平面色谱法中展开剂的应用

平面色谱法中展开剂的应用

由于该层析成像设备简单且易于操作，该层析成像的初始识别和实验方法具有高度的特异性。由于样品少，化学合成和天然药物的定性和纯度试验，以及铬光刻的重要性，因此在分析中得到了很好的应用。这主要是由于分离效果，分离效果主要由三个因素决定。样品、吸附剂和广告剂。三者中样品的性质（如溶解度、酸碱性及极性）是固定的。吸附剂的活性和非活性，在吸附薄层色谱中通常以硅胶为主，故种类也是有限的。而展开剂种类则千变万化，并且受制约的因素比较多，主要的还是样品的性质和吸附剂。因此可以这样说能找到与样品及吸附剂相匹配的展开剂就能对样品的分离起决定性作用。以下就对展开剂的选择作一探讨：一、作为一种开口剂，应满足以下条件1助剂对芳香烃及其衍生物的分离至少要用AR试剂，展开剂如有杂质，则会直接影响分离效果。如三氯甲烷、乙酸乙酯和乙醚中含有少量的醇和水会使其极性增大；芳香烃中含有杂环化合物和酚类物质，卤化烃中含有游离酸也会使极性增大；三氯甲烷中的光气、乙醚中的过氧化物有可能氧化或破坏被分离组分等。2适当的稳定性一般不用三氯甲烷，因其中的乙醇量不够则易生成光气。3低粘度4影响显色和定量展开后能快速地在薄层上挥发样品，不影响显色和定量；挥发性过弱，饱和时间过长，不利于展开，过强则在展开过程中易冲盖而导致系统不饱和致使实验失败。5.尝试尽量减少6.二、展开剂的使用、洗脱和分离采用“相似相溶”原则来选择展开剂，也就是说极性强的组分需用极性强的展开剂，极性弱组分需用极性弱的展开剂。在TLC实验中，更多地采用试验方法，在薄层板上进行实验。在吸附薄层上先用单一的弱极性溶剂展开：若所选展开剂混合物的点都移到溶剂的前沿，则说明溶剂的极性过强，如果所选的展开剂几乎不能使混合物中的组分移动，则说明溶剂极性过弱。然后再按溶剂的洗脱顺序依次更换极性较大的溶剂进行试验。若用单一溶剂不能分离时，可用两种以上的多元展开剂，并不断地改变多元展开剂的组成和比例，使待测组分的Rf值在0.2～0.8之间，定量测定应在0.3～0.5之间，最终能使各组分之间有效地分离。但混合展开剂配制的比例要精确，特别是比例小的，如1～10ml的应用吸管移取，现用现配。1物质的化学结构由于物质的化学结构不同，则极性有所不同，为了更好地分析物质的化学结构与底剂之间的关系，表1是有关文献中定性地给出典型化学结构和底剂之间的强度因子ε0值。表中可见不同的化合物都有相应的ε0值。参照表1分析物质的化学结构，根据物质的化学结构在表1中确定相对应的ε0值，然后用ε0值在表2中确定接近ε0值的溶剂作为底剂，取ε0值尽可能低些的无氢键的的溶剂为底剂。使用表1和表2时应注意以下几点：（1）烃基和卤素取代芳香族化合物ε0值的改变不超过原来的±0.05；(2）典型的脂肪族化合物R=C6H13，化合物中R=2～20碳的化合物ε0值不超过典型化合物ε0值的±0.05；(3）物质的母核相同，分子中极性基团较多，则分子的极性越大。一般情况下，与溶剂易形成氢键的官能团数目增加分子极性增大，但在分子内形成氢键的，则分子极性减弱，相似的分子结构中，芳香、共轭双键多的极性增强。2加入调节剂：对被分离物质进行调节在吸附薄层中，调节剂在吸附和解吸附过程中起了主要作用，选择哪一种溶剂调节剂直接影响物质的分离效果。加入极性太强的调节剂，则调节剂物质优先占领吸附点；加入极性太弱的调节剂则物质较溶剂优先占领吸附点，这两种情况都不利于物质的分离，只有加入的溶剂与分离物质有相同或相似的官能团时，分离效果会较好。这样一方面有利于物质和调节剂竞争吸附点，另一方面物质与调节剂相似性结构增强，物质在展开剂溶解度也相应增大。加入调节剂应注意以下四个方面的内容,且这四个方面是相互联系的:(1)加入的调节剂与被分离物质应有相同或相似的官能团;(2)被分离物质具有两种或者两种以上的官能团时,加入一种调节剂,调节剂的官能团与被分离物质中一种官能团相同或相似,当加入第二种调节剂时,调节剂官能团与被分离组分的各种官能团相同或相似均可;(3)被分离物质具有多种官能团,如天然药物,一般情况下选择极性最强的官能团即加入调节剂的官能团与物质极性最强的官能团相同或相似;(4)被分离物质具有强极性的官能团时,任选一种官能团即可。3.拖尾抑制剂的筛选展开剂中加入少量酸或碱,一般的酸有乙酸、乙二酸、磷酸、甲酸等,碱包括三乙胺、二乙胺、吡啶、氨试液等,这类溶剂可抑制某些酸碱性物质或其盐类解离而产生斑点拖尾,故称之为拖尾抑制剂。4盐酸普鲁卡因为底剂的初步筛选盐酸普鲁卡因检查杂质“对氨基苯甲酸”时给出了苯-冰醋酸-丙酮-甲醇（14:1:1:4）的展开剂。根据上述理论分析，盐酸普鲁卡因的基本结构酸为“”。从表1中找到“”的结构，确定ε0值在0.25左右的溶剂为底剂，即苯为底剂。由于其具“”的结构，因此加入了相同官能团的冰醋酸为调节剂。三、．展开剂的选择1．对普通酸性的组分，特别是离解度较大的弱酸性组分，在展开剂中加入一定比例的酸，可防止拖尾现象；对于多元展开剂，例如：苯-丙酮，则可加入二乙胺来调整展开剂的pH值，使分离集中。2．在分离碱性物质，如生物碱，多数情况下是以氧化铝为吸附剂，则要选用中性溶剂为展开剂；若采用硅胶为吸附剂，则选用碱性展开剂为宜。例如：盐酸小檗碱的展开剂为：乙酸乙酯-三氯甲烷-甲醇-二乙胺（8:2:2:1）；茶碱的展开剂为：正丁醇-丙酮-三氯甲烷-浓氨溶液（4:3:3: