莪术醇的提取分离鉴定实验开题报告

PAGE1目录选题的根据…………22.文献综述……………5研究内容及试验方法………………6实验装置及药品……………………7实验目标……………7实验进度安排………77.主要文献资料………8天然药物化学开题报告莪术醇的额提取分离及鉴定一选题的根据（一）莪术的简介姜科植物，主要用药部位为根茎。功能：行气破血；消积止痛。主治：血气心痛；饮食积滞；脘腹胀痛；血滞经闭；痛经；癥瘕瘤痞块；跌打损伤。采收储藏：12月中、下旬，地上部分枯萎时，挖掘根部，除去根茎上的泥土，洗净，置锅里蒸或煮约15min，晒干或烘干，撞去须根即成。将根茎放入清水中浸泡，捞起，沥干水，润透，切薄片，晒干或烘干。资源分布：分布于广东、广西、四川、云南等地。浙江、福建、湖南等地有少量栽培。主要成分为莪术挥发油，有抗癌的作用，其主要作用是莪术醇和莪术二酮。（二）莪术醇的化学式及理化性质化学式理化性质莪术醇是一种在加热条件下为棒状，并且伴有升华现象的白色针状结晶样的化合物。熔点为142~147，没有紫外吸收，因此在紫外灯下没有荧光发生，易溶于乙醚，氯仿，溶于乙醇，几乎不溶于水，分类属于倍半萜类的物质。（三）莪术醇的药理作用及临床应用虽然已经发现的莪术醇的临床用途非常广泛，但最集中的，还是抗癌，抗菌，抗病毒的作用。在抗癌方面，最为明显的就是对宫颈癌的治疗，主要采用局部瘤体注射的方法。因为莪术醇的抗癌机制为一直癌变细胞细胞核的生长以及增加机体特异性免疫的能力，几乎没有毒副作用，所以一直以来都被广泛使用。根据实验结果，表明莪术醇能抑制试管中的金黄色葡萄球菌，溶血性球菌，大肠杆菌，伤寒杆菌，霍乱弧菌等的生长，对呼吸道荷包体病毒有直接的抑制作用。除此之外，也能对风湿病毒，水痘病毒等一些常见的致病病毒起到直接和间接地抑制杀害作用。因此常常被用作抗菌抗病毒的药物。在已经发现的这额病毒之外，还有人们尚且不清楚的，因此其毒力性等需要经过进一步的研究。（四）莪术醇的研究历史莪术醇是传统中药姜科植物莪术挥发油成分中的主要物质之一，同时也是中药莪术的有效成分，在医药领域有非常广泛的应用。莪术的入药史在中国可以追溯到唐朝，当时最为出名的医药著作《药性论》及李时珍的《本草纲目》都有记载:莪术有行气破血、消积止痛的功效，被称为血中之气药，常用于心腹胀痛、气血凝滞、血淤闭经、跌打损伤等症。近年来研究更表明，莪术具有调节机体免疫反应，直接抑制和破坏癌细胞，拮抗致癌反应的作用，并已应用临床抗肿瘤治疗中。此外，还具有抗早孕、抗炎、抗菌和降酶等活性。与许多化学抗肿瘤药物相比，莪术醇无致突变性，在临床应用中是安全可靠的抗肿瘤药物。在实验中，通常采取水蒸气蒸馏法、超临界CO2流体萃取、索氏提取3种方法提取三个不同地方莪术挥发油，并利用GC-MS联用仪分析比较其化学成分差异，分析各种成分的含量，从而为最佳治疗提供理论依据。并对莪术中主要有效成分挥发油的提取工艺进行优选，作为莪术挥发油制备的科学依据。本实验旨在人为操作失误很小的因素下，验证现有提取分离办法下实验室提取最大产率。二文献综述根据对国内外相关文献的查阅，从莪术醇的研究进展，不同提取方法对莪术油提取的影响，莪术醇的分离，，莪术醇鉴定，莪术醇对照品的主要相关物质及莪术醇含量测定几个方面进行综述。（一）莪术醇的研究进展从上个世纪七十年代，莪术醇被正式运用于宫颈癌的治疗，在取得一定的疗效后，相继开发了其抗癌抗肿瘤抗病毒的一系列用途。在人们生活水平日益上升的今天，人们对健康的关注越来越多，这些新用途的发现，莪术醇的药用价值也吸引了越来越多的人的关注。在莪术醇的研究进展方面主要包括了莪术醇的分离，提取，定性定量分析及药理作用。（二）莪术醇的分离和提取莪术醇是一种在加热条件下为棒状，并且伴有升华现象的白色针状结晶样的化合物。熔点为142~147，没有紫外吸收，因此在紫外灯下没有荧光发生，易溶于乙醚，氯仿，溶于乙醇，几乎不溶于水，分类属于倍半萜类的物质。利用莪术醇的这些特点，常用方法就是以郁温金生药的根茎为原料，先用水蒸气蒸馏法从中提取出莪术油，然后用乙醚洗涤，留下微溶于石油醚的莪术醇和莪术二酮的混合物结晶，硅胶柱层析分离两者，再用无水乙醇洗涤，可最终得到莪术醇单一物质的白色针状结晶。（三）定性分析在莪术醇的定性分析中，波层层析鉴定是最经典的方法。中国药典1995版采用的方法是在硅胶G薄层板上以石油醚——醋酸乙酯90：10倾斜上行展开，用1%香草醛硫酸溶液喷雾显色。在2000版本的中国药典则采用了波层色谱法鉴别莪术醇。采用以羧甲基纤维素钠为粘合剂的硅胶G薄层板，分别吸取对照品和供试品溶液按照波层色谱法的操作规则点样，仍然采用石油醚（60~90）——醋酸乙酯90：10为展开剂，待展开剂到前沿线取出，晾干，喷5%香草醛硫酸溶液，用热风吹干到斑点清晰,2005版的中国药典使用的相同的方法，只是展开剂中石油醚的沸点在（30~60）之间。出了上述的三种方法，还有气相色谱结合质谱的方法。除此之外，还有：化学鉴定。莪术醇的化学结构是为：其中含有的特征基团，利用化学手段加以鉴定。在很多情况下也可以采取核磁共振鉴定。标准对照品品的核磁共振图谱如下。利用核磁共振的操作得出所得产品的图谱，经两者相互比较，观察特征峰的存在与否就能得出结论。在莪术醇的定量分析在莪术醇的定量分析方面，最常使用的有三种方法。（1）紫外分光光度法。该方法在520纳米波长测定样品的吸光度，以吐温80乙醇溶液为对照品，在相同条件下测定其吸光度。通过精密计算得出样品中含量。（2）气相色谱法。气相色谱法测定含量一般选取一定的内标物，利用仪器分析的手段最终测得相关的数据。（3）毛细管色谱法。根据朱亚尔等的文献，可以看到这种新的方法。采用的色谱柱为石英毛细管柱，在控制进样温度，流速，以及升温程序，保留时间及相关条件下，可以使莪术醇锋和有关物质的锋有效分离。通过计算锋的面积得出最终结果。（五）莪术醇的药理作用及临床应用虽然已经发现的莪术醇的临床用途非常广泛，但最集中的，还是抗癌，抗菌，抗病毒的作用。在抗癌方面，最为明显的就是对宫颈癌的治疗，主要采用局部瘤体注射的方法。因为莪术醇的抗癌机制为一直癌变细胞细胞核的生长以及增加机体特异性免疫的能力，几乎没有毒副作用，所以一直以来都被广泛使用。根据实验结果，表明莪术醇能抑制试管中的金黄色葡萄球菌，溶血性球菌，大肠杆菌，伤寒杆菌，霍乱弧菌等的生长，对呼吸道荷包体病毒有直接的抑制作用。除此之外，也能对风湿病毒，水痘病毒等一些常见的致病病毒起到直接和间接地抑制杀害作用。因此常常被用作抗菌抗病毒的药物。在已经发现的这额病毒之外，还有人们尚且不清楚的，因此其毒力性等需要经过进一步的研究。三研究内容及实验方法（一）流程图莪术药材粗粉8倍水浸泡，水蒸气蒸馏6h莪术挥发油置冰箱中0~5°冷藏，析晶，过滤结晶物石油醚洗涤结晶石油醚液无水乙醇重结晶回收石油醚针状结晶（莪术醇）脱脑液四莪术醇的分离提取（一）析晶，莪术醇的初步分离。将上一部所的挥发油静置冷（放置在0~5°的温度冰箱），待不再有结晶析出，用布氏漏斗真空抽滤。得到的结晶为主要组成为莪术醇和莪术二酮的混合粗晶。（二）莪术醇的二次分离。将上一部所得的莪术醇和莪术二酮的粗晶用石油醚洗涤，以出去一些极性较小的有关物质。得到结晶和石油醚液，将结晶用无水乙醇重结晶就能得到针状的莪术醇白色晶体。称量其重量。五实验装置及药品水蒸气蒸馏装置实验器材：水蒸气发生器恒温水浴锅500ml圆底烧瓶双控橡胶塞冷凝器橡胶管尾接管锥形瓶玻璃管过滤装置及药品实验仪器：布氏漏斗真空泵无灰滤纸抽滤瓶石油醚无水乙醇产品纯度检测及定性检测装置及药品薄层色谱仪器和药品：玻璃板硅胶G石油醚醋酸乙酯香草醛硫酸溶液展开缸吹风机紫外灯六实验目标1.对莪术进行提取工艺的优化，提高发油的产率。2.分离出相对较纯的莪术醇。3.鉴定得到的莪术醇产品。七工作进度安排1.查找相关的资料并选择合适的文献和书籍2013.3.10至2013.3.15查阅资料并撰写开题报告2013.3.15至2013.3.17修改并完善开题报告2013.3.17至2013.3.24实验试剂盒实验器材的相关准备2013.3.25至2013.3.26莪术油的提取2013.3.27至2013.3.31莪术醇的分离2013.4.1至2013.4.5莪术醇的鉴定2013.4.6至2013.4.11完善实验报告以及实验分析2013.4.12至2013.4.19八主要参考资料（一）参考书籍1.《中药化学成分提取分离与鉴定》人民卫生出版社唐志书2.《中药鉴定学》高等教育出版社王喜春（二）参考文献1.不同提取方法对羲术油提取的影响王娟，刘汉清南京中医药大学，江苏南京2100462.获术醇