当归多糖对糖尿病大鼠降糖和改善临床症状的影响

当归多糖对糖尿病大鼠降糖和改善临床症状的影响

糖尿病是一种以糖、脂肪和蛋白质紊乱为特征的慢性颅内疾病。其病因十分复杂,目前认为遗传、环境和饮食等方面均可以导致糖尿病的发生,并且病程潜伏期通常可以长达7～10年,并发症多,尤其是大血管和微血管并发症已经成为危害人类健康的第3大杀手。目前临床上用于治疗糖尿病的首选药是具有明显降糖作用的化学药和胰岛素,但它们的副作用、耐药性和不能很好的干预并发症的发生等方面限制了其广泛应用,因此糖尿病患者通常不能被有效的治疗,糖尿病患者的人数仍然在持续不断的增加。目前还没有一种西药能很好的治愈和有效的干预糖尿病并发症的发生。中药具有药物作用缓和、持久、毒副作用小,可以从整体水平上治疗和防治慢性疑难病症等特点。所以,开发高效低毒的抗糖尿病中药产品将是一个具有发展前景的研究领域。当归为伞形科当归属植物当归(AngelicasinensisColive)的干燥根,具有活血止血、调经止带等功效。当归多糖是当归中的主要成分之一,近年来研究发现当归多糖对机体免疫系统、造血系统有明显的作用以及它在抗肿瘤、抗放射性损伤方面具有良好的疗效。同时,当归在糖尿病的复方中也被广泛应用,因此,本文将研究当归多糖的降糖效果和初步探讨其降糖机制,为深层次开发当归的降糖药物奠定良好的基础。1材料和方法1.1与试剂及仪器动物健康Wister大鼠,体重为(200±20g),哈尔滨医科大学实验动物中心提供。药品与试剂及仪器当归多糖(桂林市三棱公司生物制品有限公司,多糖含量为79.2%),链脲佐菌素(Sigma公司),柠檬酸、氢氧化钠均为分析纯(上海国药集团化学试剂有限公司),盐酸二甲双胍片(浙江嘉兴生化制药厂),血糖检测仪(美国强生公司),胰岛素放免试剂盒(中国原子能研究所)。1.2方法1.2.1造模前后大鼠血糖测定Wister大鼠体重为(200±20)g65只,在一定温度、湿度和光照条件下适应环境7天后,腹腔注射STZ溶液(STZ浓度为6.5mg/ml,用柠檬酸缓冲液配制,氢氧化钠调节pH值为4.5)55mg/kg,给药后72小时测定大鼠血糖,以血糖值高于16.7mmol/L为造模成功。1.2.2单次给药和大鼠输注后管理量造模成功的糖尿病大鼠50只被随机分成5组,分别为模型对照组、阳性药物组、低、中、高AP组,同时10只未造模的Wister健康大鼠为健康对照组。分别于每天的早9点灌胃给予生理盐水、二甲双胍150mg/kg、AP20mg/kg、60mg/kg、200mg/kg。给药时间为28天,分别在给药0、7、14、21、28天尾静脉取血测定血糖值同时测量体重;分别于给药0、7、14、21、28天后动物上代谢笼14小时,记录饮水量、饮食量和尿量。并且于给药前后眼眶取血,肝素钠抗凝,3000r/min离心5分钟,分离血浆。按照胰岛素放免试剂盒说明书分别测定给药前和给药后胰岛素水平。1.3对试验动物数据进行t检验各指标检测结果均用(x¯±s)(x¯±s)表示,同时用Excel软件,对试验各组动物数据进行t检验。P<0.05,有差异且具有统计学意义,P<0.01有显著的差异且具有统计学意义。2结果2.1造模成功率高65只Wister大鼠腹腔注射浓度为6.5mg/ml,剂量为55mg/kgSTZ柠檬酸溶液,血糖值高于16.7mmol/L的动物为50只,造模成功率为77%。2.2降糖效果与剂量的关系AP各组在给药2周时,与模型组相比即显示出降糖效果,且降糖效果与剂量成依赖关系,并且随着给药时间的延长,AP呈现持续的降糖效果。到给药4周时,当归多糖的高剂量组与二甲双胍组的降糖效果相当。实验结果见表1。2.3体重和体重减轻的变化试验期间分别于给药0时、7、14、21、28天测量体重,观察AP对糖尿病大鼠体重变化的影响。结果见图1,从图中可以看出,二甲双胍使糖尿病大鼠体重变化不明显;模型组大鼠的体重减轻体现糖尿病“一少”的特点;空白组大鼠体重增加,符合正常动物生长的特点;AP能使糖尿病大鼠的体重增加,进而可以改善糖尿病大鼠体重减少的现象。2.4ap对糖尿病大鼠尿量的影响试验期间分别于给药0、7、14、21、28天动物上代谢笼14小时,固定饮食量和饮水量同时收集尿量,观察AP对糖尿病大鼠饮食量、饮水量和尿量变化的影响。结果见图2～4,从图中可以看出,模型组大鼠的饮水量、饮食量和尿量均随着时间的延长而显现增加的趋势,然而二甲双胍组和AP各组均能使糖尿病大鼠的饮水量、饮食量和尿量均减少,进而可以说明二甲双胍和AP均能改善糖尿病“三多”的现象。2.5ap对大鼠血浆胰岛素水平的影响给药前后,除了模型组之外,各组的血浆胰岛素水平均没有明显的变化。实验结果见表2。3ap降糖作用的临床意义链脲佐菌素是一种胰岛化学损伤制剂,常被用于制备糖尿病模型,其成模率较高。糖尿病是一种多因素引起的多器官损伤的进行性的内分泌代谢紊乱性疾病。血糖水平是目前临床确定糖尿病患者的主要指标,所以临床上常用有显著降糖作用的西药作为治疗糖尿病的一线药物,西药主要是通过单一靶点和单一途径来发挥其降糖作用,这样在治疗糖尿病这种复杂疾病的时候,就不可避免的存在一定的副作用。所以,开发低毒、高效的降血糖药物是刻不容缓的。中药能通过多途径、多靶点在整体水平发挥其药理作用,与西药相比,将在治疗糖尿病等复杂疾病方面具有明显的优势。植物多糖被用于治疗糖尿病的研究已经有很长的历史,植物多糖主要是通过修复胰岛β细胞、增强胰岛素敏感性和外周组织对葡萄糖的利用、增强免疫系统功能以及肠道菌群调节等多条途径发挥其降糖作用。AP是当归的主要生物活性成分,并且当归在抗糖尿病的复方中被广泛应用,但是其降糖的效果和机制一直是不清楚的。所以研究AP的降糖作用有利于深层次地开发当归的用途。持续的高血糖一直被认为是诊断糖尿病的重要指标,本实验以临床上有显著降糖作用的二甲双胍为阳性对照药,分别考察高、中、低三种剂量的AP对STZ诱导的糖尿病大鼠的降糖作用,结果表明AP有显著的降糖作用且降糖效果呈现时间和剂量依赖关系。值得注意的是,高剂量的AP在给药4周时的降糖效果与二甲双胍的降糖效果相当。因此可以推断AP在开发治疗糖尿病药物方面存在巨大的潜力。一般认为胰岛素抵抗和胰岛β细胞损伤是糖尿病的主要病因,本实验发现二甲双胍组和当归多糖组在给药前后血浆胰岛素浓度均没有统计学的变化,说明AP发挥降糖作用不是通过增加胰岛素的浓度。“三多一少”被认为是糖尿病的典型临床症状,本试验分别考察了不同剂量的AP对饮水量、饮食量、尿量和体重的影响,结果表明给药2周后,AP能明显改善糖尿病大鼠的“三多一少”现象,且高剂量组与二甲双胍组的效果相似。因此