第4章 抗体制药 第4、5、6节_第1页
第4章 抗体制药 第4、5、6节_第2页
第4章 抗体制药 第4、5、6节_第3页
第4章 抗体制药 第4、5、6节_第4页
第4章 抗体制药 第4、5、6节_第5页
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文档简介

第四节基因工程抗体和

抗体工程抗体研究进展3个阶段：①1890年白喉抗毒素，多克隆抗体；②1975年杂交瘤技术单克隆抗体；③1994年基因工程抗体；一、噬菌体抗体库技术的

基本方法⒈获取目的基因⒉抗体库技术的载体⒊淘筛⒋表达与鉴定二、噬菌体抗体库技术的

特点⒈模拟天然全套抗体库⒉避开了人工免疫和杂交瘤技术⒊可获得高亲和力的人源化抗体三、基因工程抗体表达⒈原核细胞表达⒉真核细胞表达⒊转基因植物表达⒋转基因动物表达第五节抗体诊断试剂一、血清学鉴定用的抗体类试剂⒈鉴定病原菌的抗体试剂⑴常用诊断血清的品种和用途①沙门氏菌属诊断血清②志贺氏菌属诊断血清③病原性大肠埃希氏菌诊断血清⑵诊断血清的制备步骤①制备细菌抗原②免疫动物和制备抗体血清⑶诊断血清诊断方法⒉乙型肝炎病毒表面抗原的反向被动血凝诊断试剂⒊妊娠诊断试剂⒋抗ABO血型系统血清二、免疫标记技术用的抗体

类试剂⒈荧光抗体诊断试剂⑴荧光抗体的制备⑵免疫荧光测定方法⒉免疫酶抗体诊断试剂⑴免疫酶染色法用抗体诊断试剂⑵酶免疫测定用抗体诊断试剂①HBsAg酶标诊断试剂②HBeAg酶标诊断试剂③HAVAg（甲型肝炎病毒抗原）酶标诊断试剂④测定HIV（人免疫缺陷病毒）抗原的酶标抗体诊断试剂⑤甲胎蛋白（AFP）酶标抗体诊断试剂⑥癌胚抗原（CEA）的酶标抗体诊断试剂⒊放射免疫用抗体诊断试剂放射免疫技术是将放射性核素分析的高度灵敏性与抗原抗体反应的特异性结合起来建立的检测技术。放射性核素标记抗体的方法：①氯胺-T法②Iodogen氏法抗原的测定有：①夹心法②间接法③竟争法常用标记抗体试剂有①HBsAg放射性核素标记抗体诊断试剂②HBeAg放射性核素标记抗体诊断试剂③HAV抗原放射性核素标记抗体诊断试剂④AFP放射性核素标记抗体诊断试剂⑤CEA放射性核素标记抗体诊断试剂三、导向诊断药物放射性核素标记抗体肿瘤放射免疫显像放射免疫显像优点：①在体内确切肿瘤定位作用，准确性达90%，灵敏度达100%。②在体内可检出0.5cm大小的病灶，并可检出肺脑的转移灶。③小分子抗体易到达肿瘤部位，可显著提高N/NT值。④抗体在肿瘤部位可保留6～9日⑤能观擦抗体在血中的半衰期和可能出现的不良反应。放射免疫显像定位技术将抗肿瘤单克隆抗体（Ab）与二乙基三胺五乙酸（DTPA）在体外偶联成Ab-DTPA，再注入体内后，就能与体内组织相结合。由于抗体分子量大，需3天完成。3天后注入放射性核素In-113M（半衰期100m），因DTPA是重金属离子络合剂，所以In-113M可以结合到DTPA分子上，使肿瘤组织显像。这一过程在2小时内可完成。建立预定位技术需解决3个问题：①抗体在肿瘤组织滞留要7天以上。②Ab-DTPA偶联物比较稳定；③内源性金属离子对DTPA的封闭作用要小。第六节抗体治疗药物以抗体为载体的导向

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