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文档简介

WidefieldConfocalMultiphoton白炽灯的原理电子吸收能量跃迁到高能级高能级不稳定高能级电子回到基态，发出光子单光子吸收与荧光显微镜荧光分子吸收一种光子跃迁到高能级高能级电子回到基态，发出荧光多光子效应

高能量的激发光照射荧光分子，荧光分子短时间内吸收两个光子跃迁到高能级高能级电子回到基态，发出荧光多光子显微镜双光子显微镜（Leica）多光子显微镜优势—高辨别率双光子效应是低概率事件，需要很高的激光能量，所以只有焦点处会发生需要采用高能量、短脉冲（预防样品发烧、提升信噪比）的飞秒激光器双光子显微镜宽场显微镜多光子显微镜优势—高辨别率

未发生双光子效应的区域，不会激发荧光多光子显微镜优势—大深度双光子显微镜穿透深度深与双光子效应无关，而是因为双光子显微镜采用的是长波长（红外）的激光所以，三光子激光器的波长更长，穿透深度更深多光子显微镜优势—大深度

选择波长应处于组织吸收较少的窗口，一般选择700-900nm之间多光子显微镜优势—伪彩色多波长荧光的叠加多光子显微镜研究—脉冲压缩提升信噪比多光子显微镜研究—自适应校正降低组织散射的影响提升辨别率多光子显微镜研究—三光子多光子显微镜研究—微型化北京大学程和平院士团队结论优势：大深度（800um）辨别率比宽场高微型化、同

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