高氟对鸡新成疫疫苗免疫效果的影响

高氟对鸡新成疫疫苗免疫效果的影响

小型氟脲醇对动物体内有许多生理作用，但也是具有平均毒性的元素。摄入过量会引起中毒。在养殖业中,氟中毒过去多见于牛羊等大家畜,但是近年来随着养禽业的迅速发展,因高氟饲料引起的家禽氟中毒的报道屡见不鲜。众多研究表明,畜禽氟中毒是一种多器官受损害性疾病,高氟对动物的肾脏、肝脏、神经系统、内分泌系统、免疫系统、软组织等都有损害,而并非仅限于骨骼和牙齿。本试验采用不同氟化物人工诱发雏鸡氟中毒,以研究高氟对鸡新成疫(ND)疫苗免疫效果的影响。为探讨氟中毒对家禽免疫机制的影响提供科学依据。1材料和方法1.1实验鸡的饲养自莱阳市种鸡场购进1日龄罗曼褐壳蛋公雏鸡215只,随机分为7组,对照组35只,各试验组30只。实验鸡全部饲养于电热自控温层叠育雏笼中,按常规饲养管理方法饲养,自由饮水和采食。试验期共73天,1～6日龄为预试期。1.2氟含量的测定本试验对照组喂基础日粮,其营养水平为:ME12.01MJ/kg,粗蛋白18.94%,钙1.06%,总磷0.73%,氟含量为48.9mg/kg。实验组分别在基础日粮中添加氟化钠和氟化钙,各氟源设3组,3组中氟的添加水平分别为250mg/kg,500mg/kg,1000mg/kg,本试验设第1组为对照组,第2、3、4组加氟化钠(见表1),第5、6、7组加氟化钙(见表1)。各试验组于66日龄开始至73日龄,改喂基础日粮。1.3疫苗和免疫1.3.1克林威治鸡新城疫活疫苗(LaSota),批号:2074,上海市松江生物药品厂生产。1.3.2i效价log雏鸡出壳未接种任何疫苗,1日龄采血5份,测母源抗体HI效价为6.2(log2);14日龄采血5份,血清效价为3.2(log2)。于当日实施免疫,疫苗用生理盐水稀释,滴鼻、眼各1滴;37日龄按同样方法作第2次免疫。1.4心脏功能测定1.4.1各组分别于21日龄、36日龄、51日龄、66日龄、73日龄各随机抽样5只鸡称重,然后用灭菌注射器心脏采血,离心分离血清后-20℃保存待测;解剖取法氏囊、脾脏称重。1.4.2ND抗体水平检测采用微量HI试验法测定血清样品的抗体效价。1.5数据处理与统计分析各组取算术平均值,组间进行单因素方差分析,采用SSR法进行多重比较。2结果2.1各组鸡体重、法氏囊指数和脾脏指数的变化2.1.1各组鸡体重比较见表2。饲料中加氟化钠的各组鸡(第2、3、4组),在整个试验期,体重皆不同程度低于对照组,第2组与对照组间差异最小(P>0.05);第3组鸡于36、51日龄体重显著低于对照组(P<0.05),66、73日龄稍低于对照组,无显著差异(P>0.05);第4组鸡体重21日龄时低于对照组,但差异不显著,于36日龄以后至试验结束其体重极显著低于对照组(P<0.01)。饲料中加氟化钙的各组鸡(第5、6、7组),体重与对照组差异较小。第5组鸡体重,于21、73日龄略高于对照组,36、51、66日龄其体重略低于对照组,但各日龄其体重与对照组间无显著差异;第6组鸡体重,21日龄时略高于对照组,36日龄以后皆低于对照组,差异不显著;第7组鸡在各日龄体重皆低于对照组,其中66日龄与对照组间差异显著(P<0.05);其他时间两组间差异不显著。不同氟源但相同氟水平的组间体重比较;第2组和第5组饲料氟水平相同(250mg/kg),第5组鸡体重在各日龄皆高于第2组,但差异不显著;第3组和第6组饲料氟水平相同(500mg/kg),21日龄第3组体重略高于第6组,其他时间第6组鸡体重皆高于第3组,但差异不显著;第4组与第7组饲料氟水平相同(1000mg/kg),第7组鸡体重在各日龄皆不同程度高于第4组,21日龄时两组间无显著差异,36日龄、66日龄时两组间差异显著(P<0.05),51日龄、73日龄时两组间差异极显著(P<0.01)。2.1.2两组日龄组的比较添加氟化钠的鸡组,法氏囊指数与对照组有不同程度差异。第2组在各日龄皆稍低于对照组,但差异不显著;第3组于21、66、73日龄法氏囊指数皆低于对照组,而36、51日龄则稍高于对照组,差异皆不显著;第4组法氏囊指数各日龄皆明显低于对照组,其中21、51日龄与对照组差异显著(P<0.05),66日龄与对照组差异极显著(P<0.01)。添加氟化钙的鸡组,第5组法氏囊指数与对照组比较,无明显变化规律,差异不显著;第6组法氏囊指数于36、51、73日龄皆稍高于对照组,但差异不显著,66日龄则显著低于对照组(P<0.05);第7组于36、51日龄稍高于对照组,但差异不显著,66、73日龄则低于对照组,且66日龄时与对照组差异显著(P<0.05)。不同氟源相同氟水平的组间比较:第2组和第5组间无显著差异,但整个试验期第2组法氏囊指数皆低于第5组;第3组和第6组、第4组和第7组也存在同样的变化规律,即加氟化钠组的鸡法氏囊指数低于加氟化钙组,并且第4组于51日龄时法氏囊指数显著低于第7组(P<0.01)。2.1.3两组的脾指数比较添加氟化钠的鸡组,第2组无明显变化规律,与对照组无显著差异;第3组于66日龄显著低于对照组(P<0.05),其他时间无明显差异和变化规律;第4组鸡各日龄的脾指数皆低于对照组,且66日龄时与对照组差异显著(P<0.05)。添加氟化钙的鸡组,第5组脾指数在整个试验期皆略低于对照组,但差异不显著;第6组于36日龄略高于对照组,其他时间也略低于对照组,差异不显著;第7组鸡的脾指数除66日龄略低于对照组外,其他时间皆略高于对照组,但差异不显著。不同氟源相同氟水平的组间比较:第2组和第5组间无显著差异,但第2组各日龄略高于第5组;第3组和第6组间也无显著差异,且无明显的变化规律;第4组和第7组间差异较大,第4组各日龄脾指数皆低于第7组,且于51、66日龄时两组间差异显著(P<0.05)。2.2nd抗体检测不同日龄鸡血清ND抗体效价的变化见表3,各组间皆有不同程度差异。饲料添加不同剂量氟化钠组鸡的ND抗体效价:由表3可知,第2组鸡在整个试验期抗体水平皆高于对照组,但差异不显著(P>0.05);第3组鸡在试验前期(21日龄、36日龄)抗体水平略高于对照组,试验中后期(51～73日龄),较对照组低,但差异不显著;第4组鸡抗体水平在21日龄时稍低于对照组,自36日龄开始至试验结束,显著低于对照组(P<0.05),且于51、66、73日龄与对照组差异极显著(P<0.01)。饲料添加不同剂量氟化钙组鸡的ND抗体效价:第5组鸡在各日龄皆较对照组略高,差异不显著;第6组鸡于21、36、51日龄稍高于对照组,66日龄与对照组相同,但73日龄较对照组偏低,各日龄与对照组间无显著差异;第7组鸡于21日龄与对照组相同,于36日龄开始,皆不同程度低于对照组,其中51、66日龄抗体水平显著低于对照组(P<0.05),73日龄与对照组差异极显著(P<0.01)。不同氟源但相同氟水平组间的抗体水平比较:第2组和第5组间抗体水平没有明显变化规律,差异不显著;第3组和第6组21日龄时,第3组抗体水平略高于第6组,36日龄后,第6组高于第3组,但差异不显著;第4组和第7组在整个试验期,第7组鸡抗体水平皆不同程度高于第4组,其中51、66日龄两组间差异显著(P<0.05)。3讨论3.1高氟鸡体重生长情况本试验结果表明,随饲料氟含量的升高,鸡的体重有下降趋势,且添加氟化钠组随日龄增加鸡体重显著低于对照组。在本试验过程中观察到,高氟组鸡表现采食量减少,食欲差,生长缓慢,冠和肉垂颜色苍白。这说明,高氟对鸡的生长发育有严重影响。3.2氟添加量对鸡法氏囊、脾指数的影响据报道,胸腺、法氏囊及脾的重量可用来评价雏鸡的免疫状况,本试验结果表明:氟添加量为1000mg/kg对鸡的法氏囊、脾指数皆有显著影响。这一结果说明,高氟对鸡的免疫器官有一定程度损伤,这与张京田的报道类拟。3.3鸡nd抗体的变化本试验结果表明,氟添加量500mg/kg以下,对鸡ND抗体产生似乎有促进作用,这与成赐福等的报道一致。但高剂量氟则明显抑制抗体水平,说明高氟对鸡的免疫功能有抑制作用。3.4对鸡体的影响本试验选用NaF、CaF2为氟源,两者对鸡的体重、免疫器官指数及ND抗体水平的影响程度有很大差异。氟化钠对鸡体的影响作用较大。据报道,氟在机体内的吸收与其化合物的沉降系数有关,溶解度高的氟化物易于吸收,NaF中氟的吸收率可高达80%～90%,而溶解度差的氟化物吸收率低,CaF的吸收率30%～50%;两者对机体影响程度的差异,可能主要与其吸收利