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文档简介
组织胚胎学课件
组织学与胚胎学
第一章组织学绪论本节教学目的与要求1、掌握组织胚胎学的基本概念与研究内容;2、了解石蜡切片技术、H.E.染色技术和PAS反应等常规研究方法;3、了解组织胚胎学的课程作用与学习要求。本节重点与难点1.组织胚胎学的研究内容;2.石蜡切片技术、H.E.染色技术、PAS反应的基本方法。一、组织胚胎学的研究内容组织胚胎学包括:组织学胚胎学(一)组织学(Histology)概念:组织学是研究生物体(鱼体)微细结构的一门科学。研究内容:包括细胞、基本组织、器官组织三个部分。细胞(cell-C)组织(tissue)器官(organ)系统(system)(二)胚胎学(Embryology)概念:研究(鱼体)胚胎发育的科学。胚胎发育是指从受精卵开始到幼体的形成并破膜而出(孵出)或脱离母体(产出)的整个过程。研究内容:包括胚前发育、胚胎发育、胚后发育三个部分。精细胞卵细胞受精卵胚胎幼体二、组织胚胎学的研究方法研究组织胚胎学的常用方法有:光镜技术电镜技术组织化学技术活体观察(一)光镜技术lightmicroscope1.石蜡切片技术(H.E染色)取材和固定;脱水和包埋;切片和染色;封片。组织切片染色法-HE染色苏木精-伊红染色法:苏木精(Hematoxylin):碱性染料,使C核内的染色质及C质内的核糖体染成蓝紫色。伊红(Eosin):酸性染料,使C质和C外基质中的成分染成红色。染色过固定脱水渗透包埋切片染色二甲苯酒精染色脱水透明封片(脱蜡)(脱二甲苯)鱼的肾脏石蜡切片H.E染色血液嗜碱性:对于碱性染料亲和力强的性质。可被苏木精染成紫蓝色。
嗜酸性:对于酸性染料亲和力强的性质。可被伊红染成红色。中性:对于两种染料亲和力都不 强的性质,HE染色着色淡。组织结构的嗜色性2、其他切片与染色技术:
火棉胶切片;包埋冰冻切片;酶癌变涂片、铺片、磨片。硝酸银染色法:神经细胞(黑)。组织化学术:为应用化学、物理、生物化学、免疫学或分子生物学原理和技术,与组织学技术相结合而产生的技术,能在组织切片定性、定位、定量地显示某种物质的存在与否以及分布状态。细胞化学术:前述技术用于游离细胞样品则称为~(cytochemistry)。(三)组织化学术1.一般组织化学术基本原理是在切片上添加某种试剂,和组织中待测反应物发生反应,其终产物或为有色沉淀,以用光镜观察,或为重金属沉淀以用电镜观察。(1)糖类过碘酸_雪夫氏:PAS反应,pariodicacidSchiffreaction(2)脂类:油红、尼罗蓝及苏丹类染料(3)核酸:福而根反应→DNA;甲基绿-派若宁反应→DNA绿色,RNA红色。过碘酸Schiff反应(periodinacidSchiffreaction):简称PAS反应,是确定组织或细胞中有无多糖存在的一种方法。原理:多糖PA氧化醛Schiff试剂紫红色沉淀
(4)酶类:酶组织化学术。通过显示酶的催化活性以表示酶的存在。2.免疫组织化学术immunohistochemistry:是根据抗原与抗体特异性结合的原理,检测组织中肽和蛋白质的技术。肽和蛋白质均具有抗原性,当把人或动物的某种蛋白质作为抗原注入另一种动物,其体内则会产生针对该抗原的特异性抗体。将抗体从动物血清中提出后,与标记物相结合,即成为标记抗体。
用标记抗体与组织切片结合,抗体则与组织中相应抗原特异性结合在显微镜下通过观察标记物而获知肽或蛋白质的分布部位。常用的标记物有荧光素,辣根过氧化物酶(HRP)、胶体金。3.原位杂交技术即核酸分子杂交组织化学术。
其原理为用带有标记物的已知碱基序列的核酸探针,与细胞内待测的核酸按碱基配对的原则进行特异性原位结合,即杂交。然后,通过对标记物的显示和检测而获得待测核酸的有无及相对量和分布,是检验MRNA的有效手段。常用的标记物有放射性核素(35S,32P,3H等)和地高辛。(四)放射自显影技术(五)图象分析术(六)细胞培养术和组织工程(七)活体观察(八)显微操作技术(九)胚胎移植和试管动物(十)流式细胞仪技术(二)电镜技术(EM)electronmicroscope透射电镜TEM:观察组织或细胞内部更细微的结构,即超微结构。扫描电镜SEM观察组织或细胞表面的立体结构。冷冻蚀刻技术断面分析电镜1、透射电镜:2、扫描电镜:.透射电镜扫描电镜冷冻蚀刻技术分析电镜电子密度高:当电子束投射到密度大吸附重金属多的结构时,电子被散射的多,因此,射落到荧光屏上的电子少而呈暗像,电镜照片呈黑或深灰色,称为电子密度高。反之称为电子密度低。三、组织胚胎学课程的作用与学习要求(一)课程作用鱼类组织胚胎学是水产养殖技术专业的重要专业基础课之一,与其他专业基础课和专业课有密切联系。其中鱼类组织学与鱼类生理学和鱼病学更为密切;鱼类胚胎学与鱼类遗传育种学有着密切关系。(二)学习要求1·把握好两个学习环节理论教学:重点掌握各种组织的组成、分布、分类与构造特点,以及胚胎发育过程的分期和不同发育时期的分化与构造特点。为方便学习我们将采取全程多媒体教学,并将所有课程资料上网。实验教学:主要是观察切片,每次实验通过电视显微图像转换系统将要观察的组织转换成电视图像进行示教,然后由同学们自行观察。要求多观察,多操作认真学习和掌握各种组织结构和显微镜使用操作技能。2、把握好几个关系注意形态和机能的统一;
建立局部与整体的联系;
培养观察与思维能力;
建立动态变化的概念。习题名词解释组织学、胚胎学。问答题1组织学与胚胎学的研究内容各是什么?2组织胚胎学的一般研究方法有哪些?第一章细胞细胞——生物体形态结构和生命活动的基本单位。细胞的概述细胞的化学组成细胞的形
本章教学目的与要求1、掌握细胞的概念、显微结构和亚微结构;2、掌握细胞的基本结构及功能;3、了解细胞的生命活动特征;4、了解细胞的繁殖。本章教学的重点与难点1、细胞的基本结构与组成;2、细胞的亚微结构及其主要功能。第一节细胞的概述一、细胞的发现与细胞学说的创立(一)细胞的发现:
17世纪中叶,显微镜被用于生物学研究,用显微镜观察来自树皮的木栓,看到一个个“小室”结构,称之谓“Cell”(细胞)。(二)细胞学说的创立自从细胞的发现以后,人们对细胞进行了深入的观察和研究。到19世纪30年代,德国植物学家施莱登和动物学家许旺分别发表了关于细胞的论述,创立了细胞学说。细胞学说认为:细胞是构成生物体形态结构和生命活动的基本单位。自然界的一切生物,无论是单位或是植物或是微生物,从简单的单细胞生物到复杂的多细胞生物都是由细胞构成。一个完整的生物体,尽管其结构十分复杂,但都是由细胞所构成;尽管其生理功能有多种多样,但都是靠细胞的活动来实现的。在动物体内,细胞与细胞间质构成各种组织、器官、系统,从而构成完整的有机体。二、细胞的显微结构和亚微结构在光学显微镜下所能观察到的细胞的微细结构称细胞的显微机构,光镜的放大倍率一般在1600-4000倍,因此一般只能观察到大于0.2μm的结构,如细胞、细胞核、核仁片均为细胞的显微结构。到本世纪30年代随着电子显微镜的问世,突破了这一界限,电镜的放大倍率在几十万倍,最高者可达100万倍,在电镜下可观察到光镜下观察不到的结构称亚显微结构。如各种细胞器即是细胞的亚显微结构。另外,还有超微结构,是单指分子结构。第二节细胞的化学组成一切生物都是由细胞构成,那么细胞又是由什么构成的呢?根据化学分析表明,细胞是由一种生物物质——原生质构成。细胞的各种结构都是由原生质分化而成。那么原生质又是什么构成的呢?原生质不是一种单纯的化合物,而是由许多种化合物组成的极其复杂的综合物。细胞的原生质都含有碳、氢、氧、氮、磷、硫、氯、钠、钾、钙、镁等元素。其中碳、氢、氧和氮四达元素含量约占原生质总量的98%;此外还含有锂、钦、锶、铜、锌、硅、氟、钴、溴、碘和锰等微量元素和极微量的镭和铀等放射性元素。细胞内这些元素都是以水分、无机盐、脂类、碳水化合物、蛋白质和核酸等化合物的形成存在于细胞内。其中水、无机盐等为细胞的无机成分;脂类、碳水化合物、蛋白质和核酸等为细胞的有机成分。第三节细胞的形态结构一、细胞的大小与形状(一)细胞的大小:细胞的大小差异很大,最小的细胞为细菌,其直径只有0.2~5.0μm;最大的细胞是鱼类和鸟类卵细胞,如鼠鲨的卵直径可大22厘米,鸟类中的鸵鸟的卵直径也可达数厘米。但多数细胞直径约在10~100μm之间,必须在显微镜下观察。(二)细胞的形态
细胞的种类繁多,其形状也是多种多样,有圆形、卵圆形、立方形、梭形、星形、柱形、扁平状或多突起等。二、细胞的基本结构尽管细胞的种类繁多,大小与形态千差万别,但其结构都基本相同,都是由细胞膜、细胞质和细胞核三部分组成。神经C-神经元神经节C、神经胶质C(1)透射电镜(EM):观察C内部更细微的结构,即超微结构。(2)扫描电镜观察组织C的表面立体结构。(一)细胞膜细胞膜是包绕在细胞表面的一层薄膜。动物细胞膜只有极薄的一层质膜,而植物细胞膜除有一层质膜外,还有一层较厚的纤维素性细胞壁。
细胞膜结构1、细胞膜的化学组成与分子结构细胞膜的化学成分主要有蛋白质和脂类,在哺乳动物细胞膜中还含有少量糖2、膜中蛋白质的种类和功能膜中蛋白质多种多样,根据功能不同可分为两类:(1)载体蛋白:参与细胞内外的物质交换。细胞内外的物质交换有两种方式:一种是扩散作用;另一种是载体转运。受体蛋白:简称受体,接受作用于细胞的化学信号,当一些化学信号如抗原、药物或激素等作用于细胞膜时,其受体与之结合,而影响细胞的功能活动。3、细胞膜的功能维持细胞的形态,并对细胞起着保护和屏障作用。调节细胞内外的物质交换。(二)细胞质1、基质:分布在细胞质中均匀而透明的胶状物质。2、细胞器:由细胞质内原生质分化形成的具有一定形态和化学成分,并执行一定功能的微细结构。1)线粒体(Mitochondria)线粒体是生物氧化、产生能量的场所,由双层生物膜围成,其外膜平滑、内膜向内折叠形成许多板层状或管状小嵴,称线粒体嵴。2.组织:结构相同或相似的C群及
C外基质构成。四大基本组织: 上皮组织 结缔组织 肌组织 神经组织3.器官:不同的组织按一定的比例、数量及方式组合成器官。系统:若干功能相关的器官构成系统。细胞组织器官系统}}组织学各论组织学总论C超微结构模式图细胞膜(1)线粒体(Mitochondria)线粒体是生物氧化、产生能量的场所,由双层生物膜围成,其外膜平滑、内膜向内折叠形成许多板层状或管状小嵴,称线粒体嵴。(2)内质网(EndoplasmicReticulum)由单层生物膜围成。是蛋白质合成、修饰和分泌;脂类合成的场所。根据其表面有无核糖体附着而分为粗面内质网和滑面内质网两种。粗面内质网表面附着有核糖体,主要参与蛋白质的合成和运输。滑面内质网表面平滑,无核糖体附着,其功能主要与糖元合成与分解、激素合成、水与电解质有关,与蛋白质合成无关。(SERMER)
内质网的构造(3)核糖体(ribosomes)核糖体是由RNA和蛋白质形成的大颗粒,是蛋白质合成的场所。
内质网与核糖体(4)高尔基体(Golgibodies)高尔基体多位于胞核内或膜的周围,由单层生物膜围成,主要功能是形成分泌颗粒,与细胞分泌有关。(GOL)(5)中心体(Centrioles)中心体是与细胞分裂有关的一种细胞器,主要参与细胞的有丝分裂,如中心体破坏,细胞就会失去分裂能力。(3)中心体(Centrioles)
中心粒的构造(6)溶酶体(L
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