不同的酶。不同的AT催化不同的酰5青霉素酰化酶■1950年,日本科学家发现产黄青霉和米曲霉的菌丝可以分解青霉素得苯乙酸和另一种有机物(后被证实为6APA)经研究,这一反应由青霉素酰化酶催化除了丝状真菌外,一些细菌和酵母中也检测到青霉素酰化酶的活性青霉素酰化酶6青霉素酰化酶的结构青霉素酰化酶的结构差异较大。大肠杆菌(Escherichiaco/)青霉素G酰化酶有个a亚基和一个β亚基球形芽胞杆菌(Bac∥ssphaericus)的青霉素酰化酶是一个四聚体青霉素酰化酶的结构7ArcGfromEcoli(PDB1PNK)(24].a-andB-subunitsareshownctively.CatalyticBSertresidueandCa*ionareshowninredandgreen,respecArc8Fig.5.StructureoftheactiveheterodimerofPA-GfromAfaecalis(PDB3K3W)C-andB-subuniyellowanddarkblue,respectively.CatalyticBSer1redueandCai*ionareshowninredandgreen,respectivelyDisulfidebondinB-subunitbetweenresiduesCys492andCys525inwild-typeenzymeisshowninmagentaInsertinrightpartoffigureshowsfixationofN-terminusofa-subunitandC-terminusofb-subunitduetocreationofnewdisulfidebond(showninorange)afterdoublemuta-tionaQ3C/RP751cFig.5.Structureoftheactiv9催化的反应R--COHN∠,青霉素酰化酶H2NRCOoHCooH青霉素6-APA催化的反应10青霉素酰化酶的分离纯化课件11青霉素酰化酶的分离纯化课件12青霉素酰化酶的分离纯化课件13青霉素酰化酶的分离纯化课件14青霉素酰化酶的分离纯化课件15青霉素酰化酶的分离纯化课件16青霉素酰化酶的分离纯化课件17青霉素酰化酶的分离纯化课件18青霉素酰化酶的分离纯化课件19青霉素酰化酶的分离纯化课件20青霉素酰化酶的分离纯化课件21青霉素酰化酶的分离纯化课件22青霉素酰化酶的分离纯化课件23青霉素酰化酶的分离纯化课件24青霉素酰化酶的分离纯化课件25青霉素酰化酶的分离纯化课件26青霉素酰化酶的分离纯化课件27青霉素酰化酶的分离纯化课件28青霉素酰化酶的分离纯化课件29青霉素酰化酶的分离纯化课件30青霉素酰化酶的分离纯化课件31青霉素酰化酶的分离纯化课件32青霉素酰化酶的分离纯化课件33青霉素酰化酶的分离纯化课件34青霉素酰化酶的分离纯化课件35青霉素酰化酶的分离纯化课件36青霉素酰化酶的分离纯化课件37青霉素酰化酶的分离纯化课件38青霉素酰化酶的分离纯化课件39青霉素酰化酶的分离纯化课件40青霉素酰化酶的分离纯化课件41青霉素酰化酶的分离纯化课件42青霉素酰化酶的分离纯化课件43青霉素酰化酶的分离纯化课件44青霉素酰化酶的分离纯化课件45青霉素酰化酶的分离纯化课件46青霉素酰化酶的分离纯化课件47青霉素酰化酶的分离纯化课件48青霉素酰化酶的分离纯化课件49青霉素酰化酶的分离纯化课件50青霉素酰化酶的分离纯化课件51青霉素酰化酶的分离纯化课件52青霉素酰化酶的分离纯化课件53青霉素酰化酶的分离纯化课件54青霉素酰化酶的分离纯化课件55青霉素酰化酶的分离纯化课件56青霉素酰化酶的分离纯化课件57青霉素酰化酶的分离纯化课件58青霉素酰化酶的分离纯化课件59青霉素酰化酶的分离纯化课件60青霉素酰化酶的分离纯化课件61青霉素酰化酶的分离纯化课件62青霉素酰化酶的分离纯化课件63青霉素酰化酶的分离纯化课件64青霉素酰化酶的分离纯化课件65青霉素酰化酶的分离纯化课件66青霉素酰化酶的分离纯化课件67青霉素酰化酶的分离纯化课件68青霉素酰化酶的分离纯化课件69青霉素酰化酶的分离纯化课件70青霉素酰化酶的分离纯化课件71青霉素酰化酶的分离纯化课件72青霉素酰化酶的分离纯化课件73青霉素酰化酶的分离纯化课件74青霉素酰化酶的分离纯化课件75青霉素酰化酶的分离纯化课件76青霉素酰化酶的分离纯化课件77青霉素酰化酶的分离纯化课件78青霉素酰化酶的分离纯化课件79青霉素酰化酶的分离纯化课件80青霉素酰化酶的分离纯化课件81青霉素酰化酶的分离纯化课件82青霉素酰化酶的分离纯化课件83青霉素酰化酶的分离纯化课件84青霉素酰化酶的分离纯化课件85青霉素酰化酶的分离纯化课件86青霉素酰化酶的分离纯化课件87青霉素酰化酶的分离纯化课件88青霉素酰化酶的分

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