谷氨酸发酵过程控制-谷氨酸棒杆菌固体培养基的制备

子情境：谷氨酸发酵过程控制-谷氨酸棒杆菌固体培养基的制备你们吃过味精吗？味精的主要成分是什么？假如梅花味精厂需要大批谷氨酸棒杆菌种子进行谷氨酸发酵生产味精，现在需要同学们制备谷氨酸棒杆菌的固体培养基进行细胞培养，已获得细胞进行种子扩大培养，进而获得大量谷氨酸棒杆菌细胞，进行谷氨酸发酵一、培养基主要包括哪些成分？

二、培养基的分类?

二、怎样配制培养基？培养基（Medium）是供微生物、植物和动物组织生长和维持用的人工配制的养料，一般都含有碳水化合物、含氮物质、无机盐（包括微量元素）以及维生素和水等。有的培养基还含有抗菌素和色素，用于单种微生物培养和鉴定。培养基的定义按组成成分可分为:

1.合成培养基：由各种纯化学物质按一定比例配制而成。2.半合成培养基：有一部分纯化学物质和另一部分天然物质配制而成。

3.天然培养基：利用天然来源的有机物配制而成。

培养基的分类

按用途可分为

1.基础培养基：能满足各种微生物的营养需求

加富培养基：加入某种微生物生长繁殖所需的营养物质，使其快速生长，便于分离

3.选择培养基：加入某种物质抑制其他微生物生长，使目标微生物得到富集，便于分离

4.鉴别培养基：用来检测微生物的某些代谢特性。

从培养基的物理状态可分为1.液体培养基：不加凝固剂的液体状态培养基。2.固体培养基：在液体培养基中加入2%左右的凝固剂的固体状态的培养基或农副产品培养基。

3.半固体培养基：在液体培养基中加入0.2—0.5%凝固剂而成的半固体状培养基。培养基的定义谷氨酸棒杆菌固体培养基的配方葡萄糖0.1%蛋白陈1.0%牛肉膏1.0%氯化钠0.5%琼脂2.0%pH7.0~7.2葡萄糖1g/L蛋白陈10g/L牛肉膏10g/L氯化钠5g/L琼脂20g/LpH7.0~7.2培养基的制备程序不同类型培养基制备的程序也不尽相同。但一般培养基的程序主要可分为：称药品

、加热溶解

、矫正pH、澄清过滤、分装、灭菌及检定等8个步骤。

培养基的制备步骤

按培养基处方准确称取各种成分，先在三角烧瓶中加入少量蒸馏水，再加入各种成分，以防蛋白胨等粘附于瓶底，然后再以剩余的水冲洗瓶壁。

1、称药品

将各种成分混匀于水中，最好以流通蒸气溶化半小时，如在电炉上溶化应随时搅拌，如有琼脂成分时更应注意防止外溢。溶化完毕，补足失去的水分。

2、加热溶解

如系琼脂培养基，于加热融化后需趁热以绒布或两层纱布中夹脱脂棉过滤；亦可用自然沉淀法，即将琼脂培养基盛人铝锅或广口搪瓷容器内，以高压（103.43kPa）蒸汽融化15分钟后，静置高压锅内过夜，次日将琼脂倾出，用刀将底部沉渣切去，再融化即可收清晰的琼脂培养基。3、过滤澄清

1）根据需要将培养基分装于不同容量的三角烧瓶、试管中。分装的量不宜超过容器的2／3以免灭菌时外溢。2）琼脂斜面分装量为试管容量的1／5，灭菌后须趁热放置成斜面，斜面长约为试管长的2／3.3）半固体培养基分装量约为试管长的1／3，灭菌后直立凝固待用。4）高层琼脂分装量约为试管的1／3，灭菌后趁热直立，待冷后凝固待用。

4、分装

5）液体培养基分装于试管中，约是试管长度的1／3.6）琼脂平板：将灭菌（或加热融化）后的培养基冷至50℃左右，以无菌手续倾人灭菌平皿内，内径9cm的平皿倾注培养基约13～15ml，轻摇平皿底，使培养基平铺于平皿底部，待凝固后即成，倾注培养基时，切勿将皿盖全部启开，以免空气中尘埃及细菌落入。

新制成的平板培养基（简称平板），表面水分较多，不利于细菌的分离，通常应将平皿倒扣搁置于37℃培养箱内约30分钟待平板平面干燥后使用。4、分装

不同成分、性质的培养基，可采用不同的灭菌方法。高压蒸汽灭菌法：高压灭菌的温度与时间随培养基的种类及数量的不同有所差别，一般培养基少量分装时高压（103.43kPa）灭菌15分钟即可，培养基分装量较大时，可高压（103.43kPa）灭菌30分钟，含糖的培养基高压（55.16kPa）灭菌15分钟。以免糖类被破坏。5、