锁阳多糖提取工艺的研究

锁阳多糖提取工艺的研究

近年来的研究表明，多种植物糖具有重要的生理功能。锁阳是锁定科的根生植物锁阳的干燥茎，生长在沙子的广泛范围内，并与白刺（nifinatima）的根部相连。根据文献，锁阳具有补肾阳、润肠、强腰膝的功效。现代研究表明，锁阳具有良好的排便、去羟基自由基的作用、抗缺氧和抑制血小板聚集，葡萄糖皮质激素具有双向调节作用，对体液免疫也有显著的促进作用。同时，锁阳对艾滋病毒酶的抑制有文献报道。目前，锁阳的化学成分研究主要是结构分析，但提取技术研究尚未报道。在这项工作中，我们研究了锁阳中糖的提取过程，为开发锁阳活性成分提供了基础数据。1材料和机器1.1材料表面选用锁阳(CynomoriumsongaricumRupr.)的干燥肉质茎,2001年1月采自张掖市红沙窝.1.2主试剂葡萄糖、硫酸、苯酚、乙醇,均为分析纯.1.3pla电气池、电子天平mettletoldo7230G型分光光度计(上海精密科学仪器有限公司)、电热恒温水浴锅(上海沪南科学仪器厂)、电子天平(mettlerToledo,0.01mg/200g).2重量法的建立2.1葡萄糖浓度的测定精确称取105℃干燥至恒重的标准葡萄糖0.1000g,置100mL量瓶中,加蒸馏水溶解并稀释至刻度,葡萄糖浓度为1mg/mL,在使用前稀释成葡萄糖浓度为0.1mg/mL.2.2碳酸氢钠馏分溶液4g/l取苯酚200g,加铝片0.1g,碳酸氢钠0.05g,蒸馏收集182℃馏分,称取此馏分10g,加蒸馏水150g,置棕色瓶中备用.2.3浓硫酸溶液的制备吸取葡萄糖标准液(0.1mg/mL)0.2、0.4、0.6、0.8、1.0、1.2mL,分别置于具塞试管中,各加蒸馏水,使体积为2mL,再加苯酚液1.0mL,摇匀,迅速滴加浓硫酸5.0mL,摇匀后放置5min,置沸水浴加热15min,取出冷却至室温;另以蒸馏水2mL,加苯酚和硫酸,同上操作做空白对照,于490nm处测吸光度.根据所得吸光度和相应葡萄糖含量得标准曲线回归方程为Y=0.127387A-0.00073,r=0.9995,Y为葡萄糖含量(mg),A为吸光度,r为相关系数.3样品溶液的制备3.1水景浴根据试验设计,按一定料液比(锁阳粉每次称量为1g)、提取温度、提取时间,把样品置于具塞三角瓶中以防水分损失.3.2粗多糖的制备浸体液离心后,残渣弃去,上清液加入95%乙醇溶液,使含醇量达到80%,放置过夜后离心,沉淀物用80%乙醇洗涤得粗多糖.粗多糖用蒸馏水溶解后定容100mL瓶中,根据回归方程算出多糖的含量.4结果与分析4.1正交试验,确定提取温度和时间、料液比是主要因素,采用l933在多糖提取工艺中,影响因素很多,但在因素实验基础上,选定提取温度、时间、料液比为主要因素,采用L9(33)正交试验进行提取温度、提取时间、料液比三因素三水平的正交组合试验,各因素水平见表1.4.2结果通过正交实验,确定锁阳多糖的最佳工艺条件,结果见表2.4.3因素与多酚分布之间的关系图4.4提取时间和温度对多糖得率的影响从表2和图1可知,浸提温度(A)是影响锁阳多糖得率最主要因素.随着温度升高,多糖的得率升高,各水平之间的差别达到了极显著.94℃为最佳提取温度,温度高于94℃可能会影响多糖的活性,因此浸提温度不宜过高.料液比(B)对多糖的影响不显著.锁阳多糖是一种酸性杂多糖,这种多糖在水中的溶解度可能很大.较低的料液比多糖绝大多数溶出,因此随着料液的增加多糖得率不显著,故选用料液比为1∶15,这样既省时又经济.提取时间对锁阳多糖影响也较大,随着提取时间的延长,多糖得率也随着增加,但增加趋势不大,故不需过长时间的