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IV第一章绪论1.1课题的研究背景及意义时代在发展在进步,与此同时人们的生活质量也在上升,自然而然地,对饮食方面的需求也随之提高了。由于时代发展的速度太快,现在的人们也往往承受着各种各样或大或小的工作或者是生活压力,这很容易引起人们焦虑不安、睡眠不足、免疫力低下等等毛病。饮料是生活中一种非常常见的食品,我们大多数人每天可能都会需要消费1-2瓶,而且随着保健饮料和固体饮料以及其他多种多样形式的饮料的兴起,人们对饮料这一常见消费品的要求已经不仅仅满足于它的常规作用——解渴消暑,人们更加想要倾向于去购买健康绿色的饮料,即饮用后能对人的身体健康某方面有益处,或者是方便携带、饮用便利利于储存的饮料,于是,生产不同性能多种多样的饮料以满足不同人群的不同需求的饮料产品势在必行。桑黄是近几年来才被人们深入研究的一种十分珍贵的中药,因为桑黄拥有的十分珍贵的营养和药用价值,科学家们在对其的活性成分、药用机理、临床医用价值以及如何有效利用这一珍贵资源等各方面进行研究。现代研究证实桑黄具有抗癌、活血止血、增强免疫力和抗疲劳、抗氧化以及降血糖等作用,正是因为如此,桑黄成为研制保健品这一市场炙手可热的“新宠”。吉林省长白山由于其独特的地理优势,是桑黄主要产地之一,所以本课题利用桑黄进行研究一款饮料是十分具有地理优势的。并且固体饮料由于其多样性、独特的口感、体积小质量轻方便储存,也正是十分流行,人们也很乐意去购买固体饮料,尤其是富含营养的固体饮料,更是人们生活中的好伴侣。目前以桑黄为原材料制作的固体饮料在国内外都鲜有报道,因此本研究以桑黄为主要原材料制作一款抗疲劳的固体饮料十分具有创新性,十分具有研究价值,以望为日后桑黄固体饮料的研制开发提供一定参考。1.2桑黄的概述桑黄,是一种十分珍贵的药食同源真菌,属于新资源食品,类属多孔菌科,称其桑黄是由于它的子实体形态呈现鲜黄或黄褐色[1]。1.2.1桑黄的营养价值有史可查,桑黄最开始被人们应用是记录在2000年前的“神农本草”的“桑耳”中,在明代,李时珍著作中也有关于桑黄的作用有“利五脏,宣肠胃气,排毒气”等的记载。著名书籍《中华本草》和《中药大辞典》中也有对桑黄的详细描述,其中包括药理作用、具体成分以及一些配合使用的方法[1-2],比如,在中国一些古代医书上记录道,桑黄的药理功效包括治疗痢疾、盗汗、溶血、血肿、脐腹胀、肛肠通便、亚治疗、闭经、腹泻和延长生命。桑黄在我们东亚地区的使用历史都十分悠久,朝鲜有医学书籍记载,桑黄是万灵药,非常有效。而且在过去的日本民间,日本的人们也认为桑黄是一种非常有效的菌。在近几年的逐渐研究之下发现,桑黄具有多种有效成分,所以桑黄具有多种功能,如抗癌、增强免疫力、抗疲劳、抗氧化、止血、活血化瘀、降血糖等。以上原因,桑黄真菌是国际公认的最佳生物抗癌药用真菌之一,几乎没有有毒副作用,是医药卫生产品研发的重要原材料,具有巨大的市场潜力[1,3]。1.2.1.1桑黄的抗肿瘤作用桑黄具有抗肿瘤作用[4],根据相关记载,20世纪90年代,韩国利用桑黄开发了一款很有效的抗肿瘤制剂;日本的柴田实验室利用桑黄水提物细胞进行实验并且发现,桑黄的确可以高效抑制肿瘤细胞的增殖,甚至它的抑制率超过90%,这对正常细胞却没有任何影响[1,5]。Sang等[6]研究发现桑黄多糖具有抑制肿瘤生长和转移的功效,通过实验证明,桑黄真菌中所含的总三萜类物质可以抑制脑胶质瘤U251的增殖,诱导肿瘤细胞死亡。1.2.1.2桑黄的保肝作用近年,有关桑黄的保肝作用和抗肝硬化作用的文章较多,实验发现桑黄可以减轻肝细胞损伤、减少肝纤维化、改善肝脏微循环、降低脂质过氧化产物丙二醛(MDA)、提高肝组织肝蛋白(SOD)活性[7]。Kim[8]等发现:用桑黄提取物去喂养高血糖的小鼠,会使它们的血糖显著下降,正是如此,桑黄能够降低人们饭前饭后的血糖浓度[2]。1.2.1.3桑黄的增强免疫力作用桑黄有加强人的免疫力的作用[9],韩国人Kim[8],H.M.等从桑黄中提取出了具有生物活性的多糖(PIP),发现PIP可以刺激体液和细胞免疫调节,从而增强免疫。而后近几年来,桑黄多糖由于其具有的免疫调节能力已经受到高度的关注[10]。人的T细胞一般都是“待机状态”,只有当被刺激之后才开始工作。还有研究表明[11]桑黄除了多糖物质,还有糖类和酶类等,也具有增强免疫的功效,他们可以使B淋巴细胞活性增加129倍、使T淋巴细胞活性增加3倍、巨噬细胞活性增强3~5倍、自然杀伤细胞(NK)活性增加2倍[3],从而起到增强免疫力的作用。1.2.1.4桑黄的其他作用除上述功效之外,PIP还可以帮助减轻身体疼痛﹑提高食欲﹑消除疲劳等,还能起到促进血液循环、降低血糖的作用,可以起到治疗血崩﹑脾虚﹑女性月经不调等作用[1]。桑黄还可以应用在辅助糖尿病治疗中,有人经过大量试验证明[12]桑黄真菌子实体的提取物可以抑制蛋白酪氨酸磷酸酶(PTP),有辅助治疗2型糖尿病的作用[3]。1.2.2桑黄的种属及资源概况依据Zhou[13]等对桑黄分类,桑黄是对真菌界、担子菌门、伞菌纲、锈革孔菌目、锈革孔菌科、桑黄属的总称。吴声华等[14]在ITS序列的基础上研究发现东亚地区有6种桑黄:鲍姆纤孔菌(丁香桑黄)Inonotusbaumii、小孔忍冬纤孔菌(小孔忍冬桑黄)Inonotuslonicericola、大孔忍冬纤孔菌(大孔忍冬桑黄)Inonotuslonicerinus、桑黄纤孔菌(桑黄)Inonotussanghuang、瓦宁纤孔菌(杨树桑黄)Inonotusvaninii、锦带花纤孔菌(锦带花桑黄)InonotusWeigelae,其中常被人们使用的桑黄种类是桑黄纤孔菌[9]。桑黄这种真菌通常生长在新鲜树木上,分布零散且充满地域性[15],在我国桑黄主要分布在东北、华北、西北、四川、云南等地[15],具体分布地域比如黑龙江东部乌苏里江与兴凯湖之间、东北的长白山林区、哈尔滨与吉林市之间的老爷岭、张广才岭、西北地区陕西与甘肃交界的子午岭自然保护区等地,东北长白山地区是桑黄产出的一大主要基地[16]。1.2.3桑黄相关产品的开发应用在中国,桑黄使用历史记载悠久,但一直没有做深入研究,真正进行研究的时间是在上世纪90年代初,有外国人在中国大量购买野生“树黄”(桑黄),进而桑黄被人们发现[16],才开始引进了一系列的桑黄医药用药用价值以及栽培方式的研究。桑黄是一种十分具有营养的的药食同源真菌,其应用也非常广泛。桑黄相关产品一般分为两个阶段开发:首先是粗开发,直接将桑黄子实体磨成粉进行加工;其次是进行进一步加工,对桑黄的子实体或菌丝体进行加工提取,再将提取所得用于食品、药品或者做饲料添加剂[3]。因为桑黄的有效栽培仍处于一个瓶颈期,故直接使用子实体进行开发使用并不广泛,所以现在大多都是取桑黄菌种的提取物进行加工来制作相关产品。如下是一些可查的相关产品:(1):一种桑黄液体发酵茶[17]:这个产品是通过茶汁培养基来培养桑黄菌丝,采用响应面法对加工的工艺条件进行优化,最后所得成品颜色呈棕红色,有少许沉淀,有桑黄独特风味,口感怡人,无异味。(2):一种桑黄醋饮料[18]:首先用醋酸对桑黄和酒精发酵得到桑黄醋发酵原液;之后加酶糖化处理桑黄菌棒,高温煮一段时间后得桑黄糖化水提液;然后将上述两种提取液混合调配得半成品桑黄醋饮料,工艺到这就结束了;再经过均质、杀菌、灭菌再罐装即得最后产品。最后成品澄清透亮、颜色橙黄、酸甜适口,好喝又营养。(3):一种桑黄饮料的加工方法[19]:工艺如下:桑黄水提液、中药水提→液浓缩→配制→灭菌装瓶→成品。桑黄使用加工过程中常常会遇到因为桑黄保质期短而浪费原材料的情况,而这种加工工艺可以高效解决这个问题。(4):一种桑黄保健酒的制作方法[20]:属于保健食品领域。其工艺如下:在固体发酵基质上培养桑黄液体菌株,在25-30℃恒温和黑暗的条件下培养;再向培养基中加入45°或度数更高的白酒,密封,水提得固液混合物;再进行固液分离,最后上清液即为成品。注意这个工艺中水提的对象是被发酵培养后的固体培养基。最后成品具有去除自由基、提高免疫力的良好功能,且色泽光亮风味怡人。(5):日本和韩国率先研究出桑黄菌丝体的培养技术。韩国一公司使用12吨发酵罐培养桑黄菌丝体,得到大量桑黄菌,经过这种培养方法,可以解决桑黄资源不够的情况。故此,国内也想要拥有这项技术,正在研究如何高效培养菌体,使得桑黄资源不陷入短缺状态,最终达到桑黄真菌生产速度快速,产量大,且大量产活性物质[21]。1.3其他原料的功效作用本课题开发一款增加免疫的保健饮料,用其他的原料与桑黄进行配方配伍,原料除了桑黄之外还有:人参、玉竹、枸杞子、红枣、当归、桃仁、干姜,如下,对这些原料的功效作用进行分析:1.3.1人参人参,作为一种珍贵的中药材已经为人们所使用约有四千多年的历史了,现在有研究发现[22],人参对中枢神经系统等人体器官系统有影响作用,并且人参还具有抗应激作用,可以提高人体适应性、增强免疫以及抗衰老和其他效果。其中,人参能增强免疫力是因为它可以促进核糖核酸、脱氧核糖核酸和蛋白质合成,从而增强了人的代谢能力。有文献报道[23],人可以促进脾淋巴细胞增殖,增加小鼠免疫因子含量。实验证明[24]人参能增强正常小鼠细胞免疫和非特异性免疫(包括单核-巨噬细胞吞噬功能和NK细胞活性),增强小鼠体液免疫和细胞免疫,具有良好的免疫调节作用;能显著提高胸腺和脾脏系数,增强吞噬活性,也可以增强机体网状内皮系统吞噬能力。文献可查人参对免疫调节有良好的作用,并明显能加强人体的免疫能力,对增强免疫力有益处。1.3.2玉竹玉竹类属百合科黄精属。具有降低血糖、降低血脂、增加免疫力、扩张冠脉等功效[25]。玉竹是营养价值极高的医食两用的药材,所以它的使用也是十分广泛,尤其是在保健品市场,应用价值高。玉竹能增强免疫力。肖锦松等[26]给皮肤有烧伤的小鼠服用玉竹的乙醇提取物,服用6天后,可显著增加小鼠血清中溶血素的量,增强巨噬细胞的吞噬能力,提高脾淋巴细胞的增殖作用;他们将玉竹醇提物注射在腹部,刺激小鼠增强免疫的相关元素(CSF、CIF)增加,从而对增加免疫力;吴学敏等[27]发现对小鼠的腹腔注射玉竹提取物(PAOA)时,小鼠淋巴细胞的转化被抑制,故此提取物(PAOA)可有效克制别的细胞介入正常的免疫功能。以上实验均能证明玉竹具有增强免疫力这一功效作用。1.3.3枸杞子枸杞子是一味常见的中药材,富含营养价值,并且常用于多种多样的疾病中。根据现代研究[28],枸杞子具有增强免疫力、抗衰老、促进生长和造血功能、调节内分泌、降低血糖、提高生育能力等药理作用。关于枸杞子能够增强人体的免疫能力[29],因为枸杞中有枸杞多糖(LBP),是枸杞中的生物活性成分,且LBP能明显影响人体的非特异性免疫功能、细胞免疫和体液免疫。1.3.4红枣枣类属鼠李科枣属植物。枣果是传统中药和滋补保健佳品,它有镇静,舒缓神经,滋养血液,强化大脑,抑制癌症和增强免疫等的作用。红枣可以增强机体免疫力,因为枣中有红枣多糖,而枣多糖对人的免疫有调节作用。张庆等[30,31]做动物实验,给小鼠食用大枣提取物,经过8小时后,小鼠体内巨噬细胞的吞噬率和吞噬指数都有明显的提高,结果说明枣多糖能明显改善单核巨噬细胞的吞噬能力,因而可以影响机体免疫力。枣多糖分为三种,包括粗多糖、中性多糖和酸性多糖,这三种多糖都能增加淋巴细胞的繁殖,而且其作用强弱不一,其中中性最佳。石丽霞[32]等研究发现大枣提取物能增加小鼠的胸腺指数,说明有可能增强细胞免疫机能,亦能显著提高小鼠的血清中抗体体积数,从而提高机体体液免疫机能;从巨噬细胞吞噬实验可知该口服液能显著地提高小鼠巨噬细胞的吞噬功能,从而提高机体非特异性免疫。1.3.5当归当归,一种传统药食两用的药材,常用于女性补血和血,调经止痛,除此之外,还有抗血小板聚集、消炎、加强免疫、保护脑缺血、抗肿瘤、平喘,还适用于女性调经保胎等作用[33]。当归对巨噬细胞的分泌有促进作用,增强免疫功能[34]。当归多糖抗原均能刺激机体产生相应IgG(免疫球蛋白G)类抗体,也能在一定程度上激发非特异性lgG类抗体既交叉抗体的产生[35]。有实验证明[33]当归及当归不同配伍药对均能增强环磷酰胺致免疫功能低下小鼠的免疫功能,对机体免疫失衡具有保护作用。1.3.6桃仁桃仁,是一种常见的药材,常用于女性闭经痛经。桃仁含有营养物质十分丰富,有活血化瘀、抗氧化、提高免疫力等功效。桃仁中的多酚类物质是主要的生物活性物质,有文献表明,多酚类及不饱和脂肪酸类在清除机体过多的自由基,在保护机体不因过氧化而损伤发挥了重要作用[36]。闫国培等[37]经过实验发现桃仁种皮中的多酚对维持免疫抑制有一定作用,故能在一定程度上提高免疫力。大概的原理是通过增加免疫球蛋白的量,从而使乳酸脱氢酶(LDH)和酸性磷酸酶(ACP)更有活力,以此增强实验小鼠免疫力。总而言之,桃仁不仅活血化血而且能够在一定程度上提高免疫力。1.3.7干姜干姜是一味常见的药材,主要用于驱寒保暖,促进血液循环。主要用于脾胃虚寒时食用。除此之外,干姜与别的中药进行配方配伍,还能提高免疫力[38]。许衡均[39,40]等以干姜配伍其他中药研制的一款名叫的“寿星补汁”的饮品,经过大量动物实验和人们饮用观察证明,这款饮品可以补气补益,调节脾胃,还具有加固人的免疫系统和增加抗病防病能力,同时能促进恢复疲劳。1.4主要研究内容随着时代在发展,人们的生活质量需求也在逐渐增长,为了满足现代消费者对饮料的实时要求,本研究从现代人对饮料的需求出发,制作一款能够增强人免疫力的桑黄固体饮料,以及在此基础上改进配方制作一款更加适合女性饮用的桑黄女士饮料。主要研究内容包括:(1):设计正交试验研究桑黄人参固体饮料以及桑黄女士固体饮料的具体配方比。(2):对所得最佳复合配方的提取工艺进行优化。
实验部分2.1实验材料与仪器设备2.1.1材料实验过程中所用原材料和生产厂家如表2-1所示:表2-1原材料以及生产厂家材料名称生产厂家桑黄吉林大药房人参吉林大药房玉竹吉林大药房枸杞子吉林大药房红枣通化德济参药业有公司有限公司当归吉林敖东世航药业股份有限公司桃仁吉林大药房干姜吉林大药房蔗糖山东龙力生物科技股份有限公司柠檬酸江苏采薇生物技术有限公司麦芽糊精河南省新乡市中信化学有限有限公司2.1.2试剂与设备实验过程中用到的仪器和型号如表2-2所示:表2-2实验仪器及生产厂家仪器名称仪器型号生产厂家电子分析天平FA2104天津市博迪化工有限公司电磁炉BD22-C28佛山市顺德区北导电器实业有限公司电热鼓风干燥箱101-1AB天津市泰斯特仪器有限公司旋转蒸发仪N-1100上海爱朗仪器有限公司制造/东京理化器械独资工厂真空干燥箱DZ-2AⅡ上海一恒科学仪器有限公司2.2实验方法2.2.1原材料的水分测定根据国家标准GB/T5009.3-2016对原药材中的水分含量进行测定,看是否符合《中华人民共和国药典》2015年版[41](以下均简称为药典)中相应药材水分含量的规定。本实验采取直接干燥法来测定各原药材中的水分含量,药材中的水分是指原药材其在100摄氏度左右时进行干燥前后失去的物质的量,将原药材放在常压恒温的干燥箱中,在95~105℃的温度范围内干燥至恒重(恒重即干燥前后质量差在2mg以内),其中损失的重量即为原药材的中水的含量。具体操作方法如下:首先取洁净的称量瓶一个(若称量瓶不干净则刷洗干净),放在95~105℃干燥箱内,加热0.5~1.0h,取出将瓶盖盖好后放在干燥器内冷却半小时,称重并计数,并重复干燥至前后两次质量不超过3mg,即为恒重。将原材料粉碎磨细,过40目筛,称取2g~5g原药材(精确到0.0001g),放入经过恒重的称量瓶中,加盖称重,再放在101℃~105℃干燥箱中进行干燥,瓶盖依旧取下倾斜放在一边,进行2h~4h的干燥,盖好盖后取出,置于干燥器中冷却半小时到室温后称重。称重后再放到同一温度的干燥箱中去盖干燥1 h左右,取出放至干燥器内冷却0.5h后,称重。若此次称重与上一次称重相差不到2mg,即满足恒重的要求,前后两次差就是药材中水的含量,若相差在2mg以上,就再重复操作恒重过程。注意:恒重的时候,取最后两次干燥称重。2.2.2原材料的提取2.2.2.1桑黄提取液的制备挑选干净干燥,无腐烂变质,色泽均一质地坚硬的桑黄50g,将其破碎,按照1:20(g/mL)的料液比加入纯净水,提取两次,每次水提1.5h,然后用滤布进行过滤得提取液700ml,冷却至室温后放置至0℃左右保藏。2.2.2.2人参提取液的制备挑选干燥新鲜,保存完整,无腐败变质的人参50g,切碎成小片,按照1:20(g/mL)的料液比加入纯净水,提取两次,每次水提1.5h,然后用滤布进行过滤得提取液700ml,冷却至室温后放置至0℃左右保藏。2.2.2.3枸杞子提取液的制备挑选完整干燥,无腐败变质,色泽均一,气味香甜的枸杞子50g,做剪碎处理,按照1:20(g/mL)的料液比加入纯净水,提取两次,每次水提1.5h,然后用滤布进行过滤得提取液700ml,冷却至室温后放置至0℃左右保藏。2.2.2.4红枣提取液的制备挑选气味怡人,无腐败变质,且干燥的大枣50g,将其剪碎并去核,按照1:20(g/mL)的料液比加入纯净水,提取两次,每次水提1.5h,然后用滤布进行过滤得提取液700ml,冷却至室温后放置至0℃左右保藏。2.2.2.5玉竹提取液的制备挑选质地大小均匀,无腐败变质,干燥干净的玉竹50g,简单破碎后,按照1:20(g/mL)的料液比加入纯净水,提取两次,每次水提1.5h,然后用滤布进行过滤得提取液700ml,冷却至室温后放置至0℃左右保藏。2.2.2.6桃仁提取液的制备挑选颗粒大小均匀,无腐败变质的干燥的桃仁50g,简单进行破碎后,按1:20(g/mL)的料液比加入纯净水,提取两次,每次水提1.5h,然后用滤布进行过滤得提取液700ml,冷却至室温后放置至0℃左右保藏。2.2.2.7干姜提取液的制备挑选姜味适宜,质地均匀,无腐败变质的干姜片50g,破碎,按照1:20(g/mL)的料液比加入纯净水,提取两次,每次水提1.5h,然后用滤布进行过滤得提取液700ml,冷却至室温后放置至0℃左右保藏。2.2.2.8当归提取液的制备挑选干燥,无变质腐败的当归50g,剪碎处理后,按照1:20(g/mL)的料液比加入纯净水,提取两次,每次水提1.5h,然后用滤布进行过滤得提取液700ml,冷却至室温后放置至0℃左右保藏。2.2.3配方筛选方法2.2.3.1桑黄人参配方优化方法从药典[41]中查得桑黄、人参、枸杞子、红枣、玉竹这些原材料的每日推荐服用量,根据所查的每日推荐服用量(其中桑黄作为新资源食品,在2015版药典没有查证,其每日推荐服用量来自国家中医药管理局百度百科),在此基础上进行调整,从而确定本产品(桑黄人参饮料)的每日服用范围,如表2-3所示。表2-3桑黄人参固体饮料拟每日服用量药材《中国药典》规定每日服用量本产品每日可用量范围本产品每日用量人参(<10%)3~9g1~2g1g桑黄6~15g2~4g2g玉竹6~12g2~4g2g枸杞子6~12g2~4g2g红枣6~15g2~4g2g由上表可得桑黄人参饮料的大概比例为人参:桑黄:玉竹:枸杞:红枣=1:2:2:2:2,在此基础上,对桑黄、人参、枸杞子、红枣、玉竹提取液混合调配的比例,以及对蔗糖和柠檬酸的添加量,通过复合感官评分(外观、色泽、香气、滋味)作为评价标准进行优化,以得到桑黄人参配方最佳配比。2.2.3.2桑黄女士配方优化方法从药典[42]中查得桑黄、当归、红枣、桃仁、干姜这些原材料的每日推荐服用量,根据所查的每日推荐服用量(其中桑黄作为新资源食品,在2015版药典没有查证,其每日推荐服用量来自国家中医药管理局百度百科),在此基础上进行调整,从而确定本产品(桑黄女士饮料)的每日服用范围,如表2-4所示。表2-4桑黄女士固体饮料拟每日服用量药材《中国药典》规定每日服用量本产品每日可用量范围本产品每日用量桑黄6~15g2~4g2g当归6~10g2~4g2g桃仁(<10%)5~10g1.67~3.3g1.5g红枣6~15g2~4g2g干姜3~10g1~2g1g由上表可得桑黄女士饮料的大概配比为桑黄:当归:桃仁:红枣:干姜=2:2:1.5:2:1。在此基础上,对桑黄、当归、红枣、桃仁、干姜提取液混合调配的比例,以及对蔗糖和柠檬酸的添加量,通过复合感官评分(外观、色泽、香气、滋味)作为评价标准进行优化,以得到桑黄女士配方最佳配比。2.2.4感官评价标准对桑黄人参饮料和桑黄女士饮料的感官评价标准参考NY82.2—1988果汁测定方法,如表2-5所示:表2-5桑黄人参/女士饮料的感官检验评分标准项目评分54~321外观澄清透明无沉淀微浑浊略有沉淀较浑浊有少量沉淀严重浑浊或沉淀较多色泽色正常、光泽好色较深或色较淡、有光泽色深或几乎无色、光泽差色极深或无色、无光泽香气香气极浓纯正、无异香香气宜人,无异香香气淡、略带其它滋味有明显的异香滋味滋味极纯正,无异味滋味怡人,无异滋味淡、略带其它滋味有明显的异味本饮品进行感官检验的地点通风、明亮,将九组样品分为两组(一组四个、一组五个),装入同样的透明塑料杯,投入相同体积,温度控制在室温,提供给10名品尝员(男生5个,女生5个)品尝,每个品尝员随机选择一组样品品尝。这10名品尝员是来自长春工业大学食品科学与工程专业的经过感官评价课程培训的学生,品尝员均身体健康且无不良嗜好,能正确表达自己的感觉,能作出客观的评价,对食品的敏感性、准确性均良好,评价当天无香水气味干扰,每次评分之前用温开水漱口,品尝时不允许品尝员互相交谈品尝后感想。2.2.5水提工艺条件优化综合前期的预实验和一些水提工艺文献[42-44],以复合配方的出膏率的作为指标,选取提取次数(A)、料液比(B)、提取的时间(C)作为考察因素,每个因素分别选取三个水平,进行三因素三水平的正交试验,即L9(33)正交试验,以此来挑选最佳水提工艺。其因素和水平如表2-6所示:表2-6桑黄人参/桑黄女士饮料复合配方水提的因素和水平水平A(提取次数)B(料液比),g/mlC(提取时间),h111:100.5221:151331:201.52.2.6桑黄人参固体饮料和桑黄女士固体饮料的制备图2-1制备工艺流程图如图2-1为桑黄人参固体饮料和桑黄女士固体饮料的制备工艺流程图,对原材料先进行水分检测,在确定这两款固体饮料的最佳配比之后,按照最佳的水提工艺进行提取,将得到的提取液先进行浓缩至膏状之后转移到真空干燥器中进行减压干燥,从而获得干膏粉后,再与麦芽糊精、相应比例的蔗糖及柠檬酸混合制粒,最后对成品固体颗粒进行感官指标、理化指标、水分含量的检测。2.2.7对桑黄人参固体饮料和桑黄女士固体饮料的检测2.2.7.1对固体饮料感官指标的检测表2-7桑黄人参/女士饮料的感官评定标准项目标准分值外观/形体清亮透明,无沉淀现象,冲调性好19分-20分清亮透明,久置有微量沉淀,冲调性较好17分-18分清亮透明,久置浑浊,冲调性较好15分-16分浑浊明显,冲调性差14以下色泽色泽均匀,红棕色19分-20分色泽较均匀,浅红棕色17分-18分色泽较均匀,黄褐色15分-16分色泽不均匀,颜色差14以下风味各原料的混合香气浓郁,无异味19分-20分各原料有混合香味,无异味17分-18分各原料混合香味淡薄,无异味15分-16分无原材料的香味,风味单一,有异味14以下口感口感圆润,纯正,酸甜适度,回味浓19分-20分口感圆润,纯正,较爽口,有回味17分-18分口感圆润,纯正,甜味不足(过高),有回味15分-16分感圆润,纯正,酸味较突出,无回味14以下对于此产品的感官检验,参照GB/T17321-2012《感官分析方法二-三点检验》和GB/T21172-2007《感官分析食品颜色评价的总则和检验方法》其中的感官分析标准,以此制定《桑黄人参/桑黄女士固体饮料的感官评定标准》,如表2-5所示。2.2.7.2固体饮料水分含量测定对桑黄人参固体饮料/桑黄女士固体饮料的水分测定,参照国标GB5009.3-2016,选取其中的直接干燥法对其进行测定。具体操作如2.2.1所述。2.3实验结果2.3.1原药材中水分含量的测定结果经实验测得原药材中的水分含量如表2-8所示。表2-8原材料中药典规定水分含量及实验测得水分含量原材料名称药典规定水分含量%实际测得水分含量%人参12%10.60%玉竹16%14.74%枸杞子13%12.54%当归15%14.70%干姜19%17.00%其中桑黄、红枣、桃仁药典并未对其水分含量做规定,经实验测得他们的水分含量分别是12.30%、14.12%、13.26%2.3.2最佳配方的筛选2.3.2.1桑黄人参饮料根据药典得知其大概比例为人参:桑黄:玉竹:枸杞:红枣=1:2:2:2:2,通过试验(见表2-9),以感官评价评分为指标(见表2-10)对组方配比、蔗糖和柠檬酸添加的量进行优化,以此筛选最佳配比。表2-9桑黄人参饮料复合调配试验记录表实验号人参提取液/ml桑黄提取液/ml玉竹提取液/ml枸杞提取液/ml红枣提取液/ml蔗糖/g柠檬酸/g评分1244440.01820.01937525101010100.04850.04647735101010100.10230.04757945101010120.04510.04438055101010120.10210.04637765101010120.04590.1012817581010100.04470.0453848581010100.10050.0453799581010120.04540.045281表2-10桑黄人参饮料感官评价实验号外观色泽香气滋味分数143434434543454433434752454343443545344433447734544354344345445344379453445454435343454434805434534545443434343447764543444543454343454581744445434545454454453848455343554534354434247995445445454343435444381通过试验得桑黄人参饮料的最佳配方是人参提取液5ml、桑黄提取液8ml、玉竹提取液10ml、枸杞提取液10ml、红枣提取液10ml、蔗糖添加量为0.0447g、柠檬酸添加量0.0453g,参考桑黄人参配方提取液的比例,则桑黄人参配方的最佳配比为人参:桑黄:玉竹:枸杞:红枣=1:1.6:2:2:2、糖酸比1:1。2.3.2.2桑黄女士饮料根据药典得知其大概比例为桑黄:当归:桃仁:红枣:干姜=2:2:1.5:2:1,通过试验(表2-11),以感官评价评分为评价标准(表2-12),对组方配比、蔗糖和柠檬酸添加的量进行优化,以此筛选最佳配比。表2-11桑黄女士饮料调配实验记录实验号桑黄提取液/ml当归提取液/ml桃仁提取液/ml红枣提取液/ml干姜提取液/ml蔗糖/g柠檬酸/g评分110107.51050.04450.046275210107.51050.04580.098176310107.51050.10240.04558041087.51050.04350.04297751087.51050.04590.08787961087.51050.09450.04218071087.51250.04340.04578181087.51250.10010.04258391087.51250.04370.092878表2-12桑黄女士饮料感官评价实验号外观色泽香气滋味总分155444443433443434244752544433533534444334447634554353434345444543480454344453443535434433775434334354443544545447964445443444345353453580745345434553543434454818545443544554434344548394445444454543534234378通过试验得桑黄女士饮料的最佳配方是桑黄提取液10ml、当归提取液8ml、桃仁提取液7.5ml、红枣提取液12ml、干姜提取液5ml、蔗糖添加量为0.1001g、柠檬酸添加量0.0425g,参考桑黄女士配方提取液的比例,得桑黄女士饮料的最佳配比是桑黄:当归:桃仁:红枣:干姜=2:1.6:1.5:2.4:1、糖酸比为2:1。2.3.3对最佳配方水提工艺的优化2.3.3.1桑黄人参固体饮料表2-13桑黄人参水提工艺优化实验号A(提取次数)B(料液比),g/mlC(提取时间),h出膏率(%)111(1:10)1(0.5h)31.82%212(1:15)2(1h)27.23%313(1:20)3(1.5h)29.89%421240.37%522339.46%623132.74%731332.52%832138.79%933238.24%Ti10.8891.0471.0343.111Ti21.1261.0551.058Ti31.0961.0091.019Ki10.2960.3490.345Ki20.3750.3520.352Ki30.3650.3360.339R0.0790.0150.013表2-14方差分析表误差来源偏差平方和自由度F值显著性A0.011241.078P<0.05B0.00021.55P<0.1C0.00021P<0.1误差0.0112方差分析结果表明,对出膏率的影响为A>B>C,即水提次数对复合配方水提的出膏率的影响最大,其次是料液比,最后是水提时间,较优方案为A2B1C2,直观分析也显示最佳的水提工艺是A2B1C2,故其最佳提取工艺为料液比1:10g/mL、提取两次、每次时间1h。2.3.3.2桑黄女士固体饮料表2-15桑黄女士水提工艺优化实验号A(提取次数)B(料液比),g/mlC(提取时间),h出膏率(%)111(1:10)1(0.5h)26.41%212(1:15)2(1h)21.56%313(1:20)3(1.5h)24.54%421231.15%522336.47%623132.25%731229.87%832334.92%933134.51%Ti10.7250.8740.9742.717Ti20.9990.9300.837Ti30.9930.9130.906Ki10.2420.2910.325Ki20.3330.3100.279Ki30.3310.3040.302R0.0910.0180.046表2-16方差分析表误差来源偏差平方和自由度F值显著性A0.016230.466P<0.05B0.00121P<0.1C0.00121.274P<0.1误差0.0182方差分析结果表明,对出膏率的影响为A>C>B,即提取次数对复合配方水提的出膏率的影响最大,其次是提取时间,最后是料液比,较优方案是A2B2C3。直观分析也显示最佳的水提工艺是A2B2C3。其中,正交试验所得结果显示最佳提取时间是1.5h,是三水平的最后一个水平,故加验证:在料液比1:15g/mL、提两次的条件下,考察提取时间为2h。结果得桑黄女士复合配方出膏率为36.28%。故其最佳提取工艺为料液比1:15g/mL、提取两次、每次提取时间为1.5h。2.3.4对固体饮料检测的结果2.3.4.1对桑黄人参固体饮料检测的结果(1)、对感官指标的检测结果最后的桑黄人参固体饮料为红棕有光泽,质地均一的固体粉末,取1.9g固体饮料(根据人体每日服用量计算,一日两袋,一袋桑黄人参固体饮料的质量为1.9g),将其冲调融于100mL的热水中,该饮料的清亮透明,没有沉淀现象,冲调性比较好;香气浓郁,各原料的香气完美的混合到一起,没有异味;口感圆润,饮后回甘。(2)、对固体饮料水分含量的检测测得水分含量为3.7%<5%,满足国家规定。2.3.4.2对桑黄女士固体饮料检测的结果(1)、对感官指标的检测结果桑黄女士固体饮料颜色红色偏黑,质地均一;取1.7g固体饮料(根据人体每日服用量计算,一日两袋,一袋桑黄女士固体饮料的质量为3.34g,)将其溶于50mL热水中,冲调的饮料清亮透明,无沉淀现象,冲调性能好;远远闻过去,能闻见当归、红枣、桑黄、干姜的混合香气,仔细辨别,还能闻到淡淡的桃仁的香气;口感纯正,无过酸或者过甜,回味甘甜。(2)、对固体饮料水分含量的检测测得水分含量为4.2%<5%,满足国家规定。
结论与讨论3.1结论本实验主要研究了桑黄人参/桑黄女士固体饮料的研制,以及对这两款饮料的水提进行优化。首先是通过药典所查得确定一个大致的比例,然后在此基础上进行优化试验,以复合感官评分(外观、色泽、香气、滋味)作为评价标准,对复合组方比、糖和酸的添加量进行优化试验,从而得到最佳组方配比。对所得知的最佳配方的复合提取进行水提工艺的优化,以料液比、提取次数、提取的时间三个因素,设计L9(33)正交试验,以复合配方的出膏率的作为指标,进行水提工艺的优化。水提结束后通过真空浓缩干燥制作固体饮料。3.1.1桑黄人参固体饮料的最佳工艺由上述试验得:桑黄人参的最佳配比是人参:桑黄:玉竹:枸杞:红枣=1:1.6:2:2:2、糖酸比1:1。由人体每日服用量要求,按100袋,每日两袋计算,需原药材人参50g、桑黄80g、玉竹100g、枸杞100g、红枣100g,加蔗糖6.02g、柠檬酸6.02g,按照1:10g/mL的料液比进行水提、提取两次、每次时间为1h。3.1.2桑黄女士固体饮料的最佳工艺由上述实验得:桑黄女士饮料的最佳配比是桑黄:当归:桃仁:红枣:干姜=2:1.6:1.5:2.4:1、糖酸比为1:1。由人体每日服用量要求,按100袋,每日两袋计算,需要原药材桑黄100g、当归80g、桃仁75g、红枣120g、干姜50g,加蔗糖5.95g、柠檬酸5.59g,按1:15g/mL的料液比进行水提、提取两次、每次提取时间为1.5h。3.2讨论一款增强免疫力的桑黄固体饮料的开发研制在国内鲜有报道,十分具有创新性,本实验确定了最佳配方,对水提进行了优化,而且在此基础上还衍生了一款更加适合女性食用的桑黄女士饮料,但是仍然有许多的不足:实验中对固体饮料的研制工艺采用的是真空浓缩,但是除此之外还有许多别的加工工艺如热风干燥、冷冻干燥、挤压膨化等,因此可以对固体饮料的加工工艺进行优化。除此之外,对固体饮料的检验还可以更加完善。比如增加对最终产品的营养方面的检测,比如对桑黄固体饮料的总糖含量、还原糖含量、蛋白质含量、黄酮含量等做检测;还有对固体饮料安全方面的检测,如其中总铅、总砷的含量检测。虽然本产品衍生了一款针对女士的桑黄女士饮料,但还远远不够,可以针对不同的人群、不同的需求来衍生更多的系类桑黄饮料,对桑黄的利用更充分。
致谢六月时雨,树御清风。炎夏的春城早已绿树成荫。在这个炎炎夏季,正如最近时雨连绵,树木在雨滴的洗涤下绿茵茵得发亮。随着厚重雨滴的滴落,漫天杨柳絮的飞舞,我的论文到这里也接近尾声了。四年的大学时光宛若白驹过隙,唰——就到了该画句号的时候。一路走来,有开心有激动有难过,但是我很庆幸这些日子走来我遇见的人,包括老师同学学长学姐,他们总在某处你需要帮助的日子,伸出双手来帮助你。故我感激,感激这一路上,或是一起磕磕碰碰,或是在道路前方指引着你的这些人儿啊!我要感谢长春工业大学和化学与生命科学学院,感谢我们的学院!自2015年我步入这个陌生的环境,一直到现在,我对这个学院充满着感情。在一个人的人生道路上可能会出现了一座又一座前所未有的高峰等待我们攀登和超越,但在攀登和超越的路上,会有学校和学院的用他们所能给的给我建一个阶梯。学校和学院给予了我们的东西不仅是在学习中还是在生活上,比如说在实验方面给予了我们条件完善的设施、充足的实验材料和药品以及图书馆中海量的充满知识的文献。在这些帮助下我才得以进行一款增强免疫力的黄桑固体饮料的开发与研制的毕业设计,并以本实验为依托,让我可以顺利地完成我的毕业论文。在这篇论文的写作和修饰的最终阶段,我要发自肺腑的真诚地感谢张凤清老师的耐心陪伴和精心指导,从论文选题开始,到后面的设计和实验实施甚至是论文的撰写、修改,一直到最后定稿,都少不了老师给予我的帮助。我还要感谢我的父母,他们不仅给予我生命,而且尽他们所能的给我最佳的教育环境,养育之恩没齿难忘;我还要感谢实验室的学姐张伟云、张行等,她们在实验上给予了我极多的帮助和建议,是学姐们的帮助让我完成了我的整个实验;我要感谢我的伴侣李吉龙,他给予我的帮助,不仅仅是在精神上,而且还有很多实用的地方,是他的督促让我的论文更加完善;感谢我的同窗好友王家琳,在我困难的时候她总是会给予我鼓励和安慰,让我信心满满。执笔最末,心中仍有万千感慨,毕业论文的撰写是我大学四年的最后一道考验。设计一款保健饮料让我更加深刻的认识到自己的专业:实际自己动手操作的实验过程中,让我深觉每款问世的饮料都有多不容易,让我更加了解我们食品人是肩负如何的重任。这是我四年的大学经历之中的点睛之笔,最后还是感谢学长学姐和我的同学们的陪伴和鼓励,望各位身体健康,学业有成!
参考文献陶瑞霄.桑黄及其多糖的研究[J].世界家苑,2018,(7)涂成荣,张和禹,范涛.桑黄的人工栽培与应用研究进展[J].北方蚕业,2018,第39卷(2):9-13.刘惠知,邵晨霞,吴胜莲,等.桑黄菌的药理及产品开发研究进展[J].食用菌,2013,(5):1-2,3.DOI:10.3969/j.issn.1000-8357.2013.05.001.HeP,GengL,WangJ,WangZ,MaoD,XuC.Purification,characterizationandbioactivityofanextracellularpolysaccharideproducedfromPhellinusigniarius.
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