枳实消痞汤对急性肝功能衰竭大鼠胃肠消化间期移行性运动复合波的影响

枳实消痞汤对急性肝功能衰竭大鼠胃肠消化间期移行性运动复合波的影响

胃肠胃肠间期运动的特征是周期性、时间同步、静态休息和收缩周期运动，即所谓的消化间期运动。以电活动为指标研究胃肠消化间期运动时,将这种周期性变化称为消化间期移行性肌电复合波(MMC),是研究胃肠运动形式及其规律的重要指标之一。其最重要的作用是保持小肠不淤滞,从而防止细菌过度生长。肝功能衰竭时的胃肠功能衰竭是各种并发症的起始因素,而MMC异常可能是肝性胃肠功能障碍的重要原因,临床观察发现,使用胃肠动力药物可缓解患者腹胀、恶心等临床症状。本实验通过检测急性肝功能衰竭大鼠胃窦、十二指肠和空肠的消化间期MMC,观察MMC变化,分析急性肝功能衰竭胃肠道症状与MMC的相互关系,以及探讨枳实消痞汤对大鼠消化间期(MMC)的影响,为临床肝功能衰竭严重消化道症状可能的治疗提供思路与线索。材料和方法一、实验动物5g选用纯种无特定病原体(SPF)雄性Wistar大鼠(体质量200～220g)60只(由中国军事科学院医学院实验动物中心提供)。随机分为6组,每组10只:正常对照组,急性肝功能衰竭组,急性肝功能衰竭莫沙比利组,急性肝功能衰竭给予枳实消痞汤高剂量组、中剂量组、低剂量组。二、枳实消手术汤D-氨基半乳糖(D-Gal)购自江苏启东久丰工贸有限公司;聚四氟乙烯薄膜包绕导线购自上海特种电缆公司;MP36多道生理记录仪购自美国BIOPAC公司。枳实消痞汤的组成:枳实、黄连各15g,厚朴(炙)12g,半夏曲、人参各9g,白术、茯苓、麦芽、炙甘草、干生姜各6g。药物制备方法:将枳实消痞丸原方用水煎煮两次,过滤,合并滤液,浓缩至200mL。用纯化水配制成75%(每10mL含生药7.5g),150%(每10mL含生药15.0g)300%(每10mL含生药30.0g)浓度分装,灭菌,低温保存,待用。三、实验方法(一)现代机械组naoh实验前不禁食,给予D-氨基半乳糖剂量2.0g/kg(将D-Gal溶于0.9%无菌生理盐水中,用1mol/LNaOH调pH至7.0左右,浓度为0.5g/mL)腹腔注射,正常对照组腹腔注射等量生理盐水。在给药后48～72h内进行实验并取肝脏标本进行病理检查,证实肝脏病变,达到急性肝功能衰竭诊断标准的数据纳入统计分析。(二)银丝电极内固定术实验前8h禁饮食,100g/L水合氯醛(400mg/kg)腹腔注射麻醉,除去腹部及颅部毛发,外科无菌操作下沿腹正中线行纵行切口,以24G针头作套针正切地穿过肠壁浆肌层,分别使每根导线的裸露段(约1mm)银丝停在胃肠肌层里作为记录电极。将导线用丝线扎紧,防止电极移动脱落。在胃窦(距幽门近端5mm)、十二指肠(距幽门远端5cm)和空肠(距幽门远端15cm)处各埋植银丝电极1对,每对电极之间相距约2～3mm,其连线与空腔脏器长轴垂直。所用电极为聚四氟乙烯薄膜包绕。外径0.5mm,长度15～20cm。将电极导线通过皮下隧道由后颈部引出,固定。缝合腹部及后颈部切口,给予葡萄糖生理盐水3mL补充失液量,术后经腹腔给予青霉素钠2万单位抗感染。禁食18h,分笼单独清洁饲养,自由进水和进食,饲养环境室温22℃,湿度60%,恢复3d。(三)灌胃给药剂量及经口给予莫沙比利低、中、高剂量组分别给予枳实消痞汤,相当于生药7.5g/kg,15.0g/kg和30.0g/kg,灌胃给药两次,早晚各一次,灌胃容量均为10mL/kg。即低剂量组每只大鼠给药0.5mL+纯净水1.5mL,中剂量组每只大鼠给药1mL+纯净水1mL,高剂量组每只大鼠给药2mL,急性肝功能衰竭组经口给予莫沙比利3.0mg/kg,3次/d。正常对照组给予纯净水。(四)mmc波将大鼠埋植电极恢复3d后,给予D-氨基半乳糖2.0g/kg腹腔注射,随即给予枳实消痞汤低、中、高剂量,在48～60h内测MMC波。肝功能衰竭莫沙比利组经口给药3.0mg/kg,3次/d,48～60h测MMC波。(五)动作电位起步电位特征分析根据负载有动作电位的起步电位的数量和动作电位的强弱将MMC分为4个不同的时相。Ⅰ相:在每个起步电位上都不负载,或偶尔发生动作电位,负载有动作电位的起步电位的数量不超过5%。Ⅱ相:在Ⅰ相之后,出现不规则的动作电位的起步电位数量超过5%,但低于95%。Ⅲ相:该时相具有突发突止的特点,几乎在每一个起步电位上都有持续的、高振幅的动作电位爆发,故负载有动作电位的起步电位数量超过95%以上。Ⅳ相:其特征是锋电活动和收缩活动的程度迅速减少,但负载有动作电位的起步电位数量仍超过5%,该时相是在Ⅲ相结束后再回到Ⅰ相之前的过渡期。四、指标差别描述采用SPSS13.0进行统计学分析,统计数据符合正态分布,结果采用均数±标准差描述,不符合正态分布,结果采用(中位数,四分位数间距)描述,组间指标差别检验采用单因素方差分析,组间两两比较采用LSD-t检验。若方差不齐,采用秩转换的方差分析。结果一、急性肝功血炎大鼠肝脏组织形态正常模型组大鼠在给药后48～72h,逐渐出现精神不振、萎靡、食欲差、反应迟钝、麻痹、呼吸困难、死亡等情况,急性肝功能衰竭大鼠死亡率高,72h内死亡率为60%左右,解剖后,正常对照组大鼠肝脏形态正常,色泽红润,表面细颗粒状,质地稍韧。急性肝功能衰竭组大鼠肝脏暗红色,表面色泽斑驳,有散在的出血点,切面有暗红色淤血。急性肝功能衰竭大鼠光镜下可见肝组织大块坏死,肝小叶结构破坏,坏死细胞总数超过90%,肝窦扩张充血,坏死以小叶中央区最为明显,坏死区可见充血和炎细胞浸润,汇管区炎细胞浸润,胆管增生。正常对照组大鼠肝脏结构正常、肝小叶结构清晰可辨(见图1)。二、各大鼠胃窦、胃肠和空肠mmc表达情况与急性肝功能衰竭组相比,莫沙比利组、枳实消痞汤高剂量组、中剂量组和低剂量组的胃窦、十二指肠、空肠MMCⅡ相均显著缩短(P值分别为0.001,0.001,0.001,0.002);与莫沙比利组相比较,枳实消痞汤高剂量组和中剂量组胃窦、十二指肠、空肠MMCⅡ相差异均没有统计学意义(P值分别为0.658,0.879),与低剂量组相比较,中剂量组的胃窦、十二指肠、空肠MMCⅡ相显著缩短(P=0.001);与急性肝功能衰竭组相比较,莫沙比利组、枳实消痞汤高剂量组、中剂量组胃窦、十二指肠、空肠MMCⅢ相持续时间均明显延长(P值分别为0.001,0.001,0.001);与莫沙比利组相比较,枳实消痞汤高剂量组和中剂量组胃窦、十二指肠、空肠MMCⅢ相持续时间差异均没有统计学意义(P值分别为0.567和0.441),枳实消痞汤高剂量组和中剂量组胃窦、十二指肠、空肠MMCⅢ相持续时间差异没有统计学意义(P=0.841),与低剂量组相比较,高剂量组和中剂量组胃窦、十二指肠、空肠MMCⅢ相持续时间明显延长,差异均有统计学意义(P=0.006,P=0.004);与急性肝功能衰竭组相比较,莫沙比利组、枳实消痞汤高、中、低剂量组的周期均显著缩短,差异有统计学意义(P值分别为0.001,0.001,0.001,0.001),与莫沙比利组相比较,枳实消痞汤高、中、低剂量对周期的改变差异均没有统计学意义(P=0.372,0.347,0.716);各组大鼠MMCⅠ相值、MMCⅡ相值、MMCⅢ相值、MMCⅣ相值以及周期值各组间差异均有统计学意义(F值分别为7.815,44.829,13.258,3.847,25.330;P<0.001,P<0.001,P<0.001,P<0.01,P<0.001)。-n-4-主神经原螯丸对家免离体肝脏功能的影响肝功能衰竭首先影响且最明显的是消化系统,尤其是胃肠运动、消化和吸收功能,并表现出相应症状。胃肠道是肝病影响最早、最严重的肝外器官,肝病愈重,胃肠功能障碍愈重,肝功能衰竭的患者常出现恶心、呕吐、厌食、腹胀等胃肠道衰竭的症状。目前,国内外对肝性胃肠功能不全的研究认为,肝性胃肠功能不全与神经-体液因素、肠道菌群上移、内毒素血症、门脉高压性肠病、消化道出血等因素有关。目前药物对胃肠MMC的影响有较多研究,急性肝内胆汁淤积时胃肠MMC节律短暂消失或周期延长;其原因可能与消化间期胆汁流量减少及TNF-α、IL-1Βd等炎症因子增多有关。胃动素是胃与肠内在的生长激素,增强胃与肠的蠕动,与MMCIII相的发生有密切的关系,60μg静脉给予胃动素受体激动剂,加速胃排空的早期阶段,胃动素影响食管、食管下段以及胃能动性。N-乙酰-5甲氧基色胺(Melatonin)是自分泌和旁分泌激素,不仅作用于上皮细胞和免疫系统,也作用于消化道的平滑肌细胞,低剂量的Melatonin可以改善胃肠通过和MMC,Melatonin增强MMC的周期模式但抑制肠峰值的活动。红霉素是一种非肽类胃动素受体激动剂,诱发十二指肠MMC的发生,同时也降低盲肠的传输时间。QingreLiqiGranule(QLG)可以通过调整胃部的电生理波改善消化功能不良患者的症状,增加胃蠕动,加快胃排空的功能。西布曲明有效抑制餐后小肠的收缩,不能改变直肠的节律,但有效增加直肠顺应性。肝功能衰竭时胃肠动力障碍患者病机多属肝郁气滞,运用疏肝解郁法治疗该患者有显著疗效。枳实消痞丸出自李东垣的《兰室秘藏》,原方消除痞满,健脾和胃,主治脾胃虚寒,寒热互结所致的心下痞满之证。方中枳、朴、连消导,诸药量重;参、术、苓、草之补寓于其中,专为攻不伤正而设,是中医行气消痞代表方剂。用治虚痞、厌食,证属脾胃呆滞虚羸,实中夹虚,以实为主。胃痞证与胃肠动力障碍所致的腹胀密切相关。现代医家从“脾胃虚弱,升降失司”,“寒热互结,气壅湿聚”的基本病机出发,将此方加减应用于多种胃肠道疾病,获得较好的疗效。实验研究,枳实消痞丸对家免离体小肠可因其功能状态和药物浓度的不同而表现出既促进胃肠运动,又可降低胃肠平滑肌张力、解除痉挛的双向作用。枳实消痞汤能提高红细胞乙酰胆碱酯酶活性及血浆胃动素水平,并能明显降低血浆胆囊收缩素(CCK)及胃底处CCK-A受体的数量,从而促进胃排空,改善消化不良症状。临床上盛为民用枳实消痞丸加减治疗慢性胃炎30例,梁开发应用枳实消痞丸随证加减治疗非溃疡性消化不良76例,赵晓山等用枳实消痞汤治疗恶性肿瘤化疗后恶心呕吐36例,卜子英等治疗外科腹部手术后并发症3例,其中1例为胃大部切除后排空障碍,出现上腹胀痛伴恶心呕吐症状。目前枳实消痞丸对肝功能衰竭患者消化间期MMC变化影响的文献报道不详。本研究结果表明,枳实消痞汤高、中、低和莫沙比利组均有缩