内蒙古地区斯氏副柔线虫病与骆驼的病理学研究

内蒙古地区斯氏副柔线虫病与骆驼的病理学研究

骆驼是骆驼的三种主要类型之一。目前，世界上约有200万只骆驼，占骆驼总数的10%。中国是世界上重要的双峰驼主产区,近几十年来,我国双峰驼数量急剧下降,1985年,我国拥有双峰驼共53万峰,截至2007年,全国双峰驼存栏量仅为24.2万峰,为1985年的45.7%,减少了一半多。双峰驼数量的急剧下降引起了我国政府的高度重视,2006年6月公布的《中华人民共和国畜牧法》138种国家级畜禽品种保护名录中,阿拉善双峰驼(中国双峰驼三大优良品种之一)再一次被列入。骆驼斯氏副柔线虫病是由旋尾目(Spirurata)、副柔属的斯氏副柔线虫(Parabronemaskrjabini)引起的一种胃线虫病。斯氏副柔线虫可寄生于牛、羊及其他偶蹄反刍兽,也见有野生动物感染的报道,但骆驼是其最适宜宿主。骆驼大量感染斯氏副柔线虫,可引起拉稀的发生,严重时可以导致患驼死亡。因此,骆驼斯氏副柔线虫病是危害养驼业发展的重要寄生虫病。长期以来,斯氏副柔线虫病对我国养驼业危害严重,以往资料显示,我国双峰驼斯氏副柔线虫病感染率在90%左右。据统计,每年因拉稀死亡的双峰驼,占骆驼死亡总数的27%以上。对本病感染情况的报道大多集中在20世纪80年代,且均为局部地区的调查,对感染率、感染强度与年龄有何关联的调查不具体,几乎没有资料对其造成的病理变化以及患驼体内雌雄虫比例进行详细研究。近几年骆驼斯氏副柔线虫病感染率、感染强度及对骆驼的危害程度等较前些年是否有变化值得重新评估。本试验全面调查了我国内蒙古5个地区双峰驼斯氏副柔线虫病的感染情况,并对其造成的病理变化、患驼体内雌雄虫比例进行了研究,以便为今后对本病的防治奠定良好的基础。1材料和方法1.1实验动物本试验所有双峰驼来自内蒙古5个不同的地区(县域),包括不同年龄、不同性别的双峰驼152峰。具体情况见表1。1.2实验仪器倒置显微镜、光学显微镜:奥林巴斯(中国)有限公司生产。切片机:湖北泰维医疗科技有限责任公司生产。展片仪:广州峻祺试验仪器有限公司生产。佳能A650数码照相机:佳能(中国)有限公司生产。1.3观察大学生的肢体情况将屠宰场待宰双峰驼编号,向驼贩询问骆驼的具体购买地点。仔细观察骆驼膘情,记录体况。根据骆驼牙齿磨损情况大致判断其年龄,并将它们划分为4个不同的年龄段,即幼年(1～5岁)、青年(6～12岁)、中年(13～19岁)、老年(20岁以上)。1.4真胃内容物冲洗法将被宰杀的骆驼腹腔打开,按寄生虫学剖解技术,结扎分离真胃,将真胃置于大搪瓷盘内剖开,加水将内容物洗入容器内,用清水反复多次洗涤沉淀,待上清澄清透明后,分批取沉渣在白色背景下寻找虫体;另将真胃内容物冲洗干净后反转,用眼科镊、解剖针挑取胃壁内尚未被冲洗下来的虫体。将收集到的虫体在显微镜下进行形态学鉴定,统计每峰骆驼体内检获的虫体数量,进行雌雄计数。1.5病变情况观察将真胃洗净翻转后,观察虫体寄生部位,胃黏膜是否有出血、溃疡等,病变明显的做详细记录并拍照。将病变明显部位制作病理切片,在光学显微镜下仔细观察组织病理变化,记录结果并拍照。2结果2.1不同年龄、文化政策与双峰药血药浓度的关系在被调查的152峰双峰驼中,有117峰感染了斯氏副柔线虫,感染率为77.0%。不同地区的感染率、感染强度及肉眼病变率有所不同。在被调查的5个双峰驼产区中,鄂尔多斯市双峰驼感染率最高,达100%;巴彦淖尔市双峰驼的最高感染强度最大,为1315条,该地区的肉眼病变率也最高,达63.6%。各地的具体调查结果见表2。调查结果显示,感染率高的地区患驼肉眼病变率也高,但鄂尔多斯地区例外,该地区感染率为100%,肉眼病变率却只有14.3%。经统计,不同年龄段的双峰驼感染率、感染强度、肉眼病变率不同(见表3)。其中老年驼最大,青年驼最小。说明感染率、感染强度、肉眼病变率随驼群年龄的增长而增长。同样,统计结果表明,肉眼病变率与感染强度成正相关。在感染斯氏副柔线虫的双峰驼中,感染强度在1～100条的骆驼最多,但发病数却非常少,而感染强度在300条以上的患驼,基本都有不同程度的病变,如黏膜脱落、出血、溃疡等,结果见表4。2.2双峰药物感染情况将本次调查结果与以往调查结果相比,巴彦淖尔市斯氏副柔线虫感染率从88%上升到了91.7%,乌兰察布市、阿拉善盟阿拉善左旗感染率有较大幅度下降,鄂尔多斯市感染率为100%,与以往调查数据相同;这4个地区双峰驼斯氏副柔线虫最高感染强度均有大幅下降(见表5)。未查到呼和浩特地区的以往调查资料,故未作比较,但本地并非双峰驼主产区,且感染率为0。2.3双峰牧排虫比例随机抽取30峰骆驼的斯氏副柔线虫虫体标本进行雌雄虫比例统计,结果表明,双峰驼皱胃内斯氏副柔线虫雌雄虫的比例范围在3.9∶1～1.2∶1之间,且在镜下部分雌虫体内可观察到虫卵。2.4色网状虫体盘绕真胃黏膜肉眼变化:虫体主要寄生于真胃幽门腺区,特别是在幽门腺靠近胃底腺的部分虫体数量较多。将草渣清理干净后,可观察到红色丝状虫体盘绕在真胃黏膜内,有时也有虫体附着在胃黏膜表面。寄生有大量虫体的真胃黏膜酥软,用手轻搓即可脱落,且真胃黏膜有溃疡、淤血、出血的现象。镜下观察:真胃病理组织切片(HE染色)观察可见,虫体大量寄生部位(真胃幽门腺区)处黏膜脱落,腺泡上皮细胞核浓缩、变性、异常增生,真胃组织淋巴细胞浸润,甚至代替正常的组织细胞,也有淤血现象。3讨论3.1土默特左旗受教育者所有地区的感染情况,均有进一步加强了本试验对内蒙古5个骆驼产区的双峰驼斯氏副柔线虫的感染情况进行了详细调查,结果5个地区骆驼斯氏副柔线虫的总感染率为77%。其中,感染率由高到低依次为鄂尔多斯市、巴彦淖尔市、阿拉善盟、乌兰察布市、呼和浩特市,分别为100%、91.7%、81.3%、66.7%及0。与以往调查结果相比较,鄂尔多斯市双峰驼斯氏副柔线虫的感染率未变化,巴彦淖尔市有所升高,但变动幅度不大,阿拉善盟、乌兰察布市四子王旗感染率均有大幅下降,这4个地区的平均感染率为84.9%,低于以往平均感染率94.5%近10个百分点,而呼和浩特市土默特左旗被调查的9峰双峰驼均未感染本病。所有被调查地区的感染强度均有大幅下降,本次调查中巴彦淖尔市、乌兰察布市、阿拉善盟、鄂尔多斯市最高感染强度的平均数为792条/峰,而以往平均数为5319条/峰。本次调查结果表明,双峰驼斯氏副柔线虫的感染率较前些年有一定下降,感染强度也有大幅下降。说明近二十年来,内蒙古地区对斯氏副柔线虫病的防治有一定成效,每年的春季药物驱虫对此病起到了一定作用,但感染率降低幅度较小,感染强度降低幅度很大,有可能是驱虫不彻底造成的,也可能是由于斯氏副柔线虫对驱虫药物产生了一定抗药性。这就迫切需要对其进行研究,以利于今后更合理地进行防治。呼和浩特市未发现阳性双峰驼,可能与调查数量较少、长期有效的寄生虫病防制措施或本地缺少传播媒介有关。早在1985年,杨晓野曾对内蒙古骆驼寄生虫种类进行了详细调查与鉴定,指出斯氏副柔线虫在骆驼体内普遍存在,是养驼业中应重点防治的寄生虫。本次调查的感染率和感染强度相对以往均有下降,但绝对数字仍然较高,说明斯氏副柔线虫病仍然是危害内蒙古地区养驼业的重要疾病。3.2青少年药代动力学青年驼、中年驼、老年驼的感染率依次增高,且感染强度较大的双峰驼以老年驼居多,中年驼又较青年驼多一些。这主要是由于老年驼体质较弱,对疾病抵抗力下降,而青年驼体质较好。另外,也可能与不同年龄群体与传播媒介的接触频率有关,有资料报道,本病可能是由骆驼食入斯氏副柔线虫传播媒介——吸血蝇而感染的,故采食量较大的中年驼和老年驼较青年驼可能会食入更多体内含有感染性幼虫的传播媒介,从而导致感染强度较高。3.3雄虫体型、数量与生活史本次调查结果显示,双峰驼真胃内斯氏副柔线虫雌雄虫比例为3.9∶1～1.2∶1,表明雌虫数量大于雄虫,这也是首次对骆驼体内雌雄虫比例的报道,但数据范围较大,分析原因可能是由于雄虫体型较小,有些雄虫和内容物混杂在一起未被检获。另外,本次调查发现每年的11月到次年1月,骆驼体内也有成熟雌虫,这与依瓦施钦提出的只有每年的4～11月动物体内才有成熟的虫体存在不符,与杨晓野的调查结果相一致,说明依瓦施钦的观点有不合理之处,也有可能该虫种在不同地区的生活史有所不同。更科学的雌雄虫比例以及不同地域斯氏副柔线虫成虫存在的时间为何不同有待继续研究。3.4虫体寄生虫的危害本试验发现,大量虫体寄生的真胃黏膜酥软、极易脱落,黏膜表面有散在的出血点,有时有溃疡灶。组织切片镜下观察,可看到真胃黏膜脱落、炎性细胞浸润、组织细胞崩解、腺泡上皮细胞核浓缩、变性、异常增生等炎性反应。分析其原因可能是虫体在黏膜层或黏膜下层压迫毛细血管,造成毛细血管中血液淤积的淤血现象。虫体在寄生部位的吸血及其他活动造成毛细血管破裂,导致出血,形成了肉眼可见的小的出血点。虫体的机械性刺激,引起炎症,炎性细胞局部浸润,黏膜细胞死亡而黏膜容易脱落。在这种情况下,真胃内容物的刺激又容易加重黏膜损伤,也可导致出血点的形成,有时会出现溃疡灶,在镜下就会有大量炎性细胞浸润甚至代替正常组织细胞的现象。对于斯氏副柔线虫病造成的肉眼可见的病变先前也有报道,与本试验结果一致。本试验结果表明,病变的出现与斯氏副柔线虫寄生的数量相关,寄生数量多的容易看到病理变化,说明虫体的机械性刺激、分泌物等的增多对真胃乃至骆驼的消化机能危害较大,大量虫体寄生吸食血液和其对骆驼消化吸收功能的影响是造成骆驼贫血、消瘦的重要原因,也是引起骆驼拉稀的重要因素。许多寄生虫感染初期均伴有外周血及局部组织内嗜酸性粒细胞增多,试验中通过病理切片观察到的斯氏副柔线虫引起的炎症反应是非特异性反应,但嗜酸性粒细胞很少,可能是由于虫体寄生时间较长的原因。对斯氏副柔线虫病的生活史、在骆驼体内移行路径、活动及吸血行为、虫体分泌物及排泄物等的研究,可以丰富该病的病理学及其致病机理的深入探讨,也有利于对本病的防治。4采后感染在生育菌体上的分布本研究结果表明,内蒙古地区斯氏副柔线虫病(parabronemosis)仍然普遍存在,感染率依然高达77%,最高感染强度为1315条/峰,骆驼真胃内斯氏副柔线虫(P.skrjabini)雌雄虫比例在3.9∶1～1.2∶