1.2.1微生物的培养技术及应用+课件+【要点精讲+拓展提升】高二下学期生物人教版选择性必修3

思考：这反映出传统发酵存在哪些不足呢？菌种差异、杂菌情况不明和发酵过程的控制缺乏标准等，往往造成发酵食品的品质不一。第1章第2节人教版选择性必修3说出培养基的类型和营养构成认识常用的消毒和灭菌方法酵母菌的纯培养19世纪，葡萄酒在生产过程中，出现了葡萄酒变酸、变味的怪事。经过一番研究，法国科学家巴斯德发现，导致生产失败的根源在于发酵物中混入了杂菌。由此人们认识到保持培养物纯净的重要性。思考：在实验室培养微生物最需要解决哪些问题？①为人们需要的微生物提供合适的营养和环境条件；②确保其他微生物无法混入，并将需要的微生物分离出来。培养基无菌技术一：培养基的配制（1）培养基：

人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质。（2）种类：①按物理性质划分液体培养基琼脂（凝固剂）常用于微生物的分离、鉴定、计数、菌种保藏常用于微生物的富集培养（增加微生物的数目）固体培养基（2）种类：②按化学成分划分合成培养基（化学成分明确）天然培养基（化学成分不明确）（2）种类：③按用途划分选择培养基（耐高浓度食盐的金黄色葡萄球菌）鉴别培养基（伊红-美蓝培养基）（3）营养组成：一般都含有水、碳源（提供碳元素的物质）、氮源（提供氮元素的物质）和无机盐。氮源无机氮源：有机氮源：NH4＋、NO3-等牛肉膏、蛋白胨、酵母膏、尿素等碳源无机碳源：有机碳源：牛肉膏、蛋白胨等CO2、CO32-、HCO3-等1.为什么培养基需要氮源？【答】培养基中的氮元素是微生物合成蛋白质、核酸等物质所必需的。2.病毒可以用培养基进行培养吗？【答】不行。病毒只能寄生在活细胞内，目前常用于培养动物病毒的是活鸡胚。培养基组分提供的主要营养牛肉膏5g碳源、氮源、磷酸盐和维生素蛋白胨10g碳源氮源和维生素NaCl5g无机盐H2O定容1000mL氢元素、氧元素1000mL牛肉膏蛋白胨培养基的营养构成思考：从物理性质上看，这是一个什么种类的培养基？培养的微生物需要满足的其他要求乳酸杆菌培养基中添加维生素霉菌将pH调至酸性细菌将pH调至中性或微碱性厌氧微生物需要提供无氧条件二：无菌技术（1）获得纯净的微生物培养物的关键：防止杂菌污染，主要包括消毒和灭菌。（2）消毒：指使用较为温和的物理、化学或生物等方法仅杀死物体表面或内部一部分微生物（不包括芽孢和孢子）。某种细菌的芽孢毛霉的孢子休眠体繁殖体（2）消毒：煮沸消毒法在100℃，煮沸5~6min巴氏消毒法62~65℃煮30min或80~90℃煮30s~1min化学药剂消毒法紫外线消毒法（3）灭菌：指使用强烈的理化方法杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子。接种工具（接种环、接种针或其他金属工具）灼烧灭菌160~170℃加热2-3h干热灭菌玻璃器皿（吸管、培养皿）和金属用具等100kPa,温度为121℃，维持15~30min培养基及容器的灭菌（3）灭菌：湿热灭菌请你判断以下材料或用具是否需要消毒或灭菌。如果需要，请选择合适的方法。（1）培养细菌用的培养基与培养皿（2）玻棒、试管、烧瓶和吸管（3）实验操作者的双手【答】（1）、（2）需要灭菌；（3）需要消毒。注意事项（1）做好消毒和灭菌工作后，要注意避免已经灭菌处理的材料用具与周围的物品接触。（2）为了避免周围环境中微生物的污染，接下来的许多操作都应在超净工作台上并在酒精灯火焰附近进行。三、微生物的纯培养思考：纯培养是什么？1.培养物：在微生物学中,将接种于培养基内，在合适条件下形成的含特定种类微生物的群体称为培养物。分散的微生物在适宜的固体培养基表面或内部可以繁殖形成肉眼可见的、有一定形态结构的子细胞群体，这就是菌落。菌落三、微生物的纯培养2.纯培养物：由单一个体繁殖所获得的微生物群体称为纯培养物。获得纯培养物的过程就是纯培养三、微生物的纯培养3.纯培养的步骤：配制培养基灭菌培养接种分离酵母菌的纯培养（1）实验原理：采用平板划线法和稀释涂布平板法能将单个微生物分散在固体培养基上，之后经培养得到的单菌落一般是由单个微生物繁殖形成的纯培养物。（2）方法步骤：酵母菌的纯培养①制备培养基1.在倒平板的过程中，如果不小心将培养基溅在皿盖与皿底之间的部位，这个平板还能用来培养微生物吗？为什么？【答】空气中的微生物可能在皿盖与皿底之间的培养基上滋生，因此最好不要用这个平板培养微生物。5.怎么确定所倒平板未被杂菌污染或灭菌彻底？【答】将所倒平板放入37℃的恒温箱中培养12h～24h，观察是否有菌落存在以确定是否被污染或灭菌是否彻底。酵母菌的纯培养②接种何分离酵母菌；③培养酵母菌⑴为什么在操作的第一步以及每次划线之前都要灼烧接种环？在划线操作结束时,仍然需要灼烧接种环吗？为什么？答：操作的第一步灼烧接种环是为了避免接种环上可能存在的微生物污染培养物；每次划线前灼烧接种环是为了杀死上次