中药益母草的研究进展

中药益母草的研究进展

益母草是嘴唇科植物的一种常见植物。益母草味辛、微苦、性微寒、归心、肝、膀胱经,具有活血调经、利水消肿、清热解毒之功效。现代医学研究表明,益母草具有溶栓、抗凝、降脂、降血黏度、降低红细胞聚集、抑制血小板聚集、改善微循环、抗氧自由基和减少细胞内钙超载等诸多作用。临床上用于月经不调、产后瘀痛、心血管疾病、血液病等。近年来,随着对其研究的不断拓展,进一步扩展了益母草的药用及美容保健价值。为此,笔者就益母草的研究发展现状进行综述,以期为益母草的进一步开发利用提供参考。1提取活性物质的纯度1.1超声提取技术目前,益母草活性成分的提取工艺主要有罐组式动态逆流提取、不同溶媒提取、超临界提取、超声波及微波提取,这几种工艺各有特色。罐组式动态逆流提取工艺与传统的单罐提取工艺比较,有效成分水苏碱和浸出物提取收率高,生产周期缩短。用不同溶媒提取时,以95%乙醇提取,益母草总生物碱含量高,比水煮所得总生物碱高。如李焕杰等研究发现,以盐酸冷提法提取益母草时生物碱含量最高,且方法简单,工序较少,工业上可以试用。另有研究表明,超临界流体萃取不仅可以用于提取脂溶性生物碱,也可以用于提取水溶性生物碱,该法提取率比常规法能提高1~10倍。超声提取技术主要是利用超声波的空化作用加速植物有效成分的浸出,并且超声波的次级效应,如机械振动、乳化、扩散、击碎、化学效应等也能加速欲提取成分的扩散释放并充分与溶剂混合,利于提取。该技术具有提取时间短、产率高、无需加热、低温提取保护有效成分等优点,因而在中草药成分提取中应用广泛。罗毅等研究表明,以乙醇为溶媒,用110kHz超声波提取40min为最佳。赵鹂等在乙醇溶液中添加表面活性剂,结合超声波,对益母草生物碱进行提取,最佳提取工艺为:以75%乙醇为溶媒,0.5%十二烷基磺酸钠(SDS)为表面活性剂,超声波处理时间60min,水浴温度60℃时。这证明表面活性剂-超声提取法是一种新的快速、高效的提取方法。微波具有穿透力强、选择性高、加热效率高等特点。微波辅助萃取技术就是利用微波对细胞的破壁作用和加热作用,加速细胞内有效成分的溶出。微波辅助萃取法作为一种新的中药有效成分提取方法已取得了可喜的进展,有着广泛的发展前景。高岐等利用微波加热技术,对益母草中总生物碱含量进行了微波提取,结果表明,微波时间为8min,微波功率为616W时,基本可以提取完全,而且微波辅助萃取法的预处理更完全,所测得结果准确度和精密度更好。肖谷清等以水为溶剂,对益母草中总黄酮进行微波辅助提取,结果表明,微波功率处于解冻、微波时间5min、固液比1∶40、益母草粒度细粉、水浸泡时间60min时,益母草中总黄酮的提取效果最好。目前,对益母草中生物碱类、黄酮类的提取工艺研究较多,而对益母草多糖的提取工艺研究相对较少。蔡文燕等采用水提醇沉法,对益母草多糖的提取工艺进行了研究,结果表明,提取温度对益母草多糖的提取具有明显影响,最佳工艺条件为:料水比1∶35,提取温度90℃,提取时间2h,乙醇浓度70%,在此条件下,益母草多糖提取率可达4.86%。1.2阳离子树脂纯化徐贤武等采用732型阳离子交换树脂对益母草中总生物碱进行富集纯化,结果表明,每10g阳离子交换树脂对益母草总生物碱最大吸附量为100.79mg,5%盐酸洗脱的解吸附率可达83.10%;经过富集纯化得益母草总生物碱提取物含量>50%。代龙采用732型阳离子树脂,以3.0mol/L氯化钠溶液洗脱时益母草总碱的洗脱率为87.35%,盐酸水苏碱的洗脱率为86.04%,经纯化所得提取物的益母草总碱含量>75%。因此,采用732型阳离子树脂,以氯化钠溶液作洗脱剂纯化益母草总碱,不仅洗脱率高,成本低,而且易于推广至工业化生产。余丹妮等采用聚酰胺-大孔树脂联用富集益母草总黄酮,结果表明,聚酰胺与D101树脂联合应用能很好地富集益母草总黄酮,最佳工艺条件为:药材与聚酰胺比为5∶1,药材与树脂比为1∶3,树脂径高比为1∶7,以50%乙醇洗脱,收集洗脱液7BV;在此条件下,富集物总黄酮纯度可达23.00%,黄酮转移率为69.00%。该方法优于目前常用的黄酮富集方法,且工艺简单,树脂再生容易,具有良好的应用前景。2化学成分的研究益母草中主要化学成分为生物碱类、黄酮类、二萜类、苯丙醇苷类、脂肪酸类、挥发油类、环型多肽等,并含有锌、铜、锰、铁、硒等多种微量元素。2.1类益母草含总生物碱,其中主要有益母草碱(Leonurine)、水苏碱(Stachydrine)、益母草啶和益母草宁等。2.2黄酮类主要有5,7,3,4,5-五甲氧基黄酮、汉黄芩素、大豆素、洋芹素及苷、芜花素及苷、槲皮素、山柰素及苷、芦丁等。2.3前益母草乙素主要有前益母草素(prehispanolone)、益母草素(hispanolone)、前益母草乙素(preleoheterin)。Giang等从益母草中分离并鉴定出9种半日花烷二萜。其中,化合物lhispanone是首次从益母草属植物中分离得到,化合物5~9为新化合物,被分别命名为leoheteroninA、B、C、D、E。2.4苯丙醇类主要有薰衣草叶苷、毛蕊花苷和益母草苷A、B等。2.5脂肪酸主要有含延胡索酸、月桂酸、油酸、亚油酸、亚麻酸、花生酸、硬脂酸和软脂酸等。2.6例如，油主要有1-辛烯-3-醇、桉油精、丁香醛、氧化石竹烯、蓰草烯等。2.7异常繁殖主要有环型多肽益母草宁和环益母草多肽A、B、C,后两者互为异构体。2.8其他成分主要有胡萝卜苷、β-谷甾醇、益母草酰胺、益母草多糖和微量元素等。3给药剂研究3.1益母草中总氧化物的含量益母草能够改善血流动力学和血液流变学,对血小板凝集、血栓形成以及红细胞聚集均有抑制作用。益母草中的总生物碱能明显降低正常家兔血液黏度,益母草浸膏部分也在一定程度上降低了血液黏度,提高了红细胞变形能力。但浸膏中去除生物碱之后的其他成分对血液黏度没有影响。目前,其降低血液黏度的药效学物质基础尚不十分明确。3.2复方益母草口服液对大鼠气调血等指标的影响益母草总生物碱具有明显的抗炎镇痛作用。金若敏等采用放射免疫法及化学分析法研究其抗炎作用机理,分别检测大鼠口服后血液雌、孕激素及子宫平滑肌PGE2含量的变化,结果发现,益母草可通过抑制痉挛子宫的活动抗炎、降低子宫平滑肌上PGE2含量及升高体内孕激素水平等多种途径缓解痛经症状。益母草的抗炎作用可能与其改善局部血液循环,减少渗出,加速吸收有关;益母草的镇痛作用可能与其抑制末梢神经对疼痛刺激的敏感性及抗炎作用有关。复方益母草口服液可显著延长己烯雌酚加催产素和雌二醇加催产素所致大鼠痛经模型扭体反应的潜伏期,显著减少15min内大鼠扭体次数,并使子宫组织中的一氧化氮(NO)和一氧化氮合酶(NOS)水平显著升高。这说明复方益母草口服液对己烯雌酚和雌二醇致大鼠痛经模型有很好的改善作用,作用机制可能与其升高痛经大鼠子宫组织中NO含量有一定的相关性。3.3达到高峰时,达到形态方向益母草中的水苏碱能显著增加大鼠尿量,其作用均在2h内达到高峰。分析尿液中的离子表明,2种生物碱成分均能增加Na+的排出量,减少K+的排出量,Cl-排出量也有所增加,可以看出,益母草可作为一种作用缓和的保K+利尿药使用。3.4益母草注射液6.25、25.00g/kg益母草水煎剂可极显著提高小鼠淋巴因子活化杀伤细胞(LAK)的活性(P<0.01、0.001),6.25g/kg益母草水煎剂还可显著提高自然杀伤细胞(NK)的活性(P<0.05)。益母草注射液能明显增强失血性休克大鼠肠系膜淋巴管自主收缩频率及收缩性,扩张微淋巴管口径,使微淋巴的活性增强,对失血性休克时的淋巴微循环障碍有非常好的改善作用。顾月丽等研究了益母草素对小鼠T、B淋巴细胞的影响,结果发现,对由刀豆素A(ConA)引起活化的T淋巴细胞,益母草素有明显地促进其增殖的作用,其作用是单独使用ConA的5~8倍。3.5氧化应激作用机制益母草能改善心肌缺血,增加冠状动脉血流,提高心功能,其机制主要是在氧化应激状态下通过清除氧自由基、抑制活性氧簇生成发挥抗氧化作用。益母草心脏保护作用的另一机制是促进血管发生。3.6益母草的功效益母草在美容方面的功效也早有运用和记载。现代医学美容研究表明,益母草所含的铜、锰、硒等多种微量元素,在抗衰防癌、养颜美容、延年益寿上具有显著的功效。益母草所含的益母草碱、水苏碱、月桂酸及油酸等物质,能促进皮肤新陈代谢,使皮肤得到充分营养,变得洁白润泽,从而对皮肤起到良好的营养保健作用。最近的研究发现,益母草鲜汁能增加衰老皮肤中羟脯氨酸和成纤维细胞的含量,还可以抑制酪氨酸酶活性和B-16黑素瘤细胞的增殖,从而起到消除面黑、面斑和养颜美容的作用。3.7大鼠肝脏毒性试验益母草能影响肾功能,造成肾组织损伤,严重者甚至可致人中毒死亡,从而限制了其临床广泛应用。罗毅等用益母草提取物连续灌胃大鼠15d,结果表明,益母草大剂量应用不仅对大鼠肾脏有毒性,而且对大鼠肝脏也表现出较明显的毒性作用,且其毒性影响短期内并非完全可逆,所以临床应用益母草要严格控制其剂量。若为增强疗效而加大使用剂量则必须慎重,应定期检查患者肝肾功能等生化指标,密切观察患者的反应。4栽培技术益母草以野生为主,广布于全国各地,较常见的有细叶益母草、白花益母草等;多生于山坡草地、旷野荒郊或路边,尤以向阳处为多。4.1阳、土层厚度益母草喜温暖湿润气候,耐严寒,怕积水。对土壤要求不严,一般土壤和荒山坡均可种植。但以向阳、土层深厚、富含腐殖质的壤土及排水好的沙质壤土栽培为宜。益母草分早熟益母草和冬性益母草,一般均采用种子直播繁殖,播种期因品种习性不同而异。冬性益母草必须秋播,且均可开花结果。播种按行距30.0cm,穴距20.0cm,深0.5~1.0cm,开浅穴播种。4.2苗木和病虫害防治①及时间苗。苗高5.0cm左右,拔除弱苗;苗高12.0cm时,按株距17.0cm左右定苗。②中耕除草。中耕要浅,一般进行3~4次。③追肥。定苗后,施22500kg/hm2腐熟粪水。苗高30.0cm左右时,追施尿素150~240kg/hm2。④病虫防治。病害主要是白粉病,可用2