鸡传染性支气管炎病毒病的防控

鸡传染性支气管炎病毒病的防控

鸡感染支气管炎（ib）是一种由鸡冠状病毒引起的急性、高度接触性传染病。它的临床表现主要表现为呼吸道感染，以及肾、腺、胃和肠道的症状。这一疾病已成为危害畜牧业的主要疾病之一。现有疫苗株IBVH120、H52、W93等在该病的预防接种中起到了很大作用,但在疫苗生产中尚存在单胚抗原收获量低、后孵化鸡胚早死率高等问题。本研究选用IBVH120和W93毒株,对接毒量、接种日龄、收获时间、后孵化温度等生产条件进行了一些试验研究,现报告如下。1材料和方法1.1特定规则IBVH120株,EID50为106.4/0.1mL;IBVW93株,EID50107.5/0.1mL,均购自中国兽药监察所,本公司质检部保存、提供。1.2f鸡种蛋购自北京梅里亚维通公司,孵化至10日龄～12日龄备用。1.3eifmm-8400孵化机由青岛兴仪电子设备有限责任公司制造。1.4接种鸡胚的检测1.4.1IBVH120株。按表1方案对每组25枚鸡胚尿囊腔接种种毒,进行交叉试验,观察接种后33h,35h和37h收获时,鸡胚早死情况、单胚收获量并测定病毒滴度。1.4.2选用IBVH120株、W93株为种毒,以1.4.1试验得出的生产条件进行重复性试验。1.4.3以IBVH120株为种毒,以1.4.1,1.4.2试验得出的生产条件进行规模化生产。1.5收获按设计方案于接毒后不同时间收取鸡胚置2℃～8℃冷却4h～12h后收获胚液。1.6病毒滴度测量按常规方法测定鸡胚半数感染量(EID50)。2结果2.1鸡胚死亡率低,单胚收获量高接种后不同时间收获时,鸡胚早死情况、单胚收获量以及病毒滴度见表2。由表2可知,后孵化在34.5℃下孵育,鸡胚死亡率明显低于在37℃下孵育;在其他条件相同时,接种12日龄鸡胚比接种10日龄鸡胚早死率低、单胚收获量高。另外,不同接毒量、不同后孵化温度下,收获病毒滴度差异不显著(P>0.05);而相同条件下,不同时间收获的病毒滴度有差异,接毒后35h收获的病毒滴度明显高于33h和37h时所收获病毒滴度。2.2鸡胚的早死率及单胚收获量由表3可知,不论IBVH120株,还是W93株接种12日龄鸡胚,在34.5℃孵育35h,鸡胚早死率、单胚收获量及病毒滴度均无明显差异,且102.7EID50/0.1mL与103.1EID50/0.1mL不同接毒量之间的差异亦不明显。2.3接种鸡胚情况由表4可知,以102.7EID50/0.1mL的接毒量接种12日龄鸡胚,于34.5℃下孵化35h时收获,与历次生产情况相比,鸡胚死亡率降低,单胚收获量增高,所收获的病毒滴度均能达到规程要求标准。3讨论3.1鸡胚增殖对盐胁迫的影响有效利用率降低。考虑到在规程中,鸡NDVLaSota和IBVH120二联活疫苗的生产中,IBVH120毒种稀释度与IBVH120单苗生产不同,而前者后孵化死亡率很低。经换算,其中IBVH120在接种鸡胚时,稀释到102.7EID50/胚～103.1EID50/胚。吴金等发现将IBVHK株在鸡胚中增殖时,接种量以102.0EID50/胚～103.0EID50/胚为最佳;使用12日龄鸡胚增毒可降低死亡率并提高抗原单产量。有关资料介绍IBV在鸡胚上增殖时,降低后孵化的温度,可以减少后孵化鸡胚提早死亡的数量。本试验充分考虑以上条件,设置了试验组别。试验结果充分揭示了接毒量、后孵化的温度以及鸡胚日龄对IBV病毒增殖的影响关系,就疫苗生产而言,IBVH120毒株、IBVW93毒株以102.7EID50/0.1mL的毒量接种12日龄鸡胚,34.5℃孵育35h为较佳条件。3.2体制改革和生产成本孵育比37℃死亡率低。本试验结果基本符合以上规律。单胚收获量主要取决于鸡胚日龄,在一定范围内胚龄越大,胚液收获量也越大,同一胚龄,胚液收获量与接种量和后孵化温度关系不大。生物制品生产中,在保证产品质量的同时,必须降低生产成本,以实现对原材料价值的充分利用,达到最大的经济效益。本试验改变工艺后,鸡胚早死率由7.8%～15.9%下降至0%～0.3%,单胚收获量从平均每胚8.37mL提高到平均每胚12.4mL,并且所有抗原液病毒含量均能达到部颁规程的要求