第二讲 病原诊断的一般步骤_第1页
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第二讲病原诊断的一般步骤及方法一、采样1样品要新鲜2采样部位要富含病原二、直接检查1光镜检查如禽霍乱触片、牛焦虫抹片2电镜检查如鸡痘、羊痘样品的超薄切片优点直接、快速，有利于为防制赢得时间。不足只能做初步的定性，不能确诊，特别是不能对病原定型。三、病原分离1细菌分离（1）使用不同培养基如鸡大肠杆菌以麦康凯培养基、鸡白痢用SS琼脂，禽霍乱用血琼脂进行分离。（2）不同的培养条件如分离炭疽要在需氧条件下进行，而分离破伤风梭菌却要在严格的厌氧条件下进行。（3）污染样品要注意增菌如用含胆盐的培养基可用于沙门氏菌的增菌培养，低温可用于李氏杆菌的培养，链霉素可用于革兰氏阳性菌的培养。2病毒分离（1）要使用敏感的细胞或禽胚（2）细胞或禽胚不能有内源性污染（3）初次分离要盲传3代以上。四、病因推断

根据koch和Evans病因假说进行。1Koch假说（1）病原存在于该病的所有病例中（2）它不作为偶然性和非致病性寄生物存在于其它疾病中。（3）病原可从患该病的动物体内被分离成纯培养，反复传代，并能在易感动物体内复制该病。2Evans假说该理论1976年提出，其认为疾病是由多因素引起的，是一种多元病因理论。该假说考虑到致病因子、环境因素以及宿主因素在影响疾病分布过程中的相互作用。五、常用病原鉴定方法及原理1微生物学鉴定（1）细菌培养特性、染色、生化实验（2）病毒培养特性、电镜观察如细胞病变、空斑观察、病毒形态等2动物实验（1）鸡胚接种（2）易感动物复制疾病3血清学鉴定（1）凝集实验玻板凝集实验、试管凝集实验、间接血凝、乳胶凝集实验（2）沉淀实验琼脂扩散实验、免疫电泳（3）免疫标记技术ELISA包括直接ELIS

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