新高考适用2023版高考生物二轮总复习专题13基因工程与生物技术的安全性和伦理问题课件

专题十三基因工程与生物技术的安全性和伦理问题考纲导向·明目标核心考点一核心考点二考纲导向·明目标课标要求1．概述基因工程是在遗传学、微生物学、生物化学和分子生物学等学科基础上发展而来的2．阐明DNA重组技术的实现需要利用限制性内切核酸酶、DNA连接酶和载体三种基本工具3．阐明基因工程的基本操作程序主要包括目的基因的获取、基因表达载体的构建、目的基因导入受体细胞和目的基因及其表达产物的检测鉴定等步骤4．举例说明基因工程在农牧、食品及医药等行业的广泛应用改善了人类的生活品质课标要求5．概述人们根据基因工程原理，进行蛋白质设计和改造，可以获得性状和功能更符合人类需求的蛋白质6．举例说明依据人类需要对原有蛋白质结构进行基因改造、生产目标蛋白的过程7．转基因产品的安全性引发社会的广泛关注8．中国禁止生殖性克隆人9．世界范围内应全面禁止生物武器考查方向1．利用基因工程的操作原理构建基因表达载体2．以新情景考查基因工程的操作过程3．以基因工程为载体，结合发酵工程、细胞工程，进行综合运用4．蛋白质工程与基因工程的关系5．了解生物技术的安全性和伦理问题网络构建1．限制酶来源于原核生物，为什么不能切割自己的DNA分子？提示：限制酶具有特异性，即一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列，并在特定的位点上进行切割。限制酶不切割自身DNA的原因是原核生物DNA分子中不存在该酶的识别序列或识别序列已经被修饰。2．PCR技术的原理是什么？在PCR反应过程中需要两种引物，原因是什么？提示：DNA半保留复制。DNA由两条反向平行的脱氧核苷酸链组成，DNA聚合酶不能从头合成DNA，只能从3′端延伸DNA链。长句突破3．构建基因表达载体时，目的基因和载体分别使用两种限制酶切割，这样做的优点是什么？提示：用两种不同的限制性内切核酸酶进行切割能够使目的基因和载体定向连接，避免目的基因和载体分别发生自身环化以及目的基因与载体的反向连接，提高连接的有效性。4．如果转基因抗虫棉没有表现出抗虫性状，可能的原因是什么？提示：目的基因未成功导入；导入的目的基因未能成功表达；目的基因没有转录出mRNA；目的基因转录出的mRNA没有翻译成蛋白质。5．生产乳腺生物反应器构建基因表达载体时有什么特别要求？为什么？提示：必须把药用蛋白基因与乳腺蛋白基因的启动子等调控组件重组在一起。因为只有连接了乳腺蛋白基因的启动子，才能保证在雌性动物泌乳期相应的目的基因在其乳腺细胞内得以表达。6．利用转基因细菌能否直接生产干扰素等化学本质为糖蛋白的药物？为什么？提示：不能。因为细菌中只有核糖体，没有内质网和高尔基体等其他细胞器。7．你认为应该通过直接对蛋白质分子进行操作，还是通过对基因的操作来实现对天然蛋白质进行改造？原因是什么？提示：应该通过对基因的操作来实现对天然蛋白质的改造。主要原因有：①蛋白质具有十分复杂的空间结构，基因的结构相对简单，容易改造；②改造后的基因可以遗传给下一代，被改造的蛋白质无法遗传。8．归纳说明转基因食品的优点是什么？缺点是什么？提示：转基因食品的优点：(1)提高农产品营养价值，更快、更高效地生产食品。(2)应用转基因的方法，改变生物的遗传信息，拼组新基因，使今后的农作物具有高营养、耐贮藏、抗病虫和抗除草剂的能力。转基因食品的缺点：(1)转基因生物所引入的外源基因往往可以表达出蛋白质，可能会引起生物的代谢发生变化，造成该生物营养成分的改变。(2)转基因作物可能本身成为杂草。(3)转基因作物的亲缘野生种成为杂草或超级杂草。(4)转基因作物可能产生新的病毒疾病。(5)转基因作物对非目标生物的危害。(6)破坏生物多样性。(7)转基因作物对生态系统及生态过程的影响。(8)其他一些不可预计的风险。核心考点一运用技术和工程思维分析基因工程的原理、操作和应用1．比较记忆基因工程的3种工具2．理解掌握基因工程的4个操作步骤(1)利用PCR技术获取和扩增目的基因(2)基因表达载体的构建(3)将目的基因导入受体细胞(4)目的基因的检测与鉴定1．(2021·全国乙卷，38)用DNA重组技术可以赋予生物以新的遗传特性，创造出更符合人类需要的生物产品。在此过程中需要使用多种工具酶，其中4种限制性内切核酸酶的切割位点如图所示。考题解密回答下列问题：(1)常用的DNA连接酶有E.coliDNA连接酶和T4DNA连接酶。上图中____________________酶切割后的DNA片段可以用E.coliDNA连接酶连接。上图中_____________________________________酶切割后的DNA片段可以用T4DNA连接酶连接。(2)DNA连接酶催化目的基因片段与质粒载体片段之间形成的化学键是________________。EcoRⅠ、PstⅠEcoRⅠ、PstⅠ、SmaⅠ和EcoRⅤ磷酸二酯键(3)DNA重组技术中所用的质粒载体具有一些特征，如质粒DNA分子上有复制原点，可以保证质粒在受体细胞中能______________；质粒DNA分子上有_____________________，便于外源DNA插入；质粒DNA分子上有标记基因(如某种抗生素抗性基因)，利用抗生素可筛选出含质粒载体的宿主细胞，方法是______________________________________________________________________________。(4)表达载体含有启动子，启动子是指______________________________________________________________________________________。自我复制一至多个限制酶切位点用含有该抗生素的培养基培养宿主细胞，能够存活的即为含有质粒载体的宿主细胞位于基因首端的一段特殊DNA序列，是RNA聚合酶识别及结合的部位，能驱动转录过程【解析】

(1)限制酶EcoRⅠ和PstⅠ切割形成的是黏性末端，限制酶SmaⅠ和EcoRⅤ切割形成的是平末端，E.coliDNA连接酶来源于大肠杆菌，只能将双链DNA片段互补的黏性末端之间的磷酸二酯键连接起来，而T4DNA连接酶来源于T4噬菌体，可用于连接黏性末端和平末端，但连接效率较低。因此图中EcoRⅠ和PstⅠ切割后的DNA片段(黏性末端)可以用E.coliDNA连接酶连接，除了这两种限制酶切割的DNA片段，限制酶SmaⅠ和EcoRⅤ切割后的DNA片段(平末端)也可以用T4DNA连接酶连接。(2)DNA连接酶将两个DNA片段连接时形成磷酸二酯键。(3)质粒是小型环状的DNA分子，常作为基因的载体，首先质粒上含有复制原点，能保证质粒在受体细胞中自我复制。质粒DNA分子上有一个至多个限制性内切核酸酶的酶切位点，便于目的基因的导入。质粒上的标记基因是为了鉴定受体细胞中是否含有目的基因，具体做法是用含有该抗生素的培养基培养宿主细胞，能够存活的即为含有质粒载体的宿主细胞。(4)启动子是一段特殊结构的DNA片段，位于基因的首端，它是RNA聚合酶识别和结合的部位，有了它才能驱动基因转录出mRNA，最终获得需要的蛋白质。2．(2022·山东高考，25)某种类型的白血病由蛋白P引发，蛋白UBC可使P被蛋白酶识别并降解，药物A可通过影响这一过程对该病起到治疗作用。为探索药物A治疗该病的机理，需构建重组载体以获得融合蛋白FLAG－P和FLAG－P△。P△是缺失特定氨基酸序列的P，FLAG是一种短肽，连接在P或P△的氨基端，使融合蛋白能与含有FLAG抗体的介质结合，但不影响P或P△的功能。(1)为构建重组载体，需先设计引物，通过PCR特异性扩增P基因。用于扩增P基因的引物需满足的条件是_________________________________________________________。为使PCR产物能被限制酶切割，需在引物上添加相应的限制酶识别序列，该限制酶识别序列应添加在引物的________(填“3′端”或“5′端”)。两种引物分别与两条模板链3′端的碱基序列互补配对5′端(2)PCR扩增得到的P基因经酶切连接插入载体后，与编码FLAG的序列形成一个融合基因，如图甲所示，其中“ATGTGCA”为P基因编码链起始序列。将该重组载体导入细胞后，融合基因转录出的mRNA序列正确，翻译出的融合蛋白中FLAG的氨基酸序列正确，但P基因对应的氨基酸序列与P不同。据图甲分析，出现该问题的原因是__________________________________________________________________________________________________________________________________________。修改扩增P基因时使用的带有EcoRⅠ识别序列的引物来解决该问题，具体修改方案是____________________________________________________________________________________。在转录出的mRNA中，限制酶识别序列对应的最后两个碱基与P基因对应的第一个碱基构成一个密码子，导致读码框改变，翻译出的氨基酸序列改变

在EcoRⅠ识别序列前后增加碱基，使其碱基数目加上FLAG的碱基数目为3的倍数(3)融合蛋白表达成功后，将FLAG－P、FLAG－P△、药物A和UBC按照图乙中的组合方式分成5组。各组样品混匀后分别流经含FLAG抗体的介质，分离出与介质结合的物质并用UBC抗体检测，检测结果如图丙所示。已知FLAG－P和FLAG－P△不能降解UBC，由①②③组结果的差异推测，药物A的作用是___________________________；由②④组或③⑤组的差异推测，P△中缺失的特定序列的作用是__________________________________________________。促进UBC与FLAG－P的结合P△中缺失的特定序列是与UBC结合的关键序列(4)根据以上结果推测，药物A治疗该病的机理是________________________________________________________________________________________。

药物A促进UBC与FLAG－P的结合，从而促进蛋白P被蛋白酶识别并降解，达到治疗的目的【解析】

(1)引物是一小段能与DNA母链的一段碱基序列互补配对的短单链核苷酸，因此设计扩增P基因的引物，需要两种引物分别与两条模板链3′端的碱基序列互补。DNA聚合酶延伸时，是将脱氧核苷酸加到引物的3′端，为了不破坏目的基因，该限制酶识别序列应添加在引物的5′端。(2)融合基因转录出的mRNA序列正确，翻译出的融合蛋白中FLAG的氨基酸序列正确，但P基因对应的氨基酸序列与P不同，说明P基因翻译时出错。由图可看出，在转录出的mRNA中，限制酶识别序列对应的最后两个碱基与P基因对应的第一个碱基构成一个密码子，导致读码框改变，翻译出的氨基酸序列改变，可通过在EcoRⅠ识别序列前后增加碱基，使其碱基数目加上FLAG的碱基数目为3的倍数，这样能保证P基因转录出的mRNA上的读码框不改变，能够正常翻译。(3)①组仅添加UBC，处理后，用UBC抗体检测，不出现杂交带；②组添加UBC和FLAG－P，出现杂交带；③组添加UBC、药物A和FLAG－P，杂交带更加明显，说明药物A的作用是促进UBC与FLAG－P的结合。由②④组或③⑤组的差异在于②③组使用FLAG－P，出现杂交带；④⑤组使用FLAG－P△，不出现杂交带，据此推测P△中缺失的特定序列是与UBC结合的关键序列。(4)根据(3)的分析推测，药物A促进UBC与FLAG－P的结合，从而促进蛋白P被蛋白酶识别并降解，达到治疗的目的。变式一基因工程的基本操作工具和过程1．(2022·烟台模拟)戊型肝炎病毒是一种RNA病毒，ORF2基因编码的结构蛋白(pORF2)位于病毒表面，构成病毒的衣壳。我国科研人员利用基因工程技术，在大肠杆菌中表达pORF2，制备戊型肝炎疫苗，过程如图。下列关于该疫苗的叙述正确的是(

)变式突破AA．过程①得到的ORF2基因含有两个游离的磷酸基团B．要使过程①得到的ORF2基因与过程③形成的片段连接形成重组质粒，必须先使用同一种限制酶切割C．过程⑤需要用聚乙二醇处理大肠杆菌使其处于感受态D．重组基因表达载体上的启动子需来源于戊型肝炎病毒【解析】

①为逆转录过程，得到的ORF2基因两端各有1个游离的磷酸基团，A正确；为了防止目的基因与质粒反向连接或自身环化，可以先使用两种限制酶分别切割目的基因与质粒，B错误；过程⑤需要用钙离子处理大肠杆菌使其处于感受态，C错误；重组基因表达载体上的启动子来源于载体，目的基因应该插在启动子和终止子之间，D错误。1．(不定项)(2022·大连模拟)研究表明，服用α-干扰素在慢性乙肝、丙肝及部分肿瘤的治疗中有一定疗效。人参是一种名贵药材，具有较好的滋补作用。如图为科研人员制备能合成干扰素的人参愈伤组织细胞的流程，①～④表示相关的操作。若限制酶EcoRⅠ识别

，BamHⅠ识别

。下列选项正确的是()ACDA．步骤①中，利用PCR技术扩增干扰素基因时，设计引物序列的主要依据是干扰素基因两端的部分核苷酸序列B．在过程③中T-DNA整合到受体细胞的染色体DNA上C．科研人员在两种引物的一端分别加上了GAATTC和GGATCC序列，目的是方便后续的剪切和连接D．过程④中，科研人员最终未能检测出干扰素基因，其原因可能是干扰素基因未能导入人参愈伤组织细胞【解析】步骤①中，利用PCR技术扩增干扰素基因时，设计引物序列的主要依据是干扰素基因两端的部分核苷酸序列，A正确；过程③为将重组质粒导入根瘤农杆菌，而在侵染人参愈伤组织细胞时，T-DNA整合到受体细胞的染色体DNA上，B错误；由于需要用EcoRⅠ、BamHⅠ两种限制酶切割目的基因和质粒，因此科研人员还在两种引物的一端分别加上了GAATTC和GGATCC序列，以便于后续的剪切和连接，C正确；干扰素基因未能导入人参愈伤组织细胞或导入人参愈伤组织细胞的干扰素基因未能转录，这会导致不能检测出干扰素基因，D正确。变式二PCR技术原理和操作2．(2021·全国甲卷，38)PCR技术可用于临床的病原菌检测。为检测病人是否感染了某种病原菌，医生进行了相关操作：①分析PCR扩增结果；②从病人组织样本中提取DNA；③利用PCR扩增DNA片段；④采集病人组织样本。回答下列问题：(1)若要得到正确的检测结果，正确的操作顺序应该是____________(用数字序号表示)。④②③①(2)操作③中使用的酶是____________________________。PCR反应中的每次循环可分为变性、复性、________三步，其中复性的结果是______________________________________________。(3)为了做出正确的诊断，PCR反应所用的引物应该能与__________________特异性结合。(4)PCR(多聚酶链式反应)技术是指_______________________________________________________________________________________________________________________________。该技术目前被广泛地应用于疾病诊断等方面。Taq酶(耐高温的DNA聚合酶)延伸引物通过碱基互补配对与两条单链DNA结合病原菌DNA

一项根据DNA半保留复制的原理，在体外提供参与DNA复制的各种组分与反应条件，对目的基因的核苷酸序列进行大量复制的技术【解析】

(1)PCR技术可用于临床的病原菌检测，若要得到正确的检测结果，正确的操作顺序应该是④采集病人组织样本→②从病人组织样本中提取DNA→③利用PCR扩增DNA片段→①分析PCR扩增结果。(2)在用PCR技术扩增DNA时，DNA的复制过程与细胞内DNA的复制类似，操作③中使用的酶是Taq酶(耐高温的DNA聚合酶)，PCR反应中的每次循环可分为变性、复性、延伸三步，其中复性的结果是引物通过碱基互补配对与两条单链DNA结合。(3)DNA复制需要引物，为了做出正确的诊断，PCR反应所用的引物应该能与病原菌DNA特异性结合。(4)据分析可知，PCR(多聚酶链式反应)技术是指一项根据DNA半保留复制的原理，在体外提供参与DNA复制的各种组分与反应条件，对目的基因的核苷酸序列进行大量复制的技术。该技术目前被广泛地应用于疾病诊断等方面。3．(2022·景德镇模拟)研究人员利用小鼠的单倍体ES细胞(只有一个染色体组)，成功培育出转基因小鼠。其主要技术流程如图甲所示，请分析回答下列问题：图甲图乙(1)利用PCR技术可以扩增目的基因，PCR反应体系中除含缓冲液、模板DNA、dNTP(包含dATP、dCTP、dGTP、dTTP)、引物外，还应含有__________________________；引物应选用图乙中的____________(填图中字母)。(2)在基因工程操作步骤中，过程①②称为____________________。已知氨苄青霉素不能有效杀死小鼠细胞，而一定浓度的G418能有效杀死不具有Neor的小鼠细胞。结合图甲推测，过程①选用的两种限制酶是____________(填图中的编号)，③处的培养液应添加______________(填“氨苄青霉素”或“G418”)。耐高温的DNA聚合酶A和D基因表达载体的构建Ⅰ和ⅡG418(3)图中桑葚胚需通过______________技术移入代孕小鼠子宫内继续发育，进行该操作前需对受体小鼠进行______________处理。胚胎移植同期发情【解析】

(1)利用PCR技术可以扩增目的基因，PCR反应体系中除含缓冲液、模板DNA、四种脱氧核苷酸和引物以外，还应含有耐高温的DNA聚合酶；根据引物的延伸方向可知，应该选择引物A和D，可以扩增两种引物之间的序列。(2)过程①②即构建基因表达载体的过程。已知氨苄青霉素不能有效杀死小鼠细胞，而一定浓度的G418能有效杀死不具有Neor的小鼠细胞。故应保留G418抗性基因，过程①应该选用Ⅰ、Ⅱ进行切割，③处的培养液应添加G418，对目的基因进行筛选。(3)图中桑椹胚需通过胚胎移植移入代孕小鼠子宫内继续发育，进行胚胎移植前需对受体小鼠进行同期发情处理，让供受体处于相同的生理状态。核心考点二蛋白质工程与生物技术的安全性和伦理问题1．图解记忆蛋白质工程2．辨析与生物技术伦理问题有关的2组概念(1)治疗性克隆与生殖性克隆(2)试管婴儿与设计试管婴儿3．(2022·湖南高考，22)水蛭是我国的传统中药材，主要药理成分水蛭素为水蛭蛋白中重要成分之一，具有良好的抗凝血作用。拟通过蛋白质工程改造水蛭素结构，提高其抗凝血活性。回答下列问题：(1)蛋白质工程流程如图所示，物质a是______________________，物质b是____________。在生产过程中，物质b可能不同，合成的蛋白质空间构象却相同，原因是__________________。考题解密氨基酸序列多肽链mRNA密码子的简并性(2)蛋白质工程是基因工程的延伸，基因工程中获取目的基因的常用方法有____________________________、___________________________________________和利用PCR技术扩增。PCR技术遵循的基本原理是__________________。从基因文库中获取目的基因通过DNA合成仪用化学方法直接人工合成DNA双链复制(3)将提取的水蛭蛋白经甲、乙两种蛋白酶水解后，分析水解产物中的肽含量及其抗凝血活性，结果如图所示。推测两种处理后酶解产物的抗凝血活性差异主要与肽的________(填“种类”或“含量”)有关，导致其活性不同的原因是___________________________________________________________________________________。种类

提取的水蛭蛋白的酶解时间和处理的酶的种类不同，导致水蛭蛋白空间结构有不同程度破坏(4)若要比较蛋白质工程改造后的水蛭素、上述水蛭蛋白酶解产物和天然水蛭素的抗凝血活性差异，简要写出实验设计思路：______________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________。取3支试管，分别加入等量的蛋白质工程改造后的水蛭素、上述水蛭蛋白酶解产物和天然水蛭素；用酒精消毒，用注射器取同一种动物(如家兔)血液，立即将等量的血液加入1、2、3号三支试管中，静置相同时间，统计三支试管中血液凝固时间【解析】

(1)据分析可知，物质a是氨基酸序列多肽链，物质b是mRNA。在生产过程中，物质b可能不同，合成的蛋白质空间构象却相同，原因是密码子的简并性，即一种氨基酸可能有几个密码子。(2)蛋白质工程是基因工程的延伸，基因工程中获取目的基因的常用方法有从基因文库中获取目的基因、通过DNA合成仪用化学方法直接人工合成和利用PCR技术扩增。PCR技术遵循的基本原理是DNA双链复制。(3)将提取的水蛭蛋白经甲、乙两种蛋白酶水解后，据图可知，水解产物中的肽含量随着酶解时间的延长均上升，且差别不大；而水解产物中抗凝血活性有差异，经酶甲处理后，随着酶解时间的延长，抗凝血活性先上升后相对稳定，经酶乙处理后，随着酶解时间的延长，抗凝血活性先上升后下降，且酶甲处理后的酶解产物的抗凝血活性最终高于经酶乙处理后的酶解产物的抗凝血活性，差异明显，据此推测两种处理后酶解产物的抗凝血活性差异主要与肽的种类有关，导致其活性不同的原因是提取的水蛭蛋白的酶解时间和酶的种类不同，导致水蛭蛋白空间结构有不同程度破坏。(4)若要比较蛋白质工程改造后的水蛭素、上述水蛭蛋白酶解产物和天然水蛭素的抗凝血活性差异，实验设计思路为：取3支试管，分别加入等量的蛋白质工程改造后的水蛭素、上述水蛭蛋白酶解产物和天然水蛭素；用酒精消毒，用注射器取同一种动物(如家兔)血液，立即将等量的血液加入1、2、3号三支试管中，静置相同时间，统计三支试管中血液凝固时间。变式一整合蛋白质工程与基因工程4．(2022·日照模拟)新冠病毒通过其表面刺突蛋白(S蛋白)的受体结合域(RBD)与人体细胞表面的ACE2受体相互作用，侵入人体细胞。研究人员设计并合成了一种自然界不存在的LCB1蛋白药物，可识别并紧密结合S蛋白的RBD，以干扰新冠病毒的感染。下列叙述错误的是(

)A．LCB1可能与ACE2受体的某些区域结构类似B．LCB1可以依据S蛋白的RBD结构进行设计C．LCB1是通过细胞中原有的基因表达产生的D．LCB1的设计和合成是通过蛋白质工程实现的变式突破C【解析】由题干信息分析可知，新冠病毒是通过其表面的S蛋白的RBD与人体细胞表面的ACE2受体相互作用；而人工合成的LCB1可识别并紧密结合S蛋白的RBD，阻止S蛋白的RBD与ACE2受体结合，这说明LCB1可能与ACE2受体的某些区域结构类似，A正确；由题干信息分析可知，人工合成的LCB1可以与S蛋白的RBD结合，故LCB1可以依据S蛋白的RBD结构进行设计，B正确；LCB1是人工设计并合成的一种自然界不存在的蛋白质，故LCB1并不是通过细胞中原有的基因表达产生的，C错误；LCB1是人工设计并合成的一种自然界不存在的蛋白质，而基因工程在原则上只能生产自然界已存在的蛋白质，故LCB1的设计和合成是通过蛋白质工程实现的，D正确。5．(2022·曲阜模拟)基因工程抗体又称重组抗体，是指利用重组DNA及蛋白质工程技术对编码抗体的基因按不同需要进行加工改造和重新装配，经转染适当的受体细胞所表达的抗体分子。如图1为某研究所制备小鼠抗甲肝病毒抗体的流程图。回答下列问题。(1)实验室构建重组质粒时，为保证目的基因与载体的正确连接，过程①最好选择的限制酶是_____________________。(2)在重组质粒中，目的基因首端的启动子能够________________，从而驱动目的基因的转录。除启动子之外，重组质粒还应该包含____________________________________________。(3)为了筛选出导入目的基因的骨髓瘤细胞，可以在过程③的培养液中添加__________________，过程③所获得的细胞具有________________________________________________________________的特点。EcoRⅠ和BamHⅠ与RNA聚合酶结合终止子、目的基因、标记基因(复制原点)(适量的)青霉素既能大量增殖，又能产生足够数量的特定抗体(抗甲肝病毒抗体)(4)临床试验发现，过程⑤提取的小鼠抗甲肝病毒抗体具有外源性，容易被人体的免疫系统清除，从而导致其治疗效果大大降低。如图2抗体中的A区是与抗原特异性结合的区域，B区是引起人体免疫反应的区域。若要避免小鼠抗甲肝病毒抗体被人体免疫系统清除，请提出合理的改造思路：_________________________________________________________________________________________________________________________。

采用蛋白质工程技术将小鼠抗甲肝病毒抗体上的B区域进行改造，或替换成人体相应抗体的B区，进而降低人体对该抗体的免疫排斥【解析】

(1)图中EcoRⅤ会破坏目的基因，故不能用于切割目的基因，目的基因和载体共同含有的限制酶还有EcoRⅠ和BamHⅠ，为了保证目的基因与载体的正确连接，应该选择EcoRⅠ和BamHⅠ切割目的基因和载体。(2)RNA聚合酶可以与目的基因的启动子结合，驱动转录。重组质粒应该包含目的基因、启动子、终止子、标记基因等。(3)重组质粒中含有青霉素抗性基因，故可以在过程③的培养液中添加青霉素，来筛选导入目的基因的骨髓瘤细胞。过程③所获得的细胞是含有目的基因的骨髓瘤细胞，既能大量增殖，又能产生足够数量的抗甲肝病毒抗体。(4)由于B区是引起人体免疫反应的区域，若要避免小鼠抗甲肝病毒抗体被人体免疫系统清除，采用蛋白质工程技术将小鼠抗甲肝病毒抗体上的B区域进行改造，或替换成人体相应抗体的B区，进而降低人体对该抗体的免疫排斥。变式二借助生物技术的安全性和伦理问题，考查社会责任6．(2022·连云港模拟)2018年11月，世界首例免疫艾滋病的基因编辑婴儿诞生。这项研究用到了能够精确定位并修饰基因的基因编辑技术，即基因编辑时用约为头发二十分之一细的针把CaS9蛋白和特定的RNA引导序列注射到受精卵中，对CCR5基因进行修改，预期婴儿出生后能天然抵抗人类免疫缺陷病毒，关于该技术的安全性问题，下列说法错误的是(

)DA．基因编辑时，引导序列可能发生变异，导致剪切错误，造成不可预知的后果B．经过基因编辑的个体，有可能影响基因选择性表达，而导致其他疾病的产生C．依据我国法律，将基因编辑技术应用于治疗性克隆，符合人类伦理道德D．只要加强监管、完善法律法规、完善技术手段，不需担心基因编辑技术的安全性【解析】基因编辑时的引导序列是RNA，RNA的碱基序列改变可能导致识别错误，进而导致剪切错误，造成不可预知的后果，A正确；基因编辑后，基因的序列发生改变，基