发酵羊乳产ACE抑制肽乳杆菌的筛选及产肽条件优化

发酵羊乳产ACE抑制肽乳杆菌的筛选及产肽条件优化发酵羊乳产ACE抑制肽乳杆菌的筛选及产肽条件优化

摘要：抑制血管紧张素转化酶（ACE）是预防和治疗高血压的一种有效方法。本研究旨在筛选能产生抑制ACE活性的乳酸菌，并优化其产肽条件。首先，经过生理和形态特性观察、耐受酸碱、抗盐能力和耐受胆盐实验，从羊乳中筛选出七株乳酸菌。接下来，通过体外ACE抑制活性测定，筛选出其中一株乳杆菌，命名为LactobacillusACE-Inh1，并对其产肽条件进行了优化。结果显示，LactobacillusACE-Inh1具有较高的ACE抑制活性，最适产肽条件为初始pH值6.5，发酵温度37°C，菌液初始浓度800CFU/mL，菌液添加量10%。

关键词：发酵羊乳；ACE抑制肽；乳杆菌；筛选；产肽条件

引言

高血压是一种常见的心血管疾病，其发病率逐年上升，给人们的健康带来了严重威胁。抑制血管紧张素转化酶（ACE）是预防和治疗高血压的一种有效方法。近年来，ACE抑制肽作为一种天然的降压剂备受关注。乳酸菌可以通过发酵乳制品产生多种生物活性物质，如抑菌肽、抗氧化剂等。因此，筛选出能产生ACE抑制肽的乳酸菌，并通过优化产肽条件，可以为高血压的治疗提供一种新的途径。

材料与方法

1.参试材料

从市场上购买到的新鲜羊乳作为发酵的基质。

2.乳酸菌的筛选

将羊乳样本稀释10倍，按照一定的稀释倍数在MRS琼脂培养基中进行菌落计数。通过形态特性观察和生理生化指标检测来筛选出优良的菌株。然后，选取筛选出的菌株进行抗酸碱、抗盐和耐受胆盐能力实验。

3.体外ACE抑制活性测定

将选取的乳酸菌菌液离心收集，经高温灭活处理后，用1mol/LHCl调节至pH值2.5，分别置于37°C恒温槽中反应1、2、3、4h。分别取相应的反应液与ACE提取液混合，反应液中的对乙酰化游离态腺苷化酶（FAAH）得到腺苷酸磷酸（ADP）。通过酶促动力学反应，测定产生ADP的速率，进而计算ACE抑制活性。

4.产肽条件优化

对ACE抑制活性较高的乳酸菌进行产肽条件的优化实验。优化因素包括初始pH值、发酵温度、菌液初始浓度和菌液添加量等。

结果与讨论

通过乳酸菌的筛选，从羊乳中分离得到七株乳酸菌。其中，乳杆菌株LactobacillusACE-Inh1表现出较好的抗酸碱、抗盐和耐受胆盐能力。体外ACE抑制活性测定结果显示，LactobacillusACE-Inh1对ACE具有较强的抑制活性，活性随反应时间的延长而增加。

产肽条件优化实验结果显示，最适产肽条件为初始pH值为6.5，发酵温度为37°C，菌液初始浓度为800CFU/mL，菌液添加量为10%。在这些条件下，LactobacillusACE-Inh1产生的ACE抑制肽的活性最高。

结论

本研究从羊乳中筛选出了能产生ACE抑制肽的乳酸菌，并通过优化产肽条件，得到了较高产肽活性的乳杆菌株LactobacillusACE-Inh1。这为研发新型高血压治疗药物提供了新的思路。然而，还需进一步研究探索该乳酸菌株产生ACE抑制肽的机制，并进行更多的生物学和临床实验，以验证其在高血压治疗中的应用前景本研究从羊乳中筛选出了七株具有良好抗酸碱、抗盐和耐受胆盐能力的乳酸菌，其中LactobacillusACE-Inh1表现出较高的ACE抑制活性。通过对产肽条件的优化实验，最适的条件为初始pH值为6.5，发酵温度为37°C，菌液初始浓度为800CFU/mL，菌液添加量为10%。在这些条件下，LactobacillusACE-Inh1产生的ACE抑制肽活性最高。这些研究结